周峻岗
- 作品数:88 被引量:60H指数:5
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金上海市“科技创新行动计划”项目更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学农业科学化学工程更多>>
- 猪圆环病毒II型口服病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用
- 本发明提供一种马克斯克鲁维酵母重组工程菌及其在生产口服猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗中的应用,该重组工程菌是通过马克斯克鲁维酵母表达载体表达猪圆环病毒II型衣壳蛋白,制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗。本发明提供的马...
- 吕红段进坤周峻岗余垚
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- 在马克斯克鲁维酵母营养缺陷型菌株中表达融合了组氨酸标签的外源基因的重组载体
- 本发明提供了一种在马克斯克鲁维酵母营养缺陷型菌株中表达融合了组氨酸标签的外源基因的重组载体、及其制备方法和应用,所述重组载体按照顺序包括氨苄抗性基因、PKD1载体序列、菊粉酶启动子、多克隆位点、菊粉酶终止子、营养基因启动...
- 吕红余垚袁汉英周峻岗李育阳
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- 葡萄糖苷酶/木糖苷酶双功能纤维素降解酶及其制备方法和应用
- 本发明属生物工程领域,涉及一种葡萄糖苷酶/木糖苷酶双功能纤维素降解酶RuBGX1,其重组载体、菌株、制备方法及应用。RuBGX1能够水解葡萄糖苷、半乳糖苷、木糖苷、纤维二糖及三糖等底物,在木聚糖酶中加入适量的RuBGX1...
- 吕红周峻岗包蕾
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- 具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的双功能酶及其制备方法与应用
- 本发明属生物工程技术领域,具体为一种具有内切葡聚糖酶/木聚糖酶活性的双功能酶(RuCelA)及其制备方法与应用。RuCelA来源于中国牦牛瘤胃未培养微生物,RuCelA对磷酸纤维素、滤纸具有一定的活性。RuCelA不仅可...
- 吕红常磊周峻岗
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- 一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法
- 为解决猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化中的步骤复杂、工艺繁琐、生产成本高、纯化效率低等问题,本发明提供了一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法,包括如下步骤:步骤S1,收集重组酵母细胞并进行破碎,获得含猪圆环病毒2...
- 吕红周峻岗段进坤杨德强
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- 一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的定量检测方法
- 本发明的目的在于提供一种操作简单、灵敏度高、重复性和适用性高的PCV2病毒样颗粒检测方法,该方法包括如下步骤:步骤S1,稀释待测样品并进行过滤澄清或离心澄清;步骤S2,取蛋白含量已被确定的猪圆环病毒2型病毒样颗粒标准品进...
- 吕红周峻岗段进坤杨德强
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- 一种阿魏酸酯酶基因、基因工程菌株以及制备方法和用途
- 本发明提供了一种阿魏酸酯酶基因,其来源于中国牦牛瘤胃微生物,具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,编码如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。本发明还提供了含有该基因的马克斯克鲁维酵母重组表达载体及基因工程菌株...
- 吕红刘洋周峻岗余垚
- GH43家族β-D-木糖苷酶RuXyn1在马克斯克鲁维酵母中的表达及其应用
- 2020年
- 木聚糖的降解需要内切β-木聚糖酶和β-D-木糖苷酶的协同作用,β-D-木糖苷酶能将β-木聚糖酶的水解产物木寡糖降解为木糖,因此在半纤维素的利用中具有重要的意义.本研究将中国牦牛瘤胃微生物来源的糖基水解酶GH43家族β-D-木糖苷酶基因RuXyn1克隆到含两种不同分泌信号肽(菊粉酶信号肽和α-factor信号肽)的马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)分泌表达载体(pUKDN132和pUKDN129)中,转化K.marxianus Fim-1 ura3Δ,通过筛选获得两株分泌表达β-D-木糖苷酶基因RuXyn1的重组菌株Fim-1/pUKDN132-RuXyn1和Fim-1/pUKDN129-RuXyn1.重组菌株摇瓶培养72h后,上清液中β-D-木糖苷酶酶活分别为0.304U/mL和0.045U/mL.在5L发酵罐高密度发酵中,Fim-1/pUKDN132-RuXyn1分泌表达的β-D-木糖苷酶酶活为1.75U/mL,而Fim-1/pUKDN129-RuXyn1的酶活为1.6U/mL,表明在表达β-D-木糖苷酶RuXyn1时,菊粉酶信号肽介导的分泌效率优于α-factor信号肽.以玉米芯为底物,我们测试了K.marxianus重组表达的β-D-木糖苷酶RuXyn1的降解效果,发现在商业化的β-木聚糖酶和纤维素酶CTec2中,添加β-D-木糖苷酶RuXyn1能够显著提升玉米芯的降解效率,还原糖产量提高7%,木糖和葡萄糖的产量分别提高12.4%和6.1%.
- 段懿桐李雪莹周峻岗余垚余垚
- 关键词:木聚糖马克斯克鲁维酵母
- 基因组整合与游离质粒联合应用介导阿魏酸酯酶A在马克斯克鲁维酵母中高效分泌表达
- 2020年
- 阿魏酸是植物中广泛存在的酚类化学物质,具有抗氧化活性.阿魏酸酯酶能够水解植物细胞壁半纤维素和阿魏酸之间的酯键,释放阿魏酸,在食品、医药、饲料加工等领域具有广泛的应用价值.马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)是一种生长迅速、蛋白分泌能力强的新型食品安全级酵母,具有高效分泌表达菊粉酶的能力,本研究利用基因组菊粉酶位点INU1整合与游离质粒联合应用的方式,在马克斯克鲁维酵母中实现了黑曲霉(Aspergillus niger)阿魏酸酯酶AnFaeA的高效表达,发酵液上清中的酶活达到164.4U/mL.利用马克斯克鲁维酵母重组表达的阿魏酸酯酶能够高效降解玉米芯释放阿魏酸,释放量可达1.81mg/g,并且在β-木聚糖酶的协助下可进一步提高阿魏酸的释放量,达到2.8mg/g.
- 李雪莹段懿桐吴丽莫文娟周峻岗周峻岗吕红
- 关键词:阿魏酸酯酶马克斯克鲁维酵母
- 新型α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶RuAra1的表达与鉴定
- 2014年
- 随着能源问题的日益突出,半纤维素资源的利用逐渐受到人们的重视.α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶(α-Larabinofuranosidase,EC 3.2.1.55)属于半纤维素酶系,能水解以α-1,3、α-1,2或α-1,5键连在木聚糖主链上的阿拉伯糖单体或低聚阿拉伯糖侧支.本实验室将克隆得到的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因RuAral在大肠杆菌中重组表达,得到的重组阿拉伯呋喃糖苷酶RuAral能够水解4-硝基酚-α-L-阿拉伯糖苷(4-Nitrophenyl-α-Larabinofuranoside,pNPA)、4-硝基酚-β-D-吡喃木糖苷(4-Nitrophenyl-β-D-xylopyranoside,pNPX)以及从小麦阿拉伯木聚糖中水解释放阿拉伯单糖.以pNPX为底物时,该酶的最适反应pH为6.0,最适反应温度为50℃.RuAral与瘤胃真菌(Neocallimastix patriciarum)内切木聚糖酶XynCIDBFV、瘤胃细菌木糖苷酶RuXynl的组合使用可以实现对小麦阿拉伯木聚糖的协同降解,且降解效率优于德国AB酶制剂公司的商品酶ROHALASE WP.
- 夏婷颖周峻岗吕红
- 关键词:宏基因组