凌婧怡
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- proEMAPⅡ/p43蛋白对干扰素诱导蛋白10的调控
- 2014年
- 目的:研究p43蛋白对干扰素诱导蛋白10(IP10)的调控。方法:用实时定量PCR方法检测p43蛋白作用于HMEC-1细胞后IP10基因水平的变化,并找到p43蛋白作用的最佳浓度范围及最佳作用时间;同时用ELISA方法检测p43蛋白是否促进IP10蛋白的分泌,并检测p43蛋白对可能引起IP10上调的相关因子γ干扰素(IFNγ)、白细胞介素1β(IL1β)及肿瘤坏死因子α(TNFα)的调控作用,试图找到p43蛋白诱导IP10表达上调的原因。结果及结论:p43蛋白能显著上调IP10的表达,并具有一定的量效关系,在p43浓度为70μg/m L、作用时间为6 h时达到峰值;p43蛋白能够诱导IFNγ的分泌,p43蛋白诱导IP10的表达可能是通过上调IFNγ的分泌,并经由JAK-STAT途径实现的。
- 王磊谭俊杰王微董桂福凌婧怡阚乃鹏刘刚陈惠鹏
- 关键词：干扰素诱导蛋白10Γ干扰素
- 中国健康人群口服米格列奈钙片的群体药动学研究
- 2018年
- 目的:通过建立米格列奈在健康人群体内群体药动学模型(PPK),探究米格列奈在中国健康人体内的药动学特点,评价米格列奈的临床药动学影响因素。方法:收集22名健康受试者的临床资料,进行单剂量给药试验,受试者口服米格列奈钙片10 mg后,利用LC-MS/MS法测定米格列奈血药浓度,用非线性混合效应模型(NONMEM)程序中的条件一级评估算法(FOCE)对数据进行分析,定量评价人口统计学指标、生化指标等固定效应因素对药动学参数的影响,建立米格列奈群体药动学模型,并用Bootstrap和VPC法验证。结果:米格列奈在健康人体内药动学可用一室模型描述,个体间变异符合指数模型。米格列奈最终的群体药动学参数CL/F、表观分布容积(V/F)和吸收常数(Ka)的群体典型值分别为2.4 L·h^(-1)(24%)、9.82 L(4%)和6.46 h^(-1)(14%)。肌酐清除率(Ccr)因素对CL/F有显著影响,丙氨酸氨基转移酶(ALT)因素对Ka有显著影响。结论:肌酐清除率CCr和丙氨酸氨基转移酶ALT对米格列奈的群体药动学参数有显著影响。所建立的PPK模型可以较好地估算服用米格列奈的个体及群体药动学参数,为指导临床合理用药提供药动学参考。
- 宋柏力雷晴王超群邹岱尊唐丹赵拯孙超凌婧怡凌婧怡
- 关键词：米格列奈群体药动学中国健康受试者非线性混合效应模型
- 日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用
- 本发明公开了一种日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用。本发明公开了日落黄色素在制备抑制炭疽杆菌生长的产品中的应用。本发明发现日落黄色素可有效抑制炭疽杆菌的生长，从而在治疗炭疽感染方面发挥巨大作用。
- 凌焱陈惠鹏李玉霞吴逊白东梅张昕凌婧怡李伟东刘刚周围李北平高原岳俊杰梁龙
- 文献传递
- 具有长期感应尿酸浓度功能的稳定细胞系的构建与鉴定
- 2016年
- 目的:利用合成生物学方法构建具有尿酸感应作用的基因回路,稳定转染细胞系,构建长期自发稳定感应尿酸浓度的细胞系p-Huc O8-SEAP-m UTs。方法:以耐辐射型球菌R1基因组中转录抑制物基因huc R及其结合位点基因huc O为基本元件,人工合成优化的转录抑制物基因m UTs及其结合位点的8串联结构基因huc O8,将m UTs和huc O8作为已知功能的生物模块,用于完成基因回路的构建,并稳定转染Hep G2细胞;通过实时定量PCR检测稳定细胞系中目的基因表达的稳定性,通过检测分泌型碱性磷酸酶(SEAP)的表达量来验证对尿酸的感应作用回路及其长期可逆性。结果和结论:构建了p-Huc O8-SEAP-m UTs稳定细胞系,稳定株不同代数之间目的基因的表达稳定;p-Huc O8-SEAP-m UTs稳定细胞系能有效地反映环境中的尿酸浓度,且比瞬时转染细胞系更加敏感,可逆性良好,没有明显的"记忆效应"。
- 凌婧怡赵威曲国龙阚乃鹏温国霞刘刚陈惠鹏
- 关键词：合成生物学尿酸稳定细胞系
- 胰高血糖素样肽1或其类似物体外生物活性检测方法的建立被引量：4
- 2015年
- 目的:通过对不同活性检测方法的综合比较,筛选最适的胰高血糖素样肽1(GLP-1)或其类似物的体外活性检测方法,为GLP-1类似物的体外生物活性检测奠定基础。方法:以GLP-1作为阳性药物,用MTT方法检测其对RIN-m-5F、MIN6细胞增殖的影响;用ELISA方法检测其对INS-1、MIN6细胞胰岛素分泌量的影响;用ELISA方法检测其对BHK-GLP-1R细胞cAMP分泌水平的影响。通过对上述方法的综合比较,筛选出最适的活性检测方法。结果:GLP-1对细胞增殖的影响实验结果并不显著,对胰岛素分泌量影响的实验效果明显,对cAMP分泌水平的实验无明显效果。结论:ELISA检测GLP-1或其类似物对MIN6细胞胰岛素分泌量实验可用于GLP-1或其类似物的体外活性检测。
- 邵妤赵威王微曲国龙阚乃鹏凌婧怡谭俊杰刘刚陈惠鹏
- 关键词：2型糖尿病胰高血糖素样肽1类似物活性检测
- 一种原代肺上皮细胞体外培养方法被引量：2
- 2014年
- 目的:建立一种操作简便、重复性好的体外培养BALB/c小鼠原代肺上皮细胞(AEC)的方法,探究不同发育阶段小鼠AEC中柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR)表达量的变化,及其对小鼠原代AEC贴壁的作用。方法:手术获取小鼠肺组织,机械法剪碎肺组织,PBS缓冲液清洗肺组织块数次去血,联合使用链霉蛋白酶和胶原酶Ⅰ消化、分离肺组织块获得单细胞悬液,差速离心逐步清除其他种类的细胞,达到纯化AEC的作用。细胞在Ⅰ型鼠尾胶原蛋白包被过的细胞板中培养,光学显微镜下观察不同发育阶段AEC贴壁、生长状态;免疫荧光法鉴定AEC,检测AEC中CAR的表达量。结果:体外获得不同发育阶段BALB/c小鼠的原代AEC;胎鼠、幼鼠AEC贴壁并开始增殖所需时间较成体鼠短;胎鼠及幼鼠AEC中CAR的表达量明显较成体鼠高。结论:建立了稳定可重复的分离、纯化、体外培养小鼠原代AEC的方法,证明了AEC中的CAR可以促进原代AEC贴壁,为完善原代细胞培养方法提供了科学依据。
- 白东梅李玉霞王薇贾天野吴逊金晶凌婧怡杨丹刘岩峰陈惠鹏
- 关键词：原代细胞培养肺上皮细胞细胞贴壁
- 可用于TNT检测的新的生物传感元件topAp4的发现被引量：1
- 2015年
- 目的在大肠杆菌基因组中筛选可用于TNT检测的基因传感元件。方法利用随机酶切方法不完全酶切大肠杆菌K-12 MG1655基因组,构建基因组启动子文库,通过多轮筛选法获得可感应TNT的文库元件。通过数据库分析,并在灵敏度、特异性、起效时间各方面对新的传感元件在TNT诱导下的启动活性进行考察,进一步确证了文库元件中发挥作用的功能序列。结果和结论成功构建了大肠杆菌K-12 MG1655基因组启动子文库,并从中筛选得到了一个可感应TNT的文库元件,经过进一步分析确证了其发挥功能的序列top Ap4,并在灵敏度、特异性、起效时间上都表现出较好的启动活性。上述研究工作发现了top Ap4对TNT的感应作用,并验证了其具有较好的启动活性,为TNT检测生物传感器的构建打下了良好的基础。
- 阚乃鹏谭俊杰王微凌婧怡曲国龙邵妤金晶刘刚陈惠鹏
- 关键词：合成生物学启动子三硝基甲苯
- 日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用
- 本发明公开了一种日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用。本发明公开了日落黄色素在制备抑制炭疽杆菌生长的产品中的应用。本发明发现日落黄色素可有效抑制炭疽杆菌的生长，从而在治疗炭疽感染方面发挥巨大作用。
- 凌焱陈惠鹏李玉霞吴逊白东梅张昕凌婧怡李伟东刘刚周围李北平高原岳俊杰梁龙
- 以大肠杆菌为底盘细胞构建XylR-Pu线路检测2,4,6-三硝基甲苯被引量：1
- 2017年
- 目的:恶臭假单胞菌中的TOL质粒上的XylR-Pu是经典的甲苯代谢通路,在甲苯类化合物存在时,调控蛋白XylR可以特异性的激活Pu启动子,进而启动相应甲苯代谢通路的表达。基于合成生物学的思想,优化设计此通路并导入遗传背景清楚、操作简单的大肠杆菌中构建全细胞生物传感器,用于检测环境污染物2,4,6-三硝基甲苯(TNT)。方法:以pETDuet-1为载体骨架,构建了XylR-Pu基因线路,并以绿色荧光蛋白GFP为报告分子,GFP的荧光值可以指征结合诱导剂后的XylR蛋白对Pu启动子的诱导强度,并在基因线路中加入四串联终止序列来降低背景值。最后对XylR蛋白的信号识别区进行连续易错PCR,构建随机突变体文库,从中筛选具有更高感应强度、更好灵敏度及特异性的调控蛋白。结果:四串联终止序列可有效降低XylR-Pu通路的背景值,随机突变体文库中筛选出的生物元件eX0-4,对TNT表现出良好的感应强度、灵敏度及特异性。结论:XylR蛋白在大肠杆菌中对硝基甲苯响应不明显,但筛选得到的突变蛋白eX0-4,为后续生物传感器的更深层次地开发提供了优良的元件储备。另外,利用易错PCR构建随机突变体文库从中筛选发挥预定功能的突变蛋白质也可成为挖掘生物元件的一种通用方法。
- 温国霞黄子豪谭俊杰阚乃鹏凌婧怡张霞刘刚陈惠鹏
- 关键词：合成生物学生物传感器
