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结核分枝杆菌Rv0341蛋白编码基因iniB的多态性分析被引量：2: 2010年; 目的研究结核分枝杆菌假设蛋白Rv0341编码基因iniB的多态性,确认其保守性,分析依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)在利福平(R)培养管中Rv0341高表达的可能原因。方法用大肠埃希菌做为阴性对照,提取依R菌(14株)、耐R菌(23株)、R敏感的结核分枝杆菌(12株)、结核分枝杆菌标准株H37Rv及BCG(共51株)的细菌基因组DNA,利用PCR自基因组DNA中扩增iniB基因,通过ApaⅠ/EcoRⅤ、KpnⅠ/SmaⅠ双酶切,琼脂糖凝胶电泳检测其带型,对iniB基因进行限制性片段长度多态性分析并测序。结果实验组中iniB基因的酶切图谱完全相同,测序结果亦证实iniB基因无突变。结论 iniB基因在对R依赖、耐药和敏感等不同类型的结核分枝杆菌中是相对保守的;依R菌在Rv0341蛋白表达方面的差异可能是RNA转录差异或利福平诱导的结果。; 吴园胡频频王易伟李秀全毛旭虎钟敏; 关键词：细菌蛋白质类

Rv0341蛋白在结核分枝杆菌中的表达及其诊断依赖利福平结核分枝杆菌感染结核病的临床价值研究: 背景依赖利福平结核分枝杆菌简称依R菌/(Rifampin-dependent Mycobacterium tuberculosis/)是指某些结核分枝杆菌依赖利福平/(Rifampin,RFP//R/)生长...; 吴园; 关键词：结核分枝杆菌 DIGFA; 文献传递

用于依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)结核病快速诊断的Rv0341蛋白克隆与表达: 目的：克隆与表达结核分枝杆菌蛋白Rv0341并对其免疫反应性进行研究。方法：利用聚合酶链式反应自结核分枝杆菌标准菌株H<,37>Rv扩增Rv0341编码基因,克隆于pET-22b表达载体,测序证实后转化大肠杆菌BL21(...; 钟敏吴园王易伟胡频频钟静毛旭虎; 关键词：结核分枝杆菌结核病免疫反应性; 文献传递

Rv0341用于诊断依赖利福平结核分枝杆菌结核病的研究概况: 1990年日本Nakamura等报道了1例依赖利福平的结核分枝杆菌（依R菌）感染病例。1999年我国耐药结核学术研讨会上首次提出结核分枝杆菌依赖利福平生长的现象。方法对依R菌的研究中发现,有R和无R两种生长条件下,其形态...; 吴园钟敏王易伟钟静胡频频毛旭虎; 关键词：结核分枝杆菌重组蛋白利福平结核病; 文献传递

结核分枝杆菌H_(37)Rv株Rv0341编码基因iniB的克隆与表达被引量：2: 2008年; 目的克隆并表达编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因。方法利用PCR从结核分枝杆菌H37Rv株中扩增iniB基因,克隆于pET-22b(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化后,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达及反应原性。结果克隆并表达了iniB基因,表达的蛋白相对分子质量约43000,诱导2h表达量较高,约为25%。目的蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化后蛋白纯度可达98%以上。经Western blot检测,纯化蛋白与依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)肺结核患者血清呈现强阳性反应,而与非依R菌肺结核患者血清不反应。结论已成功克隆并表达了编码结核分枝杆菌H37Rv株Rv0341蛋白的iniB基因,表达的重组蛋白具有反应原性及特异性,为依R菌结核病临床血清学快速诊断方法的建立及试剂盒的研发奠定了基础。; 吴园钟敏王易伟钟静胡频频毛旭虎; 关键词：结核分枝杆菌克隆

依赖利福平结核分枝杆菌Rv0341天然蛋白的诊断价值被引量：2: 2009年; 目的探讨依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,诊断依R菌感染肺结核病的价值。方法典型依R菌经SDS-PAGE、转膜后,获得Rv0341天然蛋白带,采用结核分枝杆菌抗体DIGFA诊断试剂检测血清Rv0341抗体,并考察该方法的重复性、特异性及敏感性。结果利用Rv0341天然蛋白检测血清Rv0341抗体,具有良好的批内和批间重复性;血清Rv0341抗体在耐R菌肺结核组和R敏感菌肺结核组的特异性分别为92.3%(24/26)和79.3%(23/29),在依R菌肺结核R治疗组中的敏感性为88.9%(16/18);在培养阴性结核组中,阳性率为23.8%(29/122)。54份阳性结果血清进行重复实验,确认为阳性。结论Rv0341天然蛋白可作为诊断抗原用于依R菌结核病血清学诊断试剂盒的研发,以快速辅助诊断依R菌结核病,特别对菌阴依R菌结核病更有诊断价值。; 王易伟吴园胡频频钟明彭建军杨晓梅姚永秀钟敏毛旭虎; 关键词：DIGFA 结核病

结核分枝杆菌Rv0341蛋白编码基因iniB的多态性分析: 目的：研究结核分枝杆菌假设蛋白Rv0341编码基因iniB的多态性，确认其保守性，分析依赖利福平结核分枝杆菌(依R菌)在利福平(R)培养管中Rv0341高表达的可能原因。方法：用大肠杆菌做为阴性对照，提取依R菌(14株)...; 吴园胡频频王易伟李秀全毛旭虎钟敏; 关键词：结核分枝杆菌限制性片段长度多态性分析结核病

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吴园