吴赟
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：上海第二医科大学基础医学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 柯萨奇病毒和腺病毒受体的研究进展被引量：2
- 2003年
- 吴赟刘晶星陈洪
- 关键词：柯萨奇病毒腺病毒受体靶细胞CAR基因治疗
- 柯萨奇-腺病毒受体基因的原核表达和多克隆抗体制备被引量：2
- 2004年
- 目的利用原核基因工程克隆表达柯萨奇-腺病毒受体(CAR)胞外段,并制备多克隆抗体。方法从HeLa细胞中抽提总RNA,通过RT-PCR获得编码CAR胞外段的cDNA,与pQE31质粒连接,构建表达型重组质粒,测序证实后诱导表达,经Ni-NTA柱亲和纯化后,免疫新西兰兔,ELISA检测抗血清滴度。结果重组质粒转化的大肠杆菌M15经IPTG诱导表达及亲和纯化后得到滴度较高的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot显示其分子量约为26 kd,具有特异的抗原性,主要以包涵体形式存在于菌体中。纯化的融合蛋白免疫新西兰兔后产生的抗体,经ELISA检测抗体滴度>1:32 000。结论CAR胞外段基因的克隆表达和多克隆抗体的制备,为进一步研究该受体在以腺病毒载体为基础的基因治疗中的作用及柯萨奇病毒的致病机制奠定了基础。
- 吴赟陈洪黄孝天陈宏新刘晶星
- 关键词：胞外段腺病毒受体多克隆抗体基因新西兰兔
- 重组柯萨奇B3病毒VP1基因的穿梭表达载体的构建及鉴定被引量：3
- 2004年
- 目的 构建重组柯萨奇B3病毒VP1基因的细菌 -酵母菌穿梭表达载体pGBKT7-VP1。方法 用PCR从质粒pT7-CV3- 5 5中扩增柯萨奇B3病毒VP1基因 ,经NdeⅠ和PstⅠ双酶切后 ,定向插入细菌 -酵母菌穿梭表达载体 pG BKT7中完成质粒构建。用酶切和测序鉴定构建质粒。结果 限制性内切酶酶切和序列分析表明VP1巳成功插入pGBKT7载体的多克隆位点 ,克隆方向和阅读框与病毒VP1基因一致。结论 本研究成功构建VP1基因的细菌 -酵母菌穿梭表达载体 pGBKT7-VP1,为研究VP1蛋白与其宿主细胞之间的相互作用奠定了基础。
- 黄孝天陈洪吴赟陈宏新刘晶星
- 关键词：VP1基因克隆
