闫岗林
- 作品数：29 被引量：183H指数：4
- 供职机构：吉林大学生命科学学院分子酶学工程教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省自然科学基金吉林省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学更多>>
- 含硒抗病毒多肽的半胱氨酸缺陷型表达及鉴定
- 2014年
- 目的:在大肠杆菌中进行含硒抗病毒多肽的可溶性半胱氨酸缺陷型融合蛋白的表达,并对其纯化蛋白进行生物学活性的初步鉴定。方法:将含硒抗病毒多肽Se-GBVA10基因克隆到GST融合表达载体pGEX-2T中,转化至半胱氨酸缺陷型大肠杆菌BL21cysE51后进行半胱氨酸缺陷型表达,通过谷胱甘肽Sepharose 4B亲和柱纯化目的蛋白质,并对其含硒量、抗病毒活力等性质进行初步鉴定。结果:利用半胱氨酸缺陷型表达法成功地可溶性表达了sjGST-Se-GBVA10和sjGSTGBVA10融合蛋白,并经凝血酶切后获得了纯化的Se-GBVA10和GBVA10抗病毒多肽。测定SeGBVA10的含硒量为0.974 mol/mol peptide,GPX活力为47.52 U/μmol,其EC50为21.73μmol/L,CC50为849.41μmol/L。结论:Se-GBVA10具有与GBVA10相同的抗病毒活性,并具有一定的抗氧化活力。
- 王程隋春红闫岗林吕绍武牟颖
- 关键词：硒谷胱甘肽过氧化物酶
- 具有谷胱甘肽过氧化物酶活力的人源化含硒单链抗体
- 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)是生物体内抗氧化酶系的重要成员之一,它利用硒代半胱氨酸(Sec)作为催化官能团,通过故谷胱甘肽(GSH)催化还原氢过氧化物,从而保护细胞免遭氧化损伤,因此,它作为抗氧化剂具有广泛的药用价值。但...
- 王琳琳牟颖林凤杨文魁龚平生吕绍武闫岗林罗贵民
- 文献传递
- 单链抗体在大肠杆菌的可溶性表达及GPX模拟酶对心肌细胞的抗氧化作用
- 谷胱甘肽过氧化物酶(EC 1.11.1.9,GPX)是抗氧化酶系的重要一员,为了实现单链抗体的可溶性表达以制备GPX模拟酶,把具有GPX底物结合位点的单链抗体表达载体pTMF-2F3上去除了原2F3基因N端非必需的18个...
- 王楠牟颖孙晔吕绍武闫岗林罗贵民
- 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶单链抗体可溶性表达抗氧化
- 文献传递
- 具有GPX活性单链抗体的制备及其抗氧化效应被引量：4
- 2004年
- 为实现单链抗体的可溶性表达,制备具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活力的单链抗体,在单链抗体表达载体pTMF 2F3上去除原2F3基因N端非必需的18个氨基酸,采用新的表达载体pRose质粒,在2F3的N端引入13个氨基酸的前导肽,转入BL21(lysS)中,使其分泌到大肠杆菌的周质腔中得以表达,获得可溶性表达产物.产物经过分离纯化、WesternBlot印迹和硒化测活确定具有GPX活性的鼠单链抗体,其GPX活力为2530U/μmol.以脂质过氧化、细胞存活率和细胞膜完整性为指标的抗氧化实验研究表明,具有GPX活性的单链抗体对大鼠乳鼠表皮细胞有抗紫外线损伤的作用,是膜脂质过氧化的有效抑制剂.
- 李维佳魏景艳孙晔牟颖吕绍武闫岗林罗贵民
- 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶单链抗体可溶性表达抗氧化
- 2-TeCD对UVB致NIH3T3细胞损伤的保护作用
- 2016年
- 采用4,6-二脒基二苯基吲哚(DAPI)荧光染色法和流式细胞术考察谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力的人工模拟物2-TeCD对UVB致NIH3T3细胞损伤的保护作用.结果表明:2-TeCD可影响UVB致NIH3T3细胞中DNA裂解率、脂质过氧化水平、活性氧体积分数、细胞周期及P53蛋白表达量等指标,可通过清除自由基发挥对UVB损伤的防护作用.
- 尹居鑫龚平生佟毅吴延东武丽达吕绍武闫岗林
- 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶模拟物UVB
- 微波辐射诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的可能机制被引量：2
- 2011年
- 目的:观察微波辐射对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用10、30和50 mW.cm-2辐射强度的微波辐射SH-SY5Y细胞5 min,以假辐射组(0 mW.cm-2)为对照,光镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜下观察DAPI染色细胞核的形态;CTAB法提取细胞基因组DNA,电泳观察DNAladder;台盼蓝拒染法检测细胞存活率;AnnexinV-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡率;MTT法检测细胞相对活性;蛋白质印迹检测细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:微波辐射后SH-SY5Y细胞形态即刻改变,胞核、胞质结构欠清,细胞皱缩甚至脱壁;细胞核内的染色质出现不规则凝集,碎裂成2～5个微核;细胞DNA出现明显的梯状条带;细胞存活率随微波辐射强度增大逐渐降低,10 mW.cm-2辐射组与假辐射组比较,细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05),但30、50 mW.cm-2辐射组细胞存活率明显低于假辐射组(P<0.05);微波辐射后6 h的细胞凋亡率随辐射强度的增加逐渐升高,各辐射组细胞凋亡率均明显高于假辐射组(P<0.05);微波辐射后24和48 h,细胞相对活力随辐射强度的增加明显降低,各辐射组的细胞相对活力均明显低于假辐射组(P<0.05)。微波辐射后,细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、survivin表达水平逐渐下降,Bax、caspase-3和caspase-7表达水平逐渐升高,caspase-8和-9表达水平无明显变化。结论:微波辐射可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,其作用机制可能与survivin、Bcl-2蛋白表达水平下调、Bax蛋白表达水平上调及caspase-3和caspase-7的作用有关,而与caspase-8和caspase-9介导的caspase-3活化这一作用无密切关系。
- 王程李琴刘微闫岗林徐冶于洋刘师兵潘文干
- 关键词：微波辐射人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞细胞凋亡
- 含硒单链抗体酶的制备及其抗氧化作用
- 人类的许多疾病如脑卒中、肿瘤、白内障、克山病等的发病机理都与氧自由基的形成密切相关。生物体自身存在一系列的抗氧化物酶来消除体内代谢过程中产生的过氧化物,其中较具代表性的为含硒的谷胱甘肽过氧化物酶(GPX),它在分子水平上...
- 王楠牟颖孙晔吕绍武闫岗林罗贵民
- 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶单链抗体可溶性表达抗氧化
- 文献传递
- 具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的硒化环糊精的中试放大研究
- 2011年
- 将-环糊精的2位羟基进行硒化得到的产物(2-SeCD)作为谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的一种人工模拟酶具有广阔的应用开发前景。为了对其进行进一步的研究及生产,需得到大量的产物。在原有的研究基础上,将中试放大实验的剂量扩大为小试实验的50倍,在7次工艺成熟的中试放大实验中获得了大量的2-SeCD。通过碳氢元素分析、红外光谱分析、核磁共振分析、质谱分析等表征实验验证了放大实验所得产物的结构正确,并测定其活力为5.2 U/mol。在2-SeCD对细胞的生物学效应实验中,发现在2-SeCD浓度较低的条件下可降低细胞死亡率而在浓度较高的条件下却抑制细胞生长。通过形态学观察与DNA ladder检测发现高浓度的2-SeCD可诱导Hela细胞凋亡,并经凋亡因子caspase-3的相对活力检测确定此凋亡是由线粒体caspase激活途径诱发的。
- 王程梁冬雪吕绍武龚平生沈娜吕莉敏赵杨徐亚维赵刚牟颖罗贵民闫岗林
- 用水溶液中合成的量子点作为生物荧光标记物的研究被引量：157
- 2003年
- 以巯基丙酸 ( HS— CH2 CH2 COOH)为稳定剂 ,在水溶液中合成了具有窄而对称 ( FWHM=4 0 nm)的荧光发射带且尺寸为 3nm的 Cd Te半导体纳米粒子 ,并用此纳米粒子成功地标记了生物分子胰蛋白酶 .与单独的 Cd Te纳米粒子的溶液相比较 ,Cd Te-胰蛋白酶溶液的吸收光谱在 4 0 0～ 6 0 0 nm范围内较为平坦 ,其发射光谱蓝移 8nm,但发射峰的半峰宽不变 .实验证明 ,Cd Te-胰蛋白酶溶液吸收和发射光谱的变化是由Cd Te纳米粒子与胰蛋白酶之间的结合反应引起的 ,而不是由空气中的 O2 所引起的 ,加热可促进 Cd Te纳米粒子与胰蛋白酶之间的结合反应 .
- 林章碧苏星光张皓牟颖孙晔胡海杨柏闫岗林罗贵民金钦汉
- 关键词：量子点胰蛋白酶荧光分析半导体纳米粒子碲化镉生物分子
- 具有GPx和SOD双酶活性含硒76肽的制备及其穿膜效应被引量：1
- 2017年
- 根据模块酶原理设计一种嵌有穿膜结构域序列并具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)双酶活性的含硒76肽(Se-CuZn-76P),利用半胱氨酸缺陷表达法在单一蛋白生产(SPP)系统表达该肽,并鉴定其穿膜效应.实验结果表明:该方法可成功表达纯度较高的Se-CuZn-76P,并且每毫克蛋白表现出109μmol/min的GPx活力和1 218μmol/min的SOD活力;在Se-CuZn-76P存在的环境中培养肝L02细胞一段时间后,细胞内的GPx和SOD活力分别升高1.65和4.12倍,且Se-CuZn-76P可顺利进入L02细胞.
- 隋春红徐亚维闫岗林李强安英王程
- 关键词：谷胱甘肽过氧化物酶硒
