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猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立被引量：5: 2017年; [目的]实现猪细环病毒(TTSuV)的准确定量检测。[方法 ]根据TTSuV的序列特点,设计特异性引物、探针,建立数字PCR检测技术。对数字PCR反应体系中的引物和探针浓度进行优化,分析方法的灵敏度、特异性,并初步应用于进行临床检测。[结果 ]最终确定TTSuV1a和TTSuV1b数字PCR反应体系中最佳引物浓度均为250 nmol/L,最佳探针浓度均为300 nmol/L,TTSuV1a型和TTSuV1b型灵敏度均可达到单个拷贝数;以猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,结果无交叉反应;批内和批间试验表明,该方法的重复性良好;本实验室留存的92份血清样本的检测结果与其背景信息一致。[结论 ]本研究建立的TTSuV数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于TTSuV的定量检测。; 杨春华孙洁罗秋红祝建新孙思扬周延钟毅夏彪; 关键词：实时荧光PCR

猪细环病毒实时荧光PCR检测技术的建立及应用被引量：2: 2017年; 为了实现猪细环病毒(TTSuV)快速检测,给TTSuV的调查、监测和防控提供可行性、操作性强的技术支持。本试验根据TTSuV的序列特点设计特异性引物、探针,应用实时荧光PCR技术检测TTSuV1a型和TTSuV1a1b型。以猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和重复性,TTSuV1a灵敏度可达9.2拷贝/μL,TTSuV1b灵敏度可达5.6×101拷贝/μL;批内变异系数均小于1%,批间变异系数均小于3%。将该方法与PCR法、PCR-DHPLC进行比较,结果证实该方法具有较好的准确性。对92份血清样本进行检测,发现有58份TTSuV1a阳性、62份TTSuV1b阳性、51份TTSuV1a和TTSuV1b共感染阳性。本研究建立的TTSuV实时荧光PCR法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于TTSuV感染的分子流行病学调查。; 杨春华孙思扬孙洁李仕祥祝建新周延; 关键词：实时荧光PCR

猪细环病毒PCR-DHPLC检测技术的建立及应用被引量：4: 2012年; 为了应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测猪细环病毒1型和2型,根据猪细环病毒的序列特点设计特异性引物,PCR扩增产物经DHPLC技术进行快速检测。选择猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和重复性;用质粒标准品进行TTSuV1和TTSuV2的PCR-DHPLC检测,灵敏度可达1.0×101拷贝·μL-1。对80份血清样本分别应用实时荧光PCR法、PCR-凝胶电泳法及本文所建立的PCR-DHPLC法与进行检测,发现TTSuV1有63份PCR-DHPLC阳性,63份实时荧光PCR阳性,54份PCR-凝胶电泳阳性;TTSuV2有69份PCR-DHPLC阳性,69份实时荧光PCR阳性,56份PCR-凝胶电泳阳性。本试验建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于TTSuV感染的分子流行病学调查。; 杨春华周延孙思扬钟毅王川庆; 关键词：变性高效液相色谱实时荧光PCR PCR

从市场风险防范浅论如何完善信用卡立法: 随着市场经济的发展，信用卡成为社会金融行业发展的新兴产物。目前，信用卡已经成为社会主要支付方式，而用以规范信用卡业务的法律法规却只是散见于《民法通则》、《消费者权益保护法》、《商业银行法》、《合同法》等法律当中，而且司法...; 周延; 关键词：市场经济信用卡业务法律制度; 文献传递

猪TTV实时荧光定量PCR检测方法的建立以及猪群中TTV感染情况的调查: TTV是一种无包膜的单股负链环状的DNA病毒,最初是1997年由日本科学家从一个输血后肝炎患者的血清中分离出,经与基因库中已知的DNA序列进行对比,证明该片段是一种全新的基因,该基因代表的病毒被认为是一种有可能引起输血后...; 周延; 关键词：猪群感染率; 文献传递

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