刘明英
- 作品数：20 被引量：54H指数：5
- 供职机构：中国林业科学研究院亚热带林业研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金浙江省科技厅重大专项基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种提高镉抗性及镉含量的基因及其用途
- 本发明涉及基因工程技术领域，更具体地涉及一种提高镉抗性及镉含量的基因及其用途；本发明通过构建镉超积累矿山型东南景天cDNA文库，从中筛选出<I>SaCTP</I>基因，通过酵母点板实验验证该基因能提高酵母镉抗性；将<I>...
- 刘明英贺雪莲卓仁英
- 文献传递
- 麻竹花药诱导再生植株的染色体倍性分析被引量：3
- 2011年
- 为阐明麻竹(Dendrocalamus latiflorus)花药培养再生植株的染色体倍性,利用流式细胞仪和染色体标本制备方法对麻竹再生植株嫩叶DNA的含量和根尖染色体数目进行了研究。结果表明:100株花药培养再生植株中有4株为六倍体,96株为十二倍体。该结果进一步验证了麻竹花药培养体系,对麻竹遗传改良和功能基因组学研究具有重要意义。
- 李海营乔桂荣刘明英蒋晶张玲卓仁英
- 关键词：花药培养染色体麻竹流式细胞仪
- Zn/Cd超积累植物东南景天SaREFl耐镉功能的探索研究
- 刘明英李江川杨晔宋红改邱文敏
- 课题组在前期工作中将东南景天cDNA文库转化镉敏感酵母，筛选获得了一个转录本，与橡胶延伸因子具有很高的同源性，在生物信息学分析的基础上，将其命名为SaREFl基因。借助实时定量技术研究SaREFl对其他重金属的响应模式，...
- 关键词：
- 关键词：东南景天基因表达酵母
- 海滨木槿叶片蛋白质双向电泳体系的建立被引量：6
- 2012年
- 为建立一套适合海滨木槿叶片蛋白质组学分析的双向电泳体系,以海滨木槿无性系叶片为材料,分别采用裂解液法、三氯乙酸-丙酮沉淀法、改良酚抽法分离纯化蛋白质,选用24 cm pH 3～10的IPG胶条,并对不同上样量、等电聚焦程序、平衡时间等电泳条件进行优化。结果表明:采用改良酚抽法提取蛋白质,上样量为每IPG胶条1 000μg,总聚焦功率90 kV.h,平衡时间15 min,胶体考马斯亮蓝染色,可得到蛋白质点数目多、分辨率高的双向电泳图谱。重复性试验结果显示,该体系具有很好的稳定性及可重复性,可满足海滨木槿蛋白质组学研究的要求。
- 李翠云姜彦成乔桂荣刘明英蒋晶卓仁英
- 关键词：海滨木槿耐盐蛋白质双向电泳
- 东南景天耐镉相关基因SaFer的克隆与功能初步分析被引量：3
- 2015年
- 铁蛋白(ferritin)是一种专门存储铁的重要胁迫相关蛋白,参与镉离子吸收的调控。从构建的东南景天Sedum alfredii c DNA文库中筛选出东南景天Ferritin基因c DNA全长,命名为Sa Fer,编码序列为1 117 bp,开放阅读框为759 bp,编码252个氨基酸。以东南景天基因组DNA为模板分离到Sa Fer基因组序列,长度为1 702 bp,含有7个内含子。氨基酸序列同源性分析表明:Sa Fer与苹果Malus domestica Ferritin亲缘关系最近,同源性高达76%。实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)分析发现:根系中Sa Fer基因在镉胁迫12 h后表达显著上调。镉胁迫实验显示,转基因拟南芥Arabidopsis thaliana比野生型有更高的耐镉胁迫能力。Sa Fer基因的分离及其初步功能验证为研究东南景天耐镉机制和林木耐镉转基因育种提供了理论依据。
- 赵婷韩小娇刘明英乔桂荣蒋晶姜彦成卓仁英
- 关键词：植物学东南景天镉胁迫
- 矿山型东南景天cDNA表达文库构建与耐镉基因筛选被引量：2
- 2012年
- 以筛选出的镉超积累矿山型东南景天为材料,经镉胁迫后提取总RNA,纯化mRNA,利用改良SMART技术合成了全长cDNA,回收500 bp以上cDNA大片段克隆到改造过的大肠杆菌/酵母穿梭载体pYES2.0G中,建成东南景天镉全长cDNA文库,对随机挑取的阳性克隆进行PCR鉴定,插入片断大小在1 000 bp左右,说明所构建的文库达到了用于目的基因分离筛选和表达的建库要求,为将来筛选克隆与东南景天抗重金属相关基因奠定了基础。
- 刘明英乔桂荣蒋晶邱文敏卓仁英
- 关键词：东南景天CDNA文库酿酒酵母
- 东南景天SaWRKY7基因对镉胁迫的响应研究被引量：5
- 2019年
- 【目的】镉对植物具有高毒性,WRKY转录因子广泛参与植物逆境胁迫。研究镉诱导下WRKY基因的胁迫响应和抗性机制。【方法】以超积累型东南景天为试材,通过PCR克隆得到1个东南景天WRKY转录因子家族基因序列,结合生物信息学方法,分析其蛋白质结构和亲缘关系,构建GFP(绿色荧光蛋白)融合蛋白,观察其亚细胞定位,利用酵母验证其转录激活活性,通过qRT-PCR分析在镉胁迫下该基因的表达特性和组织特异性。【结果】获得了1条新的东南景天WRKY转录因子家族基因并命名为SaWRKY7,包含完整的开放阅读框,长度为1 011 bp,共编码336个氨基酸,为WRKY基因家族Ⅱd成员。SaWRKY7定位在细胞核,属于核蛋白,不具有转录自激活活性。SaWRKY7在东南景天的根、茎、叶中均有表达,且在根中相对有较高的表达量。与对照相比,在100μmol/L CdCl_2处理0.5 h时,SaWRKY7在根茎叶中有较高的表达量,随后逐渐降低,属于早期诱导表达基因。【结论】SaWRKY7为WRKY转录因子家族成员,该基因定位在细胞核,不具有转录自激活活性,在早期响应镉胁迫诱导表达,推测其可能在东南景天镉积累或镉耐受过程中发挥重要作用。
- 王影邱文敏李鹤贺雪莲刘明英韩小娇曲同宝卓仁英
- 关键词：东南景天转录因子镉胁迫
- 重要生态经济树种转基因平台建立及耐盐转基因研究
- 卓仁英刘明英蒋晶乔桂荣韩小娇
- 利用Cre/Lox重组技术构建诱导型启动子Rd29A引导AVP1-D、CodA、IPT、DREB2A等耐盐相关基因以及安全选择标记基因manA基因的植物双元表达载体载体系统1套；建立了杨树、悬铃木和枫香甘露糖筛选体系，开...
- 关键词：
- 关键词：转基因育种基因表达生态经济树种
- 麻竹耐寒转基因体系构建及其耐寒转基因研究
- 杨惠琴乔桂荣刘明英蒋晶卓仁英
- 关键词：麻竹农杆菌介导转基因体系耐寒性
- 超积累型东南景天Sa12F279基因的抗逆表达响应及功能关联分析
- 2020年
- [目的]对超积累型东南景天ABC转运蛋白家族成员Sa12F279开展生物信息学分析及表达分析,为探究ABC类转运蛋白在镉、干旱、盐碱等非生物胁迫中的功能提供参考。[方法]通过对超积累型东南景天转录组数据库进行比对分析,获得1个ABC家族成员的基因。通过生物信息学方法分析Sa12F279基因的进化关系、蛋白结构域构成、核心结构域同源比对及在组学数据中相关的互作蛋白分类;借助实时定量PCR技术分析该基因在盐碱、干旱及ABA激素胁迫下根中的表达变化。[结果]通过比对分析获得ABC家族成员Sa12F279基因,该基因的开放阅读框长度为4 497 bp,编码蛋白长度为1 498个氨基酸,相对分子量为167.1 KD,等电点为6.92。进化分析显示:Sa12F279基因与C亚类成员聚为一簇,且在结构域构成上符合ABC家族的保守排布。共表达网络分析显示:Sa12F279与567个基因存在功能上的关联,对这些基因进行功能注释发现,其中39.8%的基因执行代谢相关功能,29.3%的基因与细胞内进程相关,10.2%的基因涉及生物调控,7.1%的基因参与转运活性。对镉胁迫前后转录组数据分析显示,Sa12F279基因在根、茎、叶3种组织中,取样点24 h和96 h的表达量均呈现对镉胁迫下调响应。实时定量结果显示:该基因对ABA激素、盐碱和干旱不同胁迫的应答模式存在差异,且应答响应较平缓。在ABA激素处理下,呈现先下调后上升的趋势;在盐胁迫下,呈现早期响应不显著而于胁迫后期出现上调应答;在干旱处理下,呈现先升后降又升的趋势。[结论]鉴定了超积累型东南景天ABC家族的1个Sa12F279基因,揭示了该基因在不同非生物胁迫下的表达模式。
- 冯童禹乔桂荣蒋晶邱文敏韩小娇卓仁英刘明英
- 关键词：东南景天ABC转运蛋白非生物胁迫
