胡文霞
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 供职机构：哈尔滨维科生物技术开发公司更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划项目国家科技支撑计划黑龙江省重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪水肿病大肠杆菌毒力基因突变菌株对猪的免疫效果研究
- 猪水肿病(Edema disease of swine,ED)是由某些特定血清型产志贺样毒素大肠杆菌(STEC)引起的断奶仔猪的一种急性致死性传染病。以眼睑、胃壁等处水肿、共济失调、惊厥和麻痹为特征。该病发病急、死亡快、...
- 胡文霞
- 关键词：猪水肿病大肠杆菌免疫应答
- 文献传递
- 大肠杆菌F_5菌毛胶体金免疫层析检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 为建立一种特异、稳定、敏感的检测产肠毒素大肠杆菌F5菌毛的胶体金免疫层析方法,用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗F5菌毛单克隆抗体,并喷涂在结合垫上;将纯化的兔抗F5菌毛多克隆抗体和羊抗鼠IgG包被于硝酸纤维素膜上,分别作为检测线和质控线;组装试纸条,进行敏感性、特异性、稳定性、重复性试验,并对模拟样品和临床样品进行初步检测。结果显示,对F5菌毛蛋白的最小检出量为38.2μg/mL;与大肠杆菌F4、F6、F41和F18ab菌毛无交叉反应;4℃条件下密封保存120d后仍能有效检出样品;批内、批间检测F5菌毛蛋白的结果没有差别且检测线清晰,具有良好的重复性;对14份临床样品检测的结果与间接夹心ELISA、平板凝集试验、PCR的符合率为100%。
- 杨旭东刘文鑫冯瑜菲胡文霞师东方
- 关键词：胶体金免疫层析产肠毒素大肠杆菌
- 断奶仔猪对毒力基因缺失大肠杆菌的免疫应答
- 2011年
- 为研究猪水肿病大肠杆菌SLT-Ⅱe编码基因突变菌株作为口服疫苗的免疫效果,本实验用构建的突变菌株(O139/SLT-Ⅱe*/07)口服免疫断奶仔猪后,检测突变菌株在仔猪肠道的定植情况,仔猪血清及粪便中的特异性抗体和细胞因子水平,并进行了免疫保护效力评价。结果显示,免疫后21 d仍能在实验1组(微胶囊口服免疫)和2组(直接口服免疫)的仔猪粪便中检出突变菌株;从免疫后第7 d、14 d和21 d开始,在实验1组血清样品中可分别检测到抗SLT-ⅡeA蛋白、F18ab菌毛蛋白和O139抗原的IgG抗体(P/N>2);从免疫后第7 d、14 d开始,在粪便中可分别检测到抗SLT-ⅡeA蛋白、SLT-ⅡeB蛋白、O139抗原、F18ab菌毛蛋白的sIgA抗体(P/N>2);免疫仔猪血清中的INF-γ的含量升高;实验2组的血清特异性IgG水平和粪便中sIgA抗体水平比实验1组低;该突变菌株对仔猪具有免疫保护作用。研究结果表明该大肠杆菌基因突变株可作为仔猪水肿病口服疫苗的候选菌株。
- 胡文霞冯瑜菲何丽丽关玮琨江馗语师东方
- 关键词：猪水肿病大肠杆菌免疫应答
- 犬细小病毒环介导等温扩增检测方法的建立被引量：2
- 2013年
- 根据GenBank中犬细小病毒(CPV)VP2基因序列,利用Primer Explorer V4软件设计并合成了针对CPV VP2基因序列保守区域的4条寡核苷酸片段(F3/B3,FIP/BIP)作为LAMP引物。以CPV DNA为模板,通过对LAMP反应温度和时间的优化以及特异性试验、敏感性试验和对临床样品的检测,建立了一种针对CPV VP2基因的LAMP快速检测方法。结果显示,该LAMP检测方法只对CPV有梯状扩增条带,对犬瘟热病毒(CDV)、狂犬病病毒(RV)和犬腺病毒Ⅱ型(CAV-Ⅱ)无扩增条带;对CPV的最低检出量为2.1×10-2 TCID50,其敏感性约为常规PCR检测方法(最低检出量为2.1TCID50)的100倍,是犬细小病毒抗原快速检测试纸(最低检出量为101.5 TCID50)的1 500倍。临床样品的LAMP检测结果与PCR检测结果的符合率为100%。
- 关玮琨何丽丽冯瑜菲朱颖刘文鑫江馗语胡文霞师东方
- 关键词：犬细小病毒环介导等温扩增
- 犬瘟热病毒N基因环介导等温扩增检测方法的建立被引量：1
- 2013年
- 为建立犬瘟热病毒(CDV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究根据GenBank中CDVN基因保守序列设计合成了2对LAMP引物,内引物FIP、BIP和外引物F3、B3。以CDVN基因重组质粒(pMD-CDV-N)为模板,经反应条件优化、特异性试验、敏感性试验及临床样品检测。检测结果显示,该方法于61℃水浴60min即可完成反应,最低检出量为70个拷贝,比RT-PCR灵敏10倍。该检测方法仅对CDV产生阳性扩增,而对狂犬病毒,犬细小病毒,犬腺病毒Ⅱ型扩增结果均为阴性。用建立的LAMP方法检测临床样品,检测结果与RT-PCR检测结果一致。本方法简便,特异,有利于CDV的临床检测。
- 何丽丽关玮琨江馗语朱颖刘文鑫冯瑜菲胡文霞师东方
- 关键词：犬瘟热病毒N基因环介导等温扩增
- 重组大肠杆菌K88ab和K99蛋白制备的鸡卵黄抗体的效力评价被引量：11
- 2010年
- 为探索以重组大肠杆菌K88ab和K99蛋白为免疫原制备鸡卵黄抗体的可行性,本研究利用基因工程技术,在大肠杆菌中高效表达重组K88ab和K99蛋白。分别以重组蛋白和提取的天然菌毛为免疫原制备抗K88ab和K99菌毛的鸡卵黄抗体,并对抗体效价、特异性以及抗体的预防和治疗效果进行了检测和比较。试管凝集反应结果显示,以重组蛋白为免疫原制备的鸡卵黄抗体效价最高可达1∶2 560,与用天然菌毛为免疫原制备的鸡卵黄抗体的效价基本一致。该抗体分别与K88ab+和K99+大肠杆菌发生特异性凝集,并能分别有效抑制K88ab+和K99+大肠杆菌对新生仔猪肠上皮细胞的吸附。临床应用结果显示,本实验制备的卵黄抗体对仔猪黄痢和仔猪白痢的预防有效率为100%,保护率为91%;治疗有效率为100%,治愈率为87%。实验结果表明该卵黄抗体对仔猪黄痢和仔猪白痢具有良好的预防和治疗效果。
- 刘文鑫冯瑜菲杨旭东胡文霞师东方
- 关键词：大肠杆菌K99重组蛋白鸡卵黄抗体
- 产志贺毒素Ⅱ型变异体大肠杆菌LAMP检测方法的建立被引量：5
- 2011年
- 为建立产志贺毒素Ⅱ型变异体(Stx2e)大肠杆菌的环介导恒温扩增(LAMP)检测方法,参照Gen-Bank中12条Stx2e序列和9条Stx2序列,针对Stx2e基因保守区域设计并合成4条引物,分别进行了反应条件优化、特异性试验、敏感性试验及模拟样品检测。结果显示,用所建立的LAMP方法对阳性样品扩增所得产物电泳后呈特征性梯状条带,阴性样品的扩增产物电泳后均无扩增条带。建立的LAMP方法对Stx2e+大肠杆菌的最低检出量为38CFU/管,敏感性高于PCR方法(3.8×103CFU/管)。LAMP和PCR对模拟样品检测结果的符合率为100%。该研究为仔猪水肿病的诊断和Stx2e+大肠杆菌的快速检测提供了新的方法。
- 冯瑜菲朱颖刘文鑫江馗语何丽丽关玮琨胡文霞师东方
- 关键词：大肠杆菌猪水肿病
