丁洁
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：教育部更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划通威股份科研项目四川省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 转生长激素基因中华倒刺鲃的构建及其检测被引量：8
- 2006年
- 用从斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)cDNA文库克隆到的生长激素基因,与鲤β肌蛋白启动子、大麻哈鱼生长激素基因的poly(A)终止信号序列等调控元件共同构建了表达重组质粒pFV2 cfGH。提取重组质粒,用精子载体法导入中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)的受精卵中,经孵化培养成转基因成鱼。抽提423尾转基因实验鱼血总DNA,经PCR检测表明:斑点叉尾鮰生长激素基因已导入中华倒刺鲃基因组中,导入率为17.26%。同时通过RT-PCR技术检测阳性中华倒刺鲃中生长激素基因的表达情况。
- 丁洁顾继锐伍翠芳李永文张涛吴江谢显连徐恒
- 关键词：生长激素基因转基因鱼反转录PCR
- 普通变形杆菌TWN-3株基因组文库构建及免疫印迹筛选被引量：3
- 2007年
- 在从患病大口鲇中分离到普通变形杆菌TWN-3株的基础上,将该菌总DNA用EcoRI不完全酶切后,分离5kb左右的片段,连接入pUC18质粒,转化E.coli BL21,构建基因组文库,得到3.6×103个重组子,远大于理论计算的1831个重组子,随机挑选重组子经EcoRI酶切鉴定重组率为100%,文库构建成功;将该菌裂解液与佐剂混合,免疫雄性新西兰大白兔,免疫程序结束后,抽血并分离血清,对用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后的文库进行免疫印迹筛选,最终得到8个阳性克隆子。本实验为该菌的DNA疫苗以及重要基因表达研究打下基础。
- 张涛丁洁张黎刘莉曹海军王娟顾继锐伍翠芳吴江徐恒
- 关键词：基因组文库免疫印迹
