叶若邻
- 作品数：3 被引量：25H指数：3
- 供职机构：中山大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 黑曲霉糖化酶cDNA的改造及其在酿酒酵母中的表达被引量：7
- 1998年
- 应用PCR技术扩增黑曲霉糖化酶cDNA不含非编码区50bp的5’端740bp的序列与该cDNA3’端1400bp的序列连接，获得切除了5’端非编码的糖化酶cDNA。将改造后的cDNA插到质粒pMA91的酵母PGK基因的启动子和转录终止信号之间，构建了含黑曲霉糖化酶基因的表达载体pMAG17。用原生质体转化法将重组质粒pMAG17引入酿酒酵母GRF18。酿酒酵母GRF18转化子在淀粉平板上产生水解透明圈，表明糖化酶已在酵母中表达并分泌至培养基中。测定转化子的胞外酶活力及淀粉水解率。结果表明：改造后的糖化酶基因在酵母中的表达、分泌水平及水解淀粉的能力都高于未改造的基因。
- 李文清罗进贤叶若邻徐柏年
- 关键词：黑曲霉糖化酶基因改造酿酒酵母CDNA
- 用基因重组技术构建可降解淀粉和产生酒精的酵母工程菌被引量：15
- 2000年
- 将酵母Ty转座子的δ序列 ,黑曲霉糖化酶cDNA及G418抗性基因neo重组进酵母整合型质粒YIplac12 8获得含LEU2 ,neo双标记基因 ,糖化酶cDNA的高整合型表达载体YIp12 8D 17N ,转化GRF18后获得整合型酵母转化子GRF18(YIp12 8D 17N)糖化酶基因在该菌株获得高效表达 ,产物分泌到胞外。Southern印迹分析证明 ,糖化酶基因已整合进工程菌染色体。GRF18(YIp12 8D 17N)在含 2 0 %可溶性淀粉的培养基中培养 2 4h ,淀粉水解率在98%以上 ,酒精浓度达到 9 5 % (v/v)在 2 5 %淀粉中酒精浓度达到 10 2 %。
- 罗进贤叶若邻张添元周涟
- 关键词：降解淀粉酒精生产基因重组技术
- 固定化“双功能”酵母基因工程菌在酒精工业生产中的应用被引量：6
- 2004年
- 应用基因克隆技术将黑曲霉产糖化酶基因cDNA转入经优化的受体菌(酿酒酵母京龙JL108号),获得多株具有产糖化酶能力的酿酒酵母,再经反复筛分、驯化获得JL1(YIp128D.17N),采用变性PVA固定化增殖活细胞包埋技术,将JL1制成具有糖化酒化“双功能”的固定化酵母,大幅度提高细胞数,增强了大生产基因工程菌的糖化、酒化能力,载体产酶能力在10u/g·h以上,酒精发酵醪液中酶活达20u/ml以上,在年产5000t的富川县酒精厂进行工业性生产应用试验,技术指标完全达到并超过传统工艺的生产水平,淀粉出酒率达55%以上。
- 吴淑魁罗进贤陈海滨李文清叶若邻黄树华程少菊周玲
- 关键词：基因工程固定化糖化酶基因
