黄志刚
- 作品数:11 被引量:42H指数:3
- 供职机构:深圳市第三人民医院更多>>
- 发文基金:深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生机械工程更多>>
- 低氧诱导因子1α基因在大鼠终板软骨细胞中的表达及意义研究被引量:8
- 2017年
- 目的探讨低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)基因在大鼠终板软骨细胞中的表达情况及其与终板软骨细胞凋亡的关系。方法取8只10周龄SPF级雄性SD大鼠L1~5腰椎终板软骨组织,采用酶消化法分离培养终板软骨细胞并传代,取第3代细胞进行实验。首先将终板软骨细胞分为两组,分别于20%O_2常氧条件下(A组)以及0.5%O_2低氧下条件(B组)培养;培养24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测HIF-1α基因表达,Western blot检测凋亡蛋白HIF-1α、Bax、Bcl-2表达。然后,构建Lipofectamin^(TM)2000载体试剂和HIF-1αsi RNA/Lipofectamin^(TM)2000载体混合剂分别转染终板软骨细胞后,于0.5%O_2低氧条件下培养(分别为C、D组)。培养24 h后,倒置相差显微镜下观察细胞形态,行HIF-1α免疫荧光染色观察,流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测HIF-1α、Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9基因表达,Western blot检测凋亡蛋白HIF-1α、Bax、Bcl-2表达。结果培养24 h后,A、B组均见少量空泡坏死细胞;细胞凋亡率比较差异无统计学意义(t=1.026,P=0.471);B组HIF-1α基因及蛋白相对表达量显著高于A组(t=22.672,P=0.015;t=18.396,P=0.013);两组Bax、Bcl-2蛋白表达比较,差异均无统计学意义(t=0.594,P=0.781;t=1.251,P=0.342)。低氧培养24 h后,D组空泡坏死细胞较C组增多,且可见大量HIF-1α阳性终板软骨细胞;与C组相比,D组细胞凋亡率显著增高(t=27.143,P=0.002),D组HIF-1α、Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9基因表达较C组显著降低(t=21.097,P=0.015;t=34.829,P=0.002;t=18.673,P=0.022;t=31.949,P=0.007),HIF-1α、Bcl-2蛋白相对表达量较C组均显著降低(t=37.648,P=0.006;t=16.729,P=0.036),而Bax蛋白表达较C组提高(t=25.583,P=0.011)。结论缺氧条件下,终板软骨细胞中HIF-1α表达上调,以提高细胞耐氧性;HIF-1α可抑制终板软骨细胞在低氧环境中发生凋亡。
- 黄志刚王耀马克
- 关键词:低氧诱导因子1Α细胞凋亡
- 自制蛇形定向穿刺骨锥及配套弹性球囊和骨水泥导管在椎体后凸成形术中的应用观察
- 目的 探讨自行研制的蛇形定向穿刺骨锥及配套弹性骨水泥导管和弹性椎体撑开球囊,应用于椎体后凸成形术(PKP)中,治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折的安全性、疗效及适应证的选择。方法 采用自制蛇形骨锥及配套弹性骨水泥导管和弹性椎体...
- 马克周振忠黄志刚
- 关键词:脊柱骨折椎体成形术
- 病灶清理联合VSD灌洗负压引流治疗四肢活动性关节结核
- 目的:针对四肢活动性关节结核,探讨在关节镜下或手术切开关节清理后,应用VSD持续灌洗负压封闭引流方法的疗效和临床应用价值。方法:回顾性分析2012 年1月至2015 年6月诊治的61 例四肢活动性关节结核的患者,其中男4...
- 马克黄志刚詹子睿袁善友刘晶魏奇峰周振忠
- 关键词:结核骨关节负压封闭引流
- 探讨环状RNA标记物诊断脊柱结核的潜在价值
- 2022年
- 目的探讨环状RNA(circRNA)标记物诊断脊柱结核的潜在价值。方法选取2016年6月—2018年9月深圳市第三人民医院收治的50例脊柱结核患者作为研究组,另选择同期进行体检的健康人员50名作为对照组,提取受试者血清RNA实施circRNA基因芯片筛查,将存在差异表达circRNA筛选出后通过实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法加以验证。结果circRNA基因芯片初筛获取存在表达差异circRNA36个,表达增高及降低的比例为15/21。经实时定量PCR验证后发现,hsa-circRNA_400005表达量较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),与芯片检测结果基本一致。联合分析circRNA及miRNA表达谱发现,hsa-circRNA_400005与hsa-miR-19a-3p之间存在负相关关系(P<0.05)。结论脊柱结核患者存在大量特异循环表达的circRNA及miRNA,但circRNA的稳定性更高,可作为早期诊断脊柱结核更具潜力的分子标记物。
- 黄志刚马克刘晶
- 关键词:标记物脊柱结核
- 脊柱结核患者血清特异性循环miRNA表达水平及其临床意义被引量:6
- 2021年
- 目的探究脊柱结核患者血清特异性循环miRNA表达水平及其临床意义。方法选择2016年6月至2018年9月深圳市第三人民医院收治的50例脊柱结核患者作为观察组,选择同期在上述医院进行体检的50例健康志愿者作为对照组。分别提取其外周血血清中RNA,经miRNA基因芯片检测筛选出差异表达的miRNA,采用实时荧光定量PCR进行验证。比较两组受检者及观察组患者手术前后的miRNA表达水平。结果经miRNA基因芯片初步筛选出17个差异表达的miRNA,其中16个表达下调,1个表达上调;经实时荧光定量PCR验证,hsa-miR-30c-5p、hsa-miR-432-5p、hsa-miR-192-5p、hsa-miR-532-5p的表达量显著下调,hsa-miR-210-3p的表达量显著上调;观察组患者术前的hsa-miR-30c-5p、hsa-miR-432-5p、hsa-miR-192-5p、hsa-miR-532-5p表达水平分别为1.48±0.45、1.67±0.32、1.84±0.43、1.49±0.35,明显低于对照组的11.35±3.08、4.72±1.13、5.29±1.49、4.11±1.28,hsa-miR-210-3p表达水平为3.92±1.34,明显高于对照组的1.28±0.31,组间比较差异均有显著统计学意义(P<0.01);观察组患者术后1年的hsa-miR-30c-5p、hsa-miR-432-5p、hsa-miR-192-5p、hsa-miR-532-5p表达水平分别为10.31±2.29、4.01±1.22、4.69±1.17、3.52±0.87,明显高于术前的1.48±0.45、1.67±0.32、1.84±0.43、1.49±0.35,hsa-miR-210-3p表达水平为1.86±0.47,明显低于术前的3.92±1.34,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);hsa-miR-30c-5p在诊断脊柱结核上的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为100.00%、96.00%、98.00%、96.15%和100.00%,明显高于hsa-miR-432-5p、hsa-miR-192-5p、hsa-miR-532-5p和hsa-miR-210-3p,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脊柱结核患者的血清中存在特异性表达的循环miRNAs,其检测对于脊柱结核的临床诊断具有一定的临床参考价值。
- 黄志刚马克刘晶
- 关键词:脊柱结核实时荧光定量PCR诊断标志物
- 脊柱结核治疗用刮匙
- 本实用新型涉及医疗器械技术领域,且公开了脊柱结核治疗用刮匙,包括刮板,所述刮板的正面固定安装有加强筋,所述刮板的顶部固定安装有安装块,所述安装块的顶部开设有凹槽,所述安装块的顶部设置有螺纹块,所述螺纹块的顶部固定安装有挡...
- 黄志刚王耀
- CT引导下经皮穿刺置管微创治疗脊柱结核被引量:21
- 2010年
- 目的:评价CT引导下经皮穿刺介入治疗脊柱结核的临床效果。方法:2008年3月~2010年1月,在全身应用抗结核药物及支具外固定的基础上,通过CT引导对所收治的31例脊柱结核患者,经皮穿刺置管灌注引流和持续局部抗结核药物冲洗病灶。结果:所有病例均未发生手术并发症,经过20~72d的置管持续灌注引流及局部灌注抗结核药物治疗,随访5~28个月,定期X线与CT检查显示,全部患者的病灶均愈合,病变无复发。结论:CT引导下经皮穿刺置管化疗技术,是一种操作简便、安全有效的微创治疗脊柱结核的方法。
- 黄志刚王耀詹子睿朱文科李红春
- 关键词:脊柱结核经皮置管引流局部化疗
- 脊柱结核患者特异循环miRNA表达的初步研究被引量:2
- 2017年
- 目的:研究探寻对脊柱结核有潜在诊断价值的特异循环mi RNA标记物。方法:以20例脊柱结核患者作为实验组,20例健康组作为对照组,分别提取外周血血清中RNA,进行mi RNA基因芯片检测,筛选出差异表达的mi RNA,并用实时荧光定量PCR进行验证。结果:通过mi RNA基因芯片初步筛选出17个表达有差异的mi RNAs,其中1个表达上调,16个表达下调。经过实时定量PCR验证,与对照组相比,有5个mi RNAs表达量显著异常,其中表达下调mi RNA(P<0.05)为:hsa-mi R-30c-5p、hsa-mi R-432-5p、hsa-mi R-192-5p、hsa-mi R-532-5p,表达上调mi RNA(P<0.05)为hsa-mi R-210-3p。结论:脊柱结核患者血清中有一些特异性循环mi RNA表达,其可能成为潜在的有诊断价值的标记物。
- 黄志刚马克王自立刘晶
- 关键词:微小RNA标记物
- 骨关节结核患者TNF-α、TGF-β炎症因子表达分析被引量:2
- 2017年
- 为了分析骨关节结核患者TNF-α、TGF-β炎症因子的表达及其临床应用价值,本研究以我院2015年1月~2016年9月期间收治的50例骨关节结核患者为研究对象,按骨关节结核病变分为增生性病变组和干酪性病变组,分析两组患者血清TNF-α、TGF-β炎症因子阳性表达差异;以30例健康人群为对照组,分析TNF-α、TGF-β对骨质骨量的影响。结果表明,TNF-α、TGF-β在不同病变骨关节结核组织中呈现高低不同的阳性表达,TNF-α、TGF-β在增生性病变结核组织中的表达水平显著高于干酪性病变结核组织中的表达水平(p<0.05),TNF-α、TGF-β在增生性病变的坏死性结核组织中和非坏死性结核组织中的表达水平无明显差异性(p>0.05),但TNF-α、TGF-β在干酪性病变的坏死性结核组织中的表达水平显著高于干酪性病变的非坏死性结核组织中的表达水平(p<0.05)。增生性病变患者和干酪性病变患者的骨关节结核组织中的成骨细胞数均明显低于正常人(p<0.05),而破骨细胞数则明显高于正常人(p<0.05),增生性病变患者骨关节结核组织中的成骨细胞数明显低于干酪性病变患者(p<0.05),而破骨细胞数则明显高于干酪性病变患者(p<0.05)。由此可知,骨关节结核患者TNF-α、TGF-β炎症因子在不同病变骨关节结核组织中存在不同程度的表达,对患者病情发展及患者骨质骨量均有着重要的影响。
- 黄志刚刘晶马克
- 关键词:骨关节结核转化生长因子-Β肿瘤坏死因子-Α
- 探讨miRNA标记物在骨髓间充质干细胞对成骨诱导分化过程中的调控机制被引量:1
- 2022年
- 目的 探讨miRNA标记物在骨髓间充质干细胞对成骨细胞诱导分化过程中的调控机制。方法 选取2016年6月—2018年1月该院收治的40例脊柱结核患者作为研究对象,将体外培养的人骨髓间充质干细胞(BMSCs)通过转化生长因子-β1(TGF-β1)对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化进行诱导,通过基因芯片技术对诱导分化期间miRNA进行检测,最后通过实时荧光定量PCR进行验证。结果 骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化期间筛选出差异表达miRNA,其中miR-130b、miR-193b为表达上调miRNA,miR-135、miR-424为表达下调miRNA。于原样本中实施实时荧光定量PCR验证,验证结果同基因芯片筛选结果存在高度一致性(Kappa=0.913,P<0.05)。结论 高表达的miR-130b、miR-193b及低表达的miR-135、miR-424均有可能够调控骨髓间充质干细胞对成骨细胞的诱导分化过程。
- 黄志刚马克刘晶
- 关键词:脊柱结核骨髓间充质干细胞