纪玲玲
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划高等学校学科创新引智计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 烟草脉带花叶病毒CP基因的原核表达及免疫金标试纸条的研制
- 烟草脉带花叶病毒病是由马铃薯Y病毒属/(Potyvirus/)的烟草脉带花叶病毒/(Tobacco vein banding mosaic virus,TVBMV/)引起的,在我国很多主产烟区均有发生,并且涉及范围和危害...
- 纪玲玲
- 关键词：烟草脉带花叶病毒原核表达胶体金免疫层析试纸条
- 文献传递
- 烟草脉带花叶病毒试纸条的制作及田间病株的快速检测被引量：8
- 2009年
- 建立一种快速、特异、简便的烟草脉带花叶病毒检测方法。应用胶体金标记技术和免疫层析原理,在玻璃纤维膜、硝酸纤维膜的检测带和质控带上分别喷上胶体金与烟草脉带花叶病毒兔多克隆抗体的偶联物、烟草脉带花叶病毒兔多克隆抗体和羊抗兔IgG,研制出烟草脉带花叶病毒快速检测试纸条。病汁液稀释1000倍后仍可快速检出,3-10 min即可显示结果。对烟草上危害严重的4种病毒进行测试,均无非特异性反应。4℃干燥密封保存的试纸条有效期大于2个月。用试纸条对田间病株进行随机检测,结果与RT-PCR检测结果一致。
- 纪玲玲成巨龙朱信宁吴云锋张建新李蓓侯伟孙润红
- 关键词：胶体金免疫层析法烟草脉带花叶病毒试纸条
- 小麦蓝矮病植原体胸苷酸激酶基因(tmk)的分离、原核表达及酶活性分析被引量：4
- 2008年
- 【目的】克隆、表达小麦蓝矮病(WBD)植原体胸苷酸激酶基因(tmk),并分析酶活性,进一步研究胸苷酸激酶在植原体感染宿主及繁殖过程中的功能和作用机理,更好地防治植原体病害。【方法】PCR方法扩增tmk基因并进行序列分析,连接pET30a(+)表达载体后原核表达,经Ni-NTA柱层析纯化后进行酶催化活性分析。【结果】首次从小麦蓝矮病(WBD)植原体基因组中分离出胸苷酸激酶基因(tmk),该基因包含tmk-1和tmk-2两种,大小分别为630bp和624bp,其编码的氨基酸序列均包含3个与结合NTP/NMP相关的保守功能区。表达的融合蛋白TMK-1活性极低,酶活仅16.4U/mg,而TMK-2酶活高达112.41U/mg,且其最适催化条件为32℃、pH7.3、1.5mmol/LMg2+和1mmol/LATP。【结论】分析了胸苷酸激酶活性中心的一级结构序列及其催化活性随条件变化而改变的性质,为深入研究小麦蓝矮病植原体胸苷酸激酶在侵染寄主及其在宿主体内增殖的转录性质奠定基础。
- 李蓓纪玲玲吴云锋郝兴安
- 关键词：植原体原核表达酶活性
- 陕西烟区烟草脉带花叶病毒外壳蛋白基因的克隆和原核表达被引量：1
- 2011年
- 根据烟草脉带花叶病毒(TVBMV)CP序列合成上下游引物,利用RT-PCR方法获得了(TVBMV)CP基因。序列分析表明,TVBMV CP基因全长813nt,编码271个氨基酸;与GenBank中已报道的9个分离CP基因相比,其核苷酸及氨基酸序列同源性分别为90.28%-98.15%和97.05%-100%。将TVBMV CP基因经BamHI/NotI双酶切定向插入到pET30a载体中,构建了原核表达载体pET30-TVBMV CP,重组质粒经BamHI和NotI双酶切鉴定及基因测序验证正确后,用IPTG进行诱导表达。结果表明:TVBMV CP在大肠杆菌中获得了高效表达,表达产物的分子量为37 kD。用表达产物为抗原免疫家兔制备了特异性抗血清,其效价为1/2048。用Western-blot检测田间样品,其结果表明,制备的抗血清可用于检测田间的发病植株。
- 刘萍纪玲玲郝兴安吴云锋成巨龙
- 关键词：烟草脉带花叶病毒外壳蛋白原核表达抗血清
