卓秀萍
- 作品数：13 被引量：30H指数：3
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- 猪伪狂犬病毒Fa株侵染对PK-15细胞microRNAs表达谱的影响
- 2016年
- 【目的】分析猪伪狂犬病毒Fa株(PRV-Fa)侵染对猪肾传代细胞PK-15 microRNAs(miRNAs)表达谱的影响。【方法】利用Illumina高通量测序技术,鉴定感染和非感染PRV-Fa的PK-15细胞的miRNAs;筛选并利用实时荧光定量RT-PCR(RT-q PCR)验证差异表达miRNAs;对差异miRNAs进行靶基因预测和Gene ontology(GO)分析。【结果】在感染和未感染PK-15细胞中分别检测到384个和405个miRNAs,其中感染PRV-Fa后差异表达的miRNAs共127个(60个上调,67个下调)。荧光定量结果显示差异miRNAs的表达趋势与高通量测序结果一致。GO分析显示,miRNAs广泛参与信号传导、细胞代谢、免疫反应、基因表达等生物学进程,其中miR-10b、miR-16、miR-18a、miR-19b、miR-20a、miR-145-5p、miR-146a、miR-181a、miR-499-5p等miRNAs与免疫相关。在靶基因调控网络图中,ssc-miR-30a-5p与ssc-miR-30d处于关键位置。研究鉴定出5个新的病毒编码miRNAs,其中PRV-miR-LLT2与PRV-miR-LLT4靶向PRV早期蛋白基因EPO。【结论】伪狂犬病毒Fa株感染对PK-15细胞编码miRNAs有显著影响。
- 刘鹏娟乔小改李萍黄剑波卓秀萍方和俊邓益超徐志文朱玲
- 关键词：猪伪狂犬病毒MICRORNASPK-15细胞
- 猪呼肠病毒研究进展
- 2014年
- 猪呼肠病毒(Porcine reovirus)属于呼肠病毒科(Reoviridae)正呼肠病毒属(Orthoreovirus),基因组由10条分节段的dsRNA片段组成,编码11种多肽。猪感染呼肠病毒后多不表现明显的临床症状,但严重者可引起呼吸系统或胃肠道疾病。论文就近年来国内外对猪呼肠病毒形态特征、理化特性、培养特性、分子生物学、致病机制、病毒检测及防控措施等方面的研究进展进行综述,为猪呼肠病毒的深入研究提供参考。
- 刘鹏娟黄山朱玲周远成卓秀萍覃娟娟顾凡
- 关键词：呼肠病毒分子生物学病毒检测
- 猪伪狂犬病毒SC株的分离鉴定及生物信息学分析
- 引言猪伪狂犬病毒(PRV)可引起妊娠母猪繁殖功能障碍和初生仔猪神经症状,仔猪感染率和死亡率高达100%。自2011年以来,猪伪狂犬病的报道有增多趋势,出现了接种了疫苗不能提供完全保护的现象,涉及我国多个省、市、地区的猪场...
- 刘小琬周远成杨凡刘鹏娟卓秀萍朱玲徐志文
- 文献传递
- 人工感染猪流行性腹泻病毒的哺乳仔猪的病理学观察被引量：18
- 2015年
- 为观察猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染的哺乳仔猪的病理学变化,选取60头健康的哺乳仔猪,随机均分为A、B两组。A组仔猪经口接种PEDV细胞毒,B组作为空白对照,观察不同发病阶段A组仔猪的临床症状、剖检变化、组织切片的病理学变化。结果显示,A组仔猪潜伏期表现比较正常,仅肠道有轻微的卡他性炎症,肠道上皮细胞肿胀。前驱期仔猪出现呕吐和腹泻,肠道和淋巴结充血严重。典型症状期仔猪出现严重的腹泻、脱水、粪便恶臭等猪流行性腹泻的典型症状,严重的陆续死亡;个别组织器官出现严重病变,如肠上皮细胞脱落、肺泡融合、脾白髓萎缩、肾出现蛋白管型等。耐过仔猪生长缓慢。结果表明,A组仔猪出现典型的猪流行性腹泻的病理学变化,且病理演变过程具有一定的规律性,其致病机理可能与对肠道、肺的组织嗜性和对淋巴结、脾的免疫抑制性有关。
- 卓秀萍朱玲乔小改陈正礼王英智刘鹏娟徐志文
- 关键词：哺乳仔猪猪流行性腹泻病毒病理学观察
- 四川地区某猪场腹泻仔猪中圆环病毒2型(PCV-2)的全基因克隆及生物信息学分析
- 引言近年全国范围内仔猪腹泻发病率高、死亡率高,造成较大经济损失,已成为影响我国养猪产业发展的一大障碍,圆环病毒(porcine eireovirus,PCV)被列为世界公认的当前危害养猪业发展的头号疫病,已引起世界各国的...
- 刘小琬周远成杨凡刘鹏娟卓秀萍朱玲徐志文
- 文献传递
- 猪流行性腹泻病毒的分离、鉴定及全基因序列分析
- 猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea，PED）是由猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemic diarrhea virus，PEDV)引起的一种急性传染病，可引起猪只急性腹泻并迅速脱水、...
- 卓秀萍
- 关键词：猪流行性腹泻病毒变异毒株病理学全基因序列
- 荧光定量RT-PCR对猪流行性腹泻病毒在仔猪体内分布规律的研究被引量：5
- 2016年
- 为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)在感染仔猪各主要器官中的增殖和分布情况,本研究根据PEDV N基因和宿主细胞GAPDH基因建立荧光定量RT-PCR法,并以该方法检测各个发病期的哺乳仔猪各器官内PEDV的病毒载量。结果表明,仔猪感染PEDV后,在49 h^72 h出现典型的猪流行性腹泻症状,肠、肠系膜淋巴结、肺等器官出现严重病变。利用本研究建立的检测方法在仔猪体内肠、肠系膜淋巴结、肺、脾、肾、心、肝这些器官中均可以检测到PEDV;其中肠、肠系膜淋巴结、肺中病毒载量最高,而且感染时间早、持续时间长。研究表明,PEDV的感染呈持续性、多脏器性,并对肠和肺有组织嗜性;结合本实验室前期的病理研究,推测其在消化器官、呼吸器官中增殖能够导致功能细胞的损伤,在免疫器官的增殖能够造成免疫抑制和混合感染。本研究为PEDV的感染特性、定植规律和致病机理的研究及分子生物学检测方法的建立奠定了基础。
- 卓秀萍朱玲刘鹏娟赵军李萍黄建波徐志文
- 关键词：哺乳仔猪
- 胸膜肺炎放线杆菌血清7型菌株体外培养PalA基因表达规律的研究
- 2016年
- 为了解对机体免疫反应具有副作用的肽聚糖相关脂蛋白在胸膜肺炎放线杆菌(APP)体外培养中的表达规律,建立了一种SYBR GreenⅡ实时荧光定量PCR检测方法,对PalA基因在APP血清7型菌株体外培养不同生长阶段的表达情况进行了监测,并对比分析了菌株生长曲线与该基因的表达曲线。结果显示,成功建立了实时荧光定量PCR标准曲线y=-3.578x+48.982(E=90.3%,R^2=0.999),最低检测浓度为1.1×10~2copies/L,并具有较好的特异性与重复性。菌液生长到第6小时(D_(600)=0.834)进入稳定期,活菌含量最高,达2.38×109CFU/m L,此时PalA基因的表达量较低,为0.609 ng/L,约占总反转录cDNA的0.366‰。菌液生长至第8小时(D_(600)=0.835)达到PalA基因表达最高峰,为0.913 ng/L,约占总反转录cDNA的0.564‰。菌液生长到第6小时满足菌液活性大、活菌含量高且PalA蛋白含量低等特点。本试验为临床APP全菌疫苗的生产提供了一定借鉴。
- 李萍樊毅毛汐语卓秀萍刘鹏娟殷玥徐志文朱玲
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌实时荧光定量PCR
- 猪NF-κB真核表达载体的构建及转染Marc-145细胞对PRRSV增殖的影响
- 2015年
- 为研究猪细胞核转录因子-kappa B(NF-κB,p50/p65)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)体外增殖的影响,从猪外周血淋巴细胞扩增NF-κB p65ORF和p50RHD功能区,分别克隆至pcDNA3.1(+),经酶切及测序鉴定,获得pcDNA3.1(+)-p50-RHD及pcDNA3.1(+)-p65。将其转染至Marc-145细胞,Western-blot检测胞核内p50、p65的表达水平。pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1(+)-p50-RHD、pcDNA3.1(+)-p65和pcDNA3.1(+)-p50-RHD+pcDNA3.1(+)-p65分别转染Marc-145,18h后接种PRRSV,采用实时荧光定量PCR检测培养上清病毒粒子增殖时相,绘制一步生长曲线。结果表明,成功构建了猪NF-κB p50、NF-κB p65真核表达载体,且可在Marc-145细胞中表达。转染p50+p65、p65真核表达质粒可加速PRRSV感染Marc-145细胞后CPE进程,抑制PRRSV增殖,极大降低病毒效价,且p50+p65抑制作用更强;转染p50质粒则推迟CPE出现,减缓PRRSV增殖,但对病毒效价影响不大。本研究结果表明,NF-κB p50/p65、p65/p65对PRRSV在Marc-145细胞中的增殖有一定的抑制作用。
- 刘鹏娟王潇娣李萍黄剑波卓秀萍刘小琬朱玲
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核转录因子-KAPPA真核表达
- 猪干扰素的研究进展被引量：2
- 2015年
- 近年来，猪病的流行严重地制约着我国养猪业的发展，并造成巨大的经济损失；病毒感染、寄生虫感染等是造成猪只发病的主要原因。虽然已有各种疫苗得到广泛应用，但仍不能有效控制疾病的流行，研发高效、安全的猪病防治制剂成为迫切的需要。干扰素（Interferon，IFN）通过激活细胞中多种功能基因的转录，调节各信号传导通路的协同作用，能够发挥抗病毒、抗细菌、抗寄生虫、免疫调节等多种生物学功能；此外IFN还具有广谱性和种族特异性，对健康的细胞无毒，使用安全。
- 卓秀萍朱玲徐志文
- 关键词：养猪业干扰素信号传导通路猪病防治寄生虫感染生物学功能
