黄燕燕
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 供职机构：温州医学院检验医学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 7型腺病毒温州株基因组主要序列的克隆与分析
- 2010年
- 目的:克隆和分析7型腺病毒温州株(Ad7wz1)基因组主要序列ITR、E1A261R、E1B55kDa、Hexon和E3。方法:分离并提取了Ad7wz1基因组DNA,PCR扩增得到各基因后利用PMD18 simple T载体进行克隆,并测序分析。结果:获得Ad7wz1 ITR-L、E1A261R、E1B55kDa、Hexon、E3和ITR-R六个基因的克隆,并测得核苷酸序列;分析表明其核苷酸序列和相应的氨基酸序列与GenBank上已发表的Ad7全基因组序列比较同源性分别达到93.2%～100%和97.8%～100%。结论:初步确定本次分离的Ad7wz1毒株为Ad7d2型,Ad7wz1与已经发表的Ad7病毒株序列有高度同源性,为研究Ad7的致病机制提供了重要的理论基础。
- 姜招嫦赵娜黄燕燕余雪姣彭颖
- 关键词：7型腺病毒序列同源性
- 7型腺病毒E1A基因克隆及真核表达被引量：1
- 2008年
- 为了研究7型腺病毒(Ad7)E1A在感染中的致病机制,分离了Ad7d2病毒株,构建了Ad7E1A基因的真核表达体系。用A549细胞分离培养痰液标本中的腺病毒,应用重叠延伸PCR扩增Ad7E1A基因外显子,产物克隆至真核表达载体pIRES-Neo,构建重组子pIRES-Neo-Ad7E1A并转染A549细胞,利用Western印迹对其表达产物进行鉴定。克隆测序显示扩增的Ad7E1A基因外显子包含了完整的编码区基因,pIRES-Neo-Ad7E1A转染A549细胞的表达产物经Western印迹鉴定与设计相符。成功建立了Ad7E1A基因的真核表达体系。
- 沈鑫烽申宝玲黄燕燕余雪娇彭颖吕建新
- 关键词：7型腺病毒E1A基因克隆真核表达
- 浙江温州地区腹泻患儿腺病毒的检测及分型被引量：7
- 2009年
- 目的:了解浙江温州地区婴幼儿腹泻患者不同型别腺病毒的感染情况。方法:根据Gene Bank中腺病毒六邻体基因序列设计一对通用引物,建立PCR方法检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA,并对阳性标本进行PCR产物测序分析。结果:建立了快速、特异地检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA的PCR技术;127份婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA阳性4份,阳性率为3.15%(4/127);经PCR产物直接测序分析,3份为Ad3型,阳性率为2.36%(3/127),1份为Ad7型,阳性率为0.79%(1/127)。结论:PCR技术结合PCR产物直接测序的方法,使分析具有敏感、特异等优点,适用于腹泻标本中腺病毒的检测及分型;引起浙江温州地区婴幼儿腹泻的腺病毒主要为Ad3型和Ad7型。
- 黄燕燕郑晓群彭颖华科陈新宇
- 关键词：腺病毒腹泻PCR
- 应用实时荧光聚合酶链反应检测婴幼儿腹泻标本中的腺病毒被引量：7
- 2009年
- 目的建立实时荧光聚合酶链反应（Real-time PCR）方法检测腺病毒，并分析浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻患者不同型别腺病毒的感染情况。方法根据GenBank中腺病毒六邻体基因序列设计一对通用引物，建立Real-time PCR方法检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA，并与免疫层析法比较；同时对Real-time PCR方法检测阳性的标本进行PCR产物测序和病毒分离培养及酶切鉴定。结果建立快速、特异检测婴幼儿腹泻标本中腺病毒DNA的Real-time PCR技术。157份婴幼儿腹泻标本中免疫层析法检测阳性3份，阳性率为1．91％；Real-time PCR检测阳性5份，阳性率为3．18％（5／157）；154份免疫层析法检测阴性标本中，有2份Real-time PCR法检测为阳性。5份Real-time PCR检测阳性标本经测序鉴定，Ad3型占1．91％（3／157），Ad7型占1．27％（2／157）；经病毒分离培养检出阳性2例，酶切鉴定为Ad3型。结论Real-time PCR技术结合PCR产物直接测序分析具有敏感、特异等优点，适用于腹泻标本中腺病毒的检测及分型。2008年2—4月浙江省温州地区散发性婴幼儿腹泻的腺病毒主要为Ad3型和Ad7型。
- 郑晓群黄燕燕彭颖华科吕建新
- 关键词：腺病毒腹泻
