刘明军
- 作品数：44 被引量：205H指数：8
- 供职机构：青岛大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金重大基础研究前期研究专项青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 蜂毒素与基因变构IL-2嵌合蛋白的纯化工艺探索和生物学活性研究
- 目的：将含重组质粒pGEX-4T-2/melittin-<'88>ArgIL-2的大肠杆菌进行表达发酵条件的优化，得到可溶性表达的重组蛋白;分离纯化该重组蛋白，得到高纯度的、足量的、具有生物学活性的蜂毒素与基因变构IL-...
- 刘明军
- 关键词：蜂毒素蛋白表达纯化工艺抗肿瘤活性细胞免疫
- 文献传递
- 经导管肝动脉化疗栓塞术治疗肝细胞癌疗效及复发预测被引量：6
- 2021年
- 目的探讨肝细胞癌(HCC)患者经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)前、术后脱γ-羧基凝血酶原(DCP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、甲胎蛋白(AFP)的变化及其与预后关系。方法纳入96例接受TACE作为初始治疗的HCC患者,分别于术前,术后4~5周及术后6~12个月检测血清DCP、AFP-L3、AFP等水平。根据术后CT或磁共振结果分为复发组和未复发组,观察两组术前和术后各指标的动态变化。应用广义估计方程(GEE)评估时间因素对肿瘤标志物作用的影响。应用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标对评估TACE疗效及复发的意义。结果HCC患者在接受TACE后的4~5周DCP水平为45.0(16.5~286.1)AU/L,显著低于术前[86.5(22.6~917.8)AU/L,P<0.001];AFP-L3水平为6.8(0.5~26.1)ng/mL,显著低于术前[12.5(0.5~54.3)ng/mL,P<0.05]。DCP、AFP-L3和AFP水平均显著影响术后复发情况,且时间与AFP的交互项具有显著性(P<0.05),AFP作为预测指标的作用受时间因素影响。术前和术后4~5周时DCP的AUC分别为0.809和0.819,术后6~12个月AFP-L3的AUC为0.765,均具有较高预测HCC复发的价值。在多种指标联合检测中,术前AST/ALT+DCP+AFP-L3的AUC为0.930,优于单一标志物(P<0.05);在术后4~5周和6~12个月,DCP+AFP-L3+AFP+AST/ALT(0.874)和DCP+AFP+AFP-L3+ALB(0.817)预测复发的价值较高。结论联合检测血清DCP和AFP-L3对于预测TACE后HCC复发具有较高临床价值,部分其他实验室指标可辅助应用于预后预测。
- 王玉珏孙桂荣彭冲李玉杰刘明军王思奎
- 关键词：肝细胞癌经导管肝动脉化疗栓塞术
- 蜂毒素与基因变构IL-2嵌合蛋白对人卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用及对NK细胞的杀伤活性的影响
- 目的研究蜂毒素与基因变构IL-2(melittin-88ArgIL-2)嵌合蛋白.在体外对人卵巢癌细胞SKOV3的抑制作用及对NK细胞的杀伤活性的影响。方法用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetraz...
- 刘明军董军奎钱冬萌王斌
- 关键词：抗肿瘤活性
- 文献传递
- 重组蜂毒素-基因变构IL-2的纯化与生物活性被引量：5
- 2006年
- 目的制备纯化重组蜂毒素-基因变构IL-2(Melittin-88ArgIL-2)嵌合蛋白,并检测其生物活性。方法将含表达载体的大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达。表达产物经离子交换层析与亲和层析进行纯化,SDS-PAGE鉴定,MTT染色法检测嵌合蛋白对Hela细胞增殖的抑制作用。结果所表达的可溶性蛋白,纯化后纯度达95%,蛋白浓度0.5g/L。纯化后的嵌合蛋白在体外能抑制Hela细胞的增殖。结论已成功地制备并纯化了重组melittin-88ArgIL-2嵌合蛋白,该蛋白具有生物活性,为中试放大和纯化工艺研究奠定了基础。
- 刘明军王斌钱冬萌丁守怡闫志勇宋旭霞
- 关键词：层析生物活性
- 肝病相关自身抗体对原因不明肝功能异常患者的诊断评价被引量：6
- 2009年
- 自身免疫性肝病是指由于机体的自身免疫反应攻击肝组织而非病毒感染所致的肝病，主要包括自身免疫性肝炎（AIH）、原发性胆汁性肝硬化（PBC）、原发性硬化性胆管炎（PSC）及相互两者并存的重叠综合征等．其共同特点是在肝脏出现病理性炎症损伤的同时，血清中可发现与肝脏有关的循环自身抗体。
- 孙桂荣刘明军田字彬李海霞张影
- 关键词：自身免疫性肝病肝功能异常原发性胆汁性肝硬化原发性硬化性胆管炎自身免疫性肝炎
- 狂犬病毒核蛋白在大肠杆菌中的克隆及高效表达
- 2007年
- 目的构建原核表达系统对狂犬病毒（RV）CVS株的核蛋白（NP）进行表达，并对其进行初步的血清学鉴定。方法以重组质粒Teasy—RVNP为模板，利用PCR方法扩增狂犬病毒（RV）CVS株核蛋白（NP）的DNA片段，并重组入原核高效表达载体PET-15b。用酶切电泳验证重组结果的正确性；并通过测序检查质粒重组后序列有无变化。在大肠杆菌BL21中进行表达。结果SDS-PAGE电泳结果表明，在51KDa处有一条蛋白表达带Western-blot分析证明，51KDa蛋白带可与抗体血清发生特异性反应。结论成功构建了PET-15b，NP原核表达载体，表达产物为狂犬病毒核蛋白，为生产纯度高且价廉的RVNP抗原奠定了基础。为制备测定RVNP抗体的免疫诊断试剂提供了条件。
- 王宏唐青王斌钱冬萌闫志勇丁守怡宋旭霞刘海婷刘明军
- 关键词：狂犬病毒核蛋白基因表达
- 高敏甲胎蛋白异质体比率在肝细胞癌诊治中的临床应用被引量：8
- 2019年
- 目的评估高敏甲胎蛋白异质体比率(AFP-L3%)对诊治肝细胞癌的临床应用价值。方法纳入2016年10月至2018年3月在青岛大学附属医院确诊的160例肝细胞癌患者、32例肝内胆管细胞癌(ICC)患者、52例乙型肝炎后肝硬化患者、53例慢性乙型肝炎患者和50名健康体格检查者,测定所有受试者的血清高敏AFP-L3%和甲胎蛋白水平。统计学方法采用Mann-WhitneyU检验、Spearman相关性分析、配对符号秩和检验和卡方检验。结果肝细胞癌组血清高敏AFP-L3%和甲胎蛋白水平分别为24.90%(4.68%,61.85%)和113.45μg/L(11.18μg/L,1803.48μg/L),分别高于ICC组的0.50%(0.50%,0.50%)和2.79μg/L(1.72μg/L,4.04μg/L),肝硬化组的0.50%(0.50%,5.25%)和18.35μg/L(3.95μg/L,31.93μg/L),慢性肝炎组的0.50%(0.50%,4.25%)和2.70μg/L(1.80μg/L,17.00μg/L),健康对照组的0.50%(0.50%,0.50%)和1.94μg/L(1.46μg/L,2.63μg/L),差异均有统计学意义(高敏AFP-L3%U=461.00、1485.50、1141.00、625.00,甲胎蛋白U=401.50、2207.00、1254.00、266.00;P均<0.01)。血清高敏AFP-L3%和甲胎蛋白诊断肝细胞癌的灵敏度分别为66.3%和70.0%,差异无统计学意义(χ^2=0.54,P>0.05);两者联合检测的灵敏度为82.5%,分别高于单独检测的灵敏度,差异均有统计学意义(χ^2=24.04、18.05,P均<0.01)。血清高敏AFP-L3%的特异度为95.2%,高于甲胎蛋白的68.6%,差异有统计学意义(χ^2=26.04,P<0.01);两者联合检测的特异度为68.6%,低于单独检测高敏AFP-L3%的95.2%,差异有统计学意义(χ^2=26.04,P<0.01);两者联合检测与单独检测甲胎蛋白的特异度(68.6%)相比差异无统计学意义(P>0.05)。血清高敏AFP-L3%诊断甲胎蛋白阴性(甲胎蛋白<20μg/L)肝细胞癌患者的灵敏度为41.7%。血清高敏AFP-L3%和甲胎蛋白水平与肿瘤大小和临床分期均呈正相关(高敏AFP-L3%r=0.272、0.436,甲胎蛋白r=0.375、0.458;P均<0.01)。38例肝细胞癌患者术后血清高敏AFP-L3%降幅为82.2%,高于甲胎蛋白的69.2%,差异有统计学意
- 杨璇孙桂荣席强彭冲王麟刘明军田字彬
- 关键词：甲胎蛋白类荧光抗体技术异质体
- 沙蚕消化道细菌D2胞外蛋白酶的分离纯化及其性质被引量：8
- 2008年
- 目的分离纯化沙蚕消化道菌D2胞外蛋白酶,并对其性质进行分析。方法收集48 h发酵液上清,经80%饱和硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose阴离子交换层析、Superdex G-75凝胶过滤层析逐步纯化D2蛋白酶,分析其酶学性质,并用ESI-MS/MS测定其酶解后的部分氨基酸序列。结果经纯化,得到电泳纯的D2蛋白酶,纯化倍数为4.9倍,活性回收率为33%,相对分子质量约42 000,纯度大于99%;最适作用温度为60℃,最适pH为9,在pH6-11及0-60℃具有较好的稳定性,水解酪蛋白的Km值为2.44 mg/ml;Cu2＋、Ca2＋、Mg2＋、K＋等金属离子对酶活力有明显促进作用,EDTA和PMSF对酶活力有强烈抑制作用;该酶对尿素、SDS、DTT等变性剂有较好的耐受性,其两个内部肽段经质谱测序,序列分别为AHGFLPLTK和APSATG-GSALYPLEFVVGK。结论该酶为一高温碱性丝氨酸蛋白酶,具有较高的工业开发价值和较大的应用潜力。
- 代玉梅闫志勇王斌钱冬萌宋旭霞丁守怡刘明军张艳丽
- 关键词：消化道蛋白酶
- Melittin-IL-2融合蛋白的表达、纯化和生物学活性分析
- 目的制备具有双重生物学活性的蜂毒素与白细胞介素-2(Melittin-IL-2)融合蛋白。方法利用SOE技术构建表达质粒pGEX-4T-2-Melittin-IL-2.在大肠杆菌DH5α中经IPTG诱导表达。蛋白经过一系...
- 刘明军宋旭霞钱冬萌王斌
- 关键词：融合蛋白蜂毒素白细胞介素-2纯化生物学活性
- 文献传递
- 肺癌肿瘤标志物的临床应用与研究进展被引量：11
- 2011年
- 癌胚抗原、神经元特异性烯醇化酶、细胞角蛋白19片段、前胃泌素释放肽和鳞状细胞癌抗原是常用的肺癌标志物。目前,单一的标志物不能用于无症状人群或高危人群的肺癌筛查,但对肺癌的鉴别诊断、疗效评价、复发或转移监测、预后判断具有重要临床价值。对Dickkopf-1、血浆激肽释放酶、MicroRNA等新发现的肺癌标志物还应进行大量的临床应用评价。今后,应积极探究对肺癌特异性和敏感性俱佳的标志物。
- 刘明军刘自民
- 关键词：肺癌肿瘤标志物
