谢黎黎
- 作品数：16 被引量：54H指数：4
- 供职机构：中国热带农业科学院橡胶研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项项目国家天然橡胶产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 橡胶树转录因子HbERF1的克隆与功能分析被引量：2
- 2014年
- 【目的】克隆橡胶树转录因子HbERF1,分析其在橡胶树中响应非生物胁迫的表达模式,并通过在拟南芥中过表达鉴定其生物学功能,为橡胶树抗逆育种提供基因储备。【方法】利用RACE技术从巴西橡胶树中克隆到HbERF1全长序列,通过qRT-PCR技术分析其在非生物胁迫下的时空表达特性;通过农杆菌介导法转化拟南芥,利用Southern杂交和qRT-PCR技术对过表达植株进行鉴定,并分析过表达植株在干旱、高盐和PEG等胁迫条件下的表型及相关基因的表达特性,验证HbERF1的生物学功能。【结果】橡胶树转录因子HbERF1没有内含子,GenBank登录号为JQ914647,cDNA序列全长为1 178 bp,包括62 bp的5'非编码区、474 bp的3'非编码区和642 bp的开放阅读框。开放阅读框编码一条213个氨基酸组成的多肽,该蛋白具有一个保守的AP2结构域和一个EAR基序。系统进化分析表明,HbERF1属于AP2/ERF家族中ERF亚族的B-1类,与蓖麻RcERF、杨树PtERF46、拟南芥AtERF4的一致性最高,分别为72%、62%和61%。qRT-PCR分析表明,HbERF1在橡胶树叶片和树皮中均能响应高盐、干旱和PEG胁迫,基因的表达在叶片中受ABA、MeJA的抑制,而在树皮中则受ABA、MeJA和SA的抑制。在高盐和PEG胁迫下,叶片中的HbERF1在处理前期(≤8 h)表达水平都低于对照,而树皮中的HbERF1在胁迫4 h时就受到强烈诱导。在干旱胁迫下,随着干旱程度的增加,HbERF1在叶片和树皮中表达水平持续增加,且在树皮中的表达要高于叶片中的表达。HbERF1的过表达提高了拟南芥的抗旱性、耐盐性和耐PEG胁迫的能力,并抑制了乙烯受体基因AtETR1和AtERS1的表达。在过表达植株中,AtETR1和AtERS1的表达水平分别比野生型中的降低了19倍和9倍,差异极显著(P<0.01)。在高盐胁迫下,过表达植株中AtRD22和AtRD29A的表达水平持续上升,且上调幅度高于WT,分别为对照的115倍和100倍;在20%PEG胁迫下,AtRD22和AtRD29A的表达都受到诱
- 安泽伟谢黎黎王其同李雅超程汉胡彦师黄华孙
- 关键词：巴西橡胶树转录因子非生物胁迫ERF
- 温度和pH对农杆菌介导转化橡胶树悬浮细胞的影响被引量：3
- 2013年
- 橡胶树胚性细胞悬浮培养系及其植株再生体系的建立可为橡胶树遗传转化研究提供良好的材料。以橡胶树品种热研8-79悬浮培养的胚性细胞为受体,研究了共培养基pH值和共培养温度对农杆菌介导的橡胶树胚性悬浮细胞遗传转化的影响。结果表明:pH5.2～5.4、20℃～22℃共培养适宜于农杆菌介导的橡胶树胚性悬浮细胞的遗传转化。
- 周权男谢黎黎黄天带华玉伟孙爱花黄华孙
- 关键词：橡胶树胚性细胞PH
- 一种农杆菌介导的获得橡胶树转基因植株的方法
- 本发明涉及一种农杆菌介导的获得橡胶树转基因植株的方法，包括工程菌液的制备，工程菌侵染橡胶树胚性悬浮细胞，橡胶树胚性悬浮细胞与工程菌共培养，橡胶树胚性悬浮细胞去除农杆菌并诱导产生胚性愈伤组织，抗性胚性愈伤组织的筛选及继代培...
- 周权男姜泽海李哲黄华孙黄天带戴雪梅谢黎黎毕政鸿
- 文献传递
- 一种植物双基因共表达载体的构建方法
- 本发明涉及一种植物双基因共表达载体的构建方法，其特征在于通过PCR扩增将质粒pGWB605(GenBank登记号AB543114)中的间隔序列两端添加Ncol和EcoR I内切酶酶切位点后，将间隔序列克隆入pXCS-HA...
- 安泽伟翟琪麟李雅超赵建文谢黎黎高新生李维国黄华孙
- 文献传递
- 橡胶树冷应答转录组cDNA-AFLP分析被引量：28
- 2010年
- 以橡胶树11个抗寒无性系和12个不抗寒无性系为研究对象,利用cDNA-AFLP技术对23个橡胶树无性系低温处理前后的基因表达谱进行差异分析。结果表明:通过100对引物组合的扩增筛选,共获得12条在2组材料中表现一致的差异片段(GenBank登录号:GO269543-GO269554);BLASTn和BLASTx比对分析显示,TDF7-8,TDF5-15,TDF16-103条片段分别与植物抗逆相关的ABC转运蛋白、3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶(DAHPS)、WRKY基因有较高相似性,其余9条片段在GenBank未比对到同源序列。
- 安泽伟陈根辉程汉赵彦宏谢黎黎黄华孙
- 关键词：橡胶树CDNA-AFLP胁迫抗寒性分子育种
- 一种分离植物低分子量RNA的方法
- 本发明提供了一种分离植物低分子量RNA的方法，主要包括：样品处理，DNA和蛋白质的去除，大分子量RNA的去除，低分子量RNA的获得，低分子量RNA的保存。本发明提取低分子量RNA过程中对DNA、大分子量RNA和低分子量R...
- 安泽伟李雅超谢黎黎翟琪麟胡彦师程汉黄华孙
- 文献传递
- 双丙氨磷在橡胶树遗传转化中的应用
- 2013年
- 本研究以GV3101::pMP90RK为工程菌株,bar基因作为筛选标记基因,研究了双丙氨磷在橡胶树根癌农杆菌介导法转基因体系中对转基因愈伤组织的筛选效果,并利用该体系将橡胶树转录因子HbWRKY5转入橡胶树无性系热研8-79中。实验结果表明,3mg/L双丙氨磷可作为橡胶树转基因体系中抗性愈伤组织筛选的最佳浓度。本研究中共获得了3个抗性愈伤组织系,抗性愈伤经过体细胞胚发生共获得234个体细胞胚,经植株再生培养后共获得22株再生植株。对再生植株进行的PCR鉴定结果表明,所获得的再生植株均为转基因植株。因此,bar基因结合双丙氨磷的筛选体系可以作为橡胶树转化体系中的有效筛选体系。
- 谢黎黎安泽伟姜泽海李雅超翟琪麟黄华孙
- 关键词：巴西橡胶树BAR基因抗性筛选再生植株
- 一种分离植物低分子量RNA的方法
- 安泽伟李雅超谢黎黎翟琪麟胡彦师程汉黄华孙
- 该成果所发明的是一种简单、高效的提取高质量植物低分子量RNA的方法，主要包括：样品处理，DNA和蛋白质的去除，大分子量RNA的去除，低分子量RNA的获得，低分子量RNA的保存。该发明提取低分子量RNA过程中对DNA、大分...
- 关键词：
- 一种植物双基因共表达载体的构建方法
- 安泽伟翟琪麟李雅超赵建文谢黎黎高新生李维国黄华孙
- 该成果所发明的构建植物双基因共表达载体的方法，其特征在于通过对pXCS-HAStrep质粒引入一段特殊的间隔序列，并在其两端分别引入Nco I和EcoR I内切酶酶切位点，构建了植物双基因共表达载体pXCS-Dgene-...
- 关键词：
- 关键词：基因表达载体
- 一种分离植物低分子量RNA的方法
- 本发明提供了一种分离植物低分子量RNA的方法，主要包括：样品处理，DNA和蛋白质的去除，大分子量RNA的去除，低分子量RNA的获得，低分子量RNA的保存。本发明提取低分子量RNA过程中对DNA、大分子量RNA和低分子量R...
- 安泽伟李雅超谢黎黎翟琪麟胡彦师程汉黄华孙
