秦树桐
- 作品数:11 被引量:5H指数:1
- 供职机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 神经突起诱向因子Netrin-4受体的初步研究(英文)
- 2005年
- 目的研究神经突起诱向因子Netrin-4的受体,并分析Netrin-1已知受体DCC和UNC5H1作为Netrin-4共受体的可能性。方法以碱性磷酸酶(AP)标记的Netrin-4为配体,分别以原代培养神经元及转染DCC和UNC5H1的COS7细胞为对象,采用亲和细胞化学技术检测Netrin-4的受体,并分析Netrin-4的受体结合动力学及受体竞争结合动力学特征。结果通过载体转染表达已知Netrin-1受体DCC和UNC5H1的COS7细胞既能被Netrin-1结合,也能被Netrin-4结合;受体结合饱和实验显示Netrin-4与其受体快速结合(15min达高峰)后缓慢解离;受体结合竞争实验显示Netrin-1能竞争Netrin-4与其受体的结合。结论DCC和UNC5H1可能是Netrin-1与Netrin-4的共受体。由于Netrin-4受体结合动力学及受体竞争结合实验显示Netrin-1与受体的亲和力高于Netrin-4,提示Netrin-4可能还存在自身独特的受体。
- 余科科秦树桐汪思应周仁平张成岗
- 关键词:DCC配体
- 脑红蛋白重组腺病毒表达载体的构建与鉴定
- 2006年
- 目的:为进一步研究脑红蛋白(NGB)的生理功能并为基因治疗缺血性脑损伤提供有效的表达载体,应用细菌内同源重组方法分别构建含NGB及绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒表达载体,并对其进行鉴定。方法:用电转方法将腺病毒基因组质粒pAdEasy-1导入B J5183细菌,制备B J5183-pAdEasy-1细菌,再以后者作为电感受态细菌,与线性化质粒pShuttle-CMV-NGB进行同源重组,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-NGB,转染293细胞,制备含脑红蛋白基因的重组腺病毒。结果:通过PCR、序列测定和W estern印迹杂交鉴定,确认该重组腺病毒表达载体可正确表达脑红蛋白。结论:成功地构建了表达NGB基因的重组腺病毒载体,为深入开展脑红蛋白的功能研究以及用于缺血性脑损伤疾病的基因治疗奠定了基础。
- 刘铖高艳秦树桐文圣梅王立生张成岗
- 关键词:神经系统疾病脑红蛋白腺病毒科腺病毒载体基因表达基因疗法
- 神经突起导向因子netrin-4功能鉴定与受体研究
- 神经突起与其靶细胞之间精确联系的建立依赖于多种导向因子的协同作用。Netrin家族是第一个被鉴定出来的可溶性神经突起导向因子家族,是一类结构上与laminin相关的可分泌蛋白。在神经系统发育过程中,生长锥在细胞膜上表达不...
- 秦树桐
- 关键词:神经突起神经元分子机制
- 文献传递
- 基于神经细胞活性评价高功率微波照射安全性研究被引量:1
- 2007年
- 目的研究平均功率密度5mW/cm^2的高功率微波(HPM)对神经细胞活性的影响,为制定微波照射的安全标准提供参考数据。方法出生后12h内Wistar大鼠乳鼠皮层神经细胞常规培养7d后,进行HPM照射。采用细胞内ATP酶活性测定法,检测HPM对原代培养神经细胞总ATP酶、钙镁ATP酶和钠钾ATP酶活性的影响,并用MTT法检测照射后细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的变化,观察时间点分别为HPM照射后1和6h,1、3和7d。结果原代培养神经细胞经平均功率密度5mW/cm^2的HPM连续照射6min后,同一时间点内HPM照射组和对照组之间细胞SDH活性和各ATP酶活性均无显著差异。结论平均功率密度为5mW/cm^2的HPM照射对原代神经细胞的活性无显著影响,提示就神经细胞活性而言,该功率密度的HPM照射是安全的。
- 高艳秦树桐张成岗
- 关键词:高功率微波微波照射神经细胞ATP酶细胞活性
- 基干神经细胞活性评价高功率微波照射安全性的初步研究
- 目的研究平均功率密度5mW/cm2的高功率微波(high power microwave,HPM) 对神经细胞活性的影响,为制定微波照射的安全标准提供参考数据。方法出生后12h内 WiStar大鼠乳鼠皮层神经细胞常规培养...
- 高艳秦树桐张成岗
- 关键词:高功率微波微波照射神经细胞ATP酶细胞活性
- 文献传递
- 基于神经细胞活性评价高功率微波照射安全性的初步研究
- 目的 研究平均功率密度5 mW/cm2的高功率微波(high power microwave,HPM)对神经细胞活性的影响,为制定微波照射的安全标准提供参考数据.方法 出生后12h内Wistar大鼠乳鼠皮层神经细胞常规培...
- 高艳秦树桐张成岗
- 关键词:高功率微波微波照射神经细胞ATP酶细胞活性
- 文献传递
- 利用碱性磷酸酶融合表达技术研究神经导向因子netrin-4的功能
- 2006年
- 目的:采用碱性磷酸酶(AP4)标记技术研究netrin-4的神经导向功能和受体结合特征,并评估碱性磷酸酶作为标签分子在真核基因功能研究中的意义。方法:将netrin-4全长及3个结构域编码区cDNA克隆到碱性磷酸酶表达载体APtag4,成功构建真核表达载体AP4-netrin4、AP4-LNT、AP4-EGFL和AP4-NCT,进而在COS7细胞中表达出含有AP标签的融合蛋白,并通过神经组织块培养技术和神经元原代培养技术对其活性进行鉴定。结果:确认了netrin-4的神经突起导向功能。进一步通过对AP标签进行检测,发现netrin-4全长、LNT和NCT可与原代培养的神经元表面相结合,而EGFL不结合,说明神经元表面含有netrin-4受体或结合位点,且可能通过LNT和NCT结构域起作用。结论:netrin-4具有明确的神经突起导向功能,在神经元表面含有结合位点,同时发现碱性磷酸酶标签融合表达技术在真核基因功能研究方面具有一定优势。
- 秦树桐高艳王利红周仁平张成岗
- 关键词:碱性磷酸酶基因神经元
- 神经突起导向因子netrin-1及其受体与肿瘤发生被引量:4
- 2006年
- 近年来的研究发现,netrin1和其受体基因在多种肿瘤中表达下调,未与配体netrin1结合的DCC和UNC5H能够诱导细胞凋亡,而在结合配体后则抑制细胞凋亡。在肿瘤细胞中凋亡通路通常被抑制,而且在50%以上的肿瘤中p53是失活的。netrin1与其受体结合后能完全抑制p53诱导的细胞凋亡;同时p53也直接调节netrin1及其受体基因的表达。因此,netrin1及其受体可能在肿瘤发生过程中发挥重要作用。
- 秦树桐张成岗
- 关键词:肿瘤发生细胞凋亡
- 基干神经细胞活性评价高功率微波照射安全性的初步研究
- 高艳秦树桐张成岗
- 神经突起导向因子Netrin-4受体的研究
- <正>Netrin-4是神经导向因子netrin家族在脊椎动物中的第四个成员。研究发现netrin家族成员可通过其受体DCC、UNC5H等发挥神经诱向与斥向的功能。目前功能研究表明netrin-4能促进神经轴突的生长,并...
- 秦树桐余利红周仁平张成岗
- 关键词:轴突导向受体DCC
- 文献传递