郭朝华 作品数:117 被引量:520 H指数:13 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 军队指令性项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
骨髓基质细胞对放射损伤复合烧伤小鼠粒单系祖细胞生长的影响 被引量:2 1995年 研究骨髓基质细胞对放射损伤复合烧伤小鼠粒单系祖细胞的影响。结果表明:(1)基质细胞培养上清液可支持少量粒单系祖细胞集落(CFU-GM)生长;而骨髓贴壁细胞层对CFU-GM有明显刺激生长作用。(2)加入外源性粒单系集落刺激因子(GM-CSF)时,未见到基质细胞对粒系祖细胞生长的影响。(3)烧伤、放射损伤、放射烧伤复合伤伤后3~5d,均见到CFU-GM生长受抑制。损伤后仍能见到基质细胞对粒系细胞生长的刺激作用。粒细胞受抑制严重的单放组和复合伤组,基质细胞的刺激作用较单烧伤组明显。以上结果说明,在放烧复合伤造血损伤的修复与重建过程中。 罗成基 郭朝华 周燕虹 施炎关键词:骨髓基质细胞 粒单系祖细胞 烧伤 补肾中药对免疫介导的再障小鼠IL-1、IL-2、IL-6活性的影响 被引量:4 1996年 60Co照射所致再障小鼠IL-1显著低于正常,补肾中药(补肾生髓Ⅰ号方)治疗后,IL-1活性明显增加;再障小鼠IL-6活性显著低于正常,治疗后IL-6水平增高至接近正常,且与IL-1呈显著正相关(r=0.904);再障小鼠IL-2的产生较正常明显增多,治疗组IL-2水平虽有所下降但无统计学意义。结果表明补肾中药可通过调节免疫活性因子IL-1、IL-6、IL-6的活性而促进骨髓造血重建。 冯江 张书模 张艳 郭朝华关键词:再障 IL-2 IL-1 补肾中药 小鼠 活性 小鼠全身照射后血中造血祖细胞水平变化 被引量:1 2004年 宫立众 孙士红 程天民 粟永萍 罗成基 郭朝华CD34^+脐血干细胞转染pIRES2-FL—IL-3后静脉移植对辐射损伤小鼠的影响 被引量:1 2008年 目的观察CD34^+脐血干细胞转染质粒载体pIRES2-FL-IL-3后静脉移植对辐射损伤小鼠的影响并探讨其机制。方法质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染脐血CD34^+干细胞,将其通过静脉移植到辐射损伤的小鼠体内(5×10^5个细胞,只,双表达组,12只),观察辐照后2、4和6周动物存活率及外周血象变化。6周时免疫荧光法检测实验小鼠脾脏CD34表达,RT-PCR法和Westernblot法进行IL-3和FL的mRNA和蛋白活性检测,另外3组为单纯CD34^+细胞组(CD34组)、转染pIRES2-IL-3CD34^+细胞组(IL-3组)和转染pIRES2-FL CD34^+细胞组(FL组),各组动物数均为12只。结果CD34组、IL-3组和FL组动物6周存活率分别为25.0%、50.0%和50.0%,双表达组动物存活率为91.7%,显著高于其余各组。2周时双表达组白细胞数量、红细胞数量及血小板数量显著高于其余3组。双表达组脾脏CD34免疫荧光强度显著高于其余3组,IL-3及FL的mRNA水平及蛋白活性均显著高于其余3组。结论真核共表达质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染CD34^+脐血干细胞后对辐射损伤小鼠具有显著的促脾脏造血作用,其机制与移植后小鼠脾脏组织中移植CD34^+脐血干细胞的聚集、增殖及目的蛋白的高效表达有关。 张勇 张林生 郭朝华 张红宾 董世武关键词:白介素-3 FLT3配体 干细胞 鼠真核表达的双顺反子质粒载体pIRES2-EGFP-MyoD的构建及鉴定 2003年 目的 构建鼠真核表达的双顺反子质粒载体 pIRES2 EGFP MyoD ,为研究MyoD对肌损伤的修复作用提供物质基础。方法 从质粒EMSV上用EcoRI酶切下MyoDcDNA片段 ,进行琼脂凝胶电泳 ,切胶回收纯化 ;EcoRI酶切 pIRES2 EGFP ,将线形化的载体与回收的MyoDcDNA片段用T4DNA连接酶连接 ,克隆出双顺反子质粒载体pIRES2 EGFP MyoD ,并分别用HindⅢ酶切和测序对重组质粒进行鉴定。结果 凝胶电泳和测序结果均证明已将MyoDcDNA亚克隆入pIRES2 EGFP内。结论 成功地构建了鼠真核表达的双顺反子质粒载体pIRES2 EGFP MyoD。 张勇 邹仲敏 郭朝华 王劲 范文辉 罗成基 程天民关键词:MYOD 真核表达 质粒 放烧复合伤对小鼠巨噬细胞IL-12表达影响的实验研究 2002年 目的 探讨放烧复合伤对小鼠腹腔巨噬细胞数量、生长状态和IL 12基因表达影响的时效特点。方法 于不同时相点分离、计数放烧复合伤小鼠 ( 5Gyγ射线全身照射 +15 %Ⅲ度烧伤 )腹腔巨噬细胞 ,并观察其生长状态 ,RT PCR法检测其IL 12p35和p40的基因表达水平。结果 ①伤后巨噬细胞数量早期减少 ,后期恢复 ;②伤后IL 12p35表达量降低 ,而p40表达量增加 ;③伤后 3d是巨噬细胞数量及其IL 12基因表达变动最剧烈的时期。结论 放烧复合伤后IL 12p35基因表达的降低和IL 12p40基因表达的增强必将导致IL 12p70的减少和拮抗剂 (p40 ) 2 的增加。伤后 3d是放烧复合伤救治的关键时期。只有同时检测IL 12p35和p40才能正确反映放烧复合伤后IL 王延江 粟永萍 艾国平 胡川闽 冉新泽 刘晓宏 郭朝华 袁良平 程天民关键词:放烧复合伤 巨噬细胞 IL-12 基因表达 小鼠15%Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响 被引量:8 1999年 目的研究烧伤情况下骨髓造血基质细胞支持粒单系造血的功能变化。方法采用体外小鼠骨髓基质细胞融合培养和粒单系祖细胞集落(CFU-GM)培养的方法,动态观察15%Ⅲ度烧伤时骨髓基质细胞对粒单系祖细胞生长的影响。结果当在烧伤组基质细胞层上培养正常骨髓细胞的CFU-GM时,其集落生成能力在伤后1,3,5,7,10天均明显低于正常对照组,而同时培养的烧伤小鼠骨髓细胞CFU-GM集落则为伤后1~5天显著降低,第7天与正常组无差别,第10天时明显超过正常,与正常基质细胞层上培养烧伤组CFU-GM时有相同的变化趋势。结论烧伤时骨髓基质细胞支持粒单系造血的功能受到了一定程度的损伤,且较难恢复,而粒单系祖细胞的损伤则恢复较快。 郭朝华 罗成基 孔佩艳 周燕虹 邹仲敏 施炎关键词:烧伤 骨髓 基质细胞 粒单系祖细胞 E838对放射损伤小鼠活存及造血功能的影响 2001年 动物照射前后不同时间给予新型抗放药E838腹腔注射 ,观察其死亡率和死亡动物活存时间 ,并在用药后不同时间检测其外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、骨髓粒系祖细胞集落形成单位CFU -GM和造血干细胞CFU -S数 ,研究了E838对放射损伤小鼠存活及造血功能的影响。结果表明 ,E838预防用药能够明显提高损伤动物的 30d存活率及平均活存时间 ,对造血功能的研究结果也表明 ,E838预防用药能够减少损伤后外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、骨髓粒 -单系祖细胞数及造血干细胞CFU -S数的下降幅度。显示出E838对放射损伤具有确切的预防效果 。 郭朝华 周建军 胡华玲 孔佩艳 邹仲敏 周燕虹 冉新泽 粟永萍 罗成基关键词:E838 造血功能 存活时间 小鼠骨髓基质细胞对粒系祖细胞生长调控的实验研究 被引量:1 2002年 目的 研究放射损伤小鼠骨髓基质细胞对粒系祖细胞生长的影响。方法 采用体外小鼠骨髓基质细胞贴壁培养法和粒系祖细胞 (CFU GM)培养法。结果 伤后 3~ 7d ,有基质细胞贴壁的CFU GM生长明显低于无贴壁组 ;伤后 14d贴壁层形成后 ,放射损伤组的CFU GM生长明显低于正常对照组 ;放射损伤后 3~ 7d ,骨髓基质细胞可抑制正常CFU GM生长 ,用薄层琼脂分隔基质细胞贴壁层与靶细胞 ,其抑制作用减弱。当无外源性集落刺激因子 (CSF)时 ,基质细胞贴壁层对CFU GM生长仍显示一定刺激作用。结论 辐射使骨髓基质细胞功能受到一定损伤 ,但在放射损伤造血修复与重建过程中 ,骨髓基质细胞仍起着“刺激”与“抑制” 郭朝华 冉新泽 孔佩艳 张勇 周燕虹 邹仲敏 粟永萍 高京生 罗成基关键词:骨髓基质细胞 粒系祖细胞 造血基质细胞在造血重建中的作用 被引量:11 2000年 It is one of the important fields so far to in vestigate the effects of hematopoietic stromal cell on hematopoietic reconstitut ion. There are six problems in this field: ①The classification, characteristi cs and origin of stromal cells; ②The mechanisms of constitution for stromal cel ls in marrow hematopoietic inductive microenvironment; ③The proliferation and d ifferentiation of hematopoietic cell are supported by stromal cell; ④The bone m arrow hematopoietic reconstitution by marrow stromal cells transplantation; ⑤Th e hematopoietic function effected by abnormal marrow stromal cells; ⑥Unconventi onality of bone marrow hematopoietic inductive microenvironment in states of som e diseases etc. The related different points of views and some problems in this field are also discussed. 罗成基 陈幸华 邹仲敏 郭朝华 周燕虹关键词:造血基质细胞 造血重建 基质细胞 增殖分化