周怀瑜
- 作品数：49 被引量：156H指数：8
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 弓形虫SAG1-SAG2复合DNA疫苗免疫小鼠诱导的免疫保护性被引量：11
- 2006年
- 目的利用已构建的弓形虫主要表面抗原SAG1DNA疫苗及SAG1-SAG2复合DNA疫苗,接种BALB/c小鼠,观察疫苗的免疫保护性。方法将两核酸疫苗分别通过肌肉注射免疫小鼠,对照组注射pcDNA3.1空质粒。ELISA法检测血清IgG抗体及细胞因子IL-2、IFN-γ和IL-4;用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定免疫鼠脾脏NK细胞杀伤率;流式细胞仪测定T细胞亚群;用弓形虫速殖子腹腔攻击感染小鼠,观察小鼠的生存时间。结果SAG1-SAG2组小鼠IgG抗体、IFN-γ、IL-2及CD4+/CD8+细胞比例均高于SAG1组(P<0.05);各组均未检测到IL-4;复合DNA疫苗组感染弓形虫后生存时间较单基因组延长(P<0.01)。结论弓形虫SAG1-SAG2复合DNA疫苗较SAG1单基因疫苗具有更好的免疫保护性。
- 孙怡何深一丛华杨婷婷周怀瑜古钦民李瑛赵群力
- 关键词：弓形虫复合基因DNA疫苗
- 弓形虫P30基因非融合蛋白表达的研究被引量：4
- 2001年
- 目的 :构建弓形虫主要表面抗原P30基因的原核表达载体并在E .coli中进行表达。方法 :采用定向克隆的方法 ,将PCR扩增得到的P30片段 ,插入原核表达质粒 pBV2 2 0上 ,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 ,于氨苄LB培养平板上筛选阳性克隆 ,经过酶切及PCR扩增鉴定重组子。将含阳性重组子 pBV2 2 0 P30的工程菌经温度诱导表达 ,SDS PAGE电泳及免疫印迹分析。结果 :成功构建了 pBV2 2 0 P30重组质粒 ;SDS PAGE电泳及Western blot显示表达P30非融合蛋白的分子量为 2 9kD ,且能被弓形虫高免鼠血清识别。结论 :从弓形虫基因组DNA中获取P30基因 ,并成功构建了 pBV2 2 0 P30重组质粒 ,诱导表达了P30非融合蛋白。对弓形虫病基因疫苗研制奠定了基础。
- 丛华古钦民周怀瑜赵群利何深一李瑛
- 关键词：弓形虫属P30基因基因表达
- 一种弓形虫GRA10复合表位肽及其制备的疫苗
- 本发明公开了一种弓形虫GRA10复合表位肽及其制备的疫苗，将筛选出的弓形虫GRA10的三段表位(GRA10<Sub>80-94</Sub>、GRA10<Sub>161-169</Sub>、GRA10<Sub>192-21...
- 丛华尹绘权张晓丽丛海滋周怀瑜何深一
- 文献传递
- SAG1-MIC8复合DNA基因疫苗免疫小鼠诱导抗弓形虫感染的保护性研究(英文)被引量：8
- 2010年
- 目的观察弓形虫SAG1-MIC8复合DNA基因疫苗对C57BL/6J小鼠的免疫保护作用。方法构建重组质粒pcDNA3.1-SAG1、pcDNA3.1-MIC8和pcDNA3.1-SAG1-MIC8,并分别转染Hela细胞体外表达蛋白,蛋白质印迹(Westernblotting)分析鉴定。将70只小鼠随机均分为5组,分别为PBS组、空质粒组、pcDNA3.1-SAG1组、pcDNA3.1-MIC8组和pcDNA3.1-SAG1-MIC8组,每2周肌注免疫(100μg/只)1次,共3次,于免疫前和初次免疫后13、27、41和55d采血分离血清。初次免疫后56d,每组小鼠中7只剖杀后分离脾细胞,另7只经腹膜感染弓形虫RH株速殖子(1×104/只),观察各组生存时间。ELISA法分别检测各组小鼠血清IgG、IgG1、IgG2b和IgG2c水平,以及干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)水平。放射法检测T淋巴细胞增殖情况。结果Westernblotting分析结果显示,重组质粒pcDNA3.1-SAG1、pcDNA3.1-MIC8和pcDNA3.1-SAG1-MIC8均能在Hela细胞表达,蛋白相对分子质量(Mr)分别为34000、74000和109000。pcDNA3.1-SAG1-MIC8组初次免疫后41d和55d血清中IgG,末次血清中IgG2b、IgG2c和IFN-γ,以及T淋巴细胞增殖能力均显著高于其他各组(均P<0.05)。各组的末次血清中IgG1和IL-4水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。5组小鼠感染弓形虫速殖子后生存时间中位数分别为3、4、7、7和10d,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论弓形虫SAG1-MIC8复合DNA抗原较SAG1和MIC8单基因抗原有更好的免疫保护性。
- 姚远何深一王花欣周怀瑜赵红李婷薛明福朱兴全
- 关键词：弓形虫核酸疫苗
- 济南市蔬菜污染土源性线虫卵情况的调查
- 2002年
- 为了解土源性线虫传播途径和流行因素,我们于1999年7～9月对土源性线虫污染蔬菜的情况进行了调查。1 材料和方法1.1 标本采样:在济南市五处菜市场随机采取新鲜蔬菜,每份约500g;在五家超市随机采取“净菜”标本,每份约250g。1.2 标本的清洗和浓缩:用毛刷蘸取自来水刷洗蔬菜标本,“净菜”用自来水直接浸洗,将洗过的水倒入锥形杯中,待其自然沉淀。1h后倾去其上层液,再放入清水,搅拌后静置。如此反复水洗沉淀,直至上液清晰为止。倾去上液。
- 周怀瑜赵群力丛华李瑛何深一古钦民
- 关键词：蔬菜污染
- 弓形虫多价DNA疫苗免疫途径与效果评价被引量：6
- 2006年
- 目的观察弓形虫多价DNA疫苗经不同免疫途径对小鼠的免疫效果。方法通过基因重组技术构建弓形虫多价抗原与霍乱毒素融合基因的真核表达质粒pSAG1-2-CTA2/B;碱裂解法大量制备重组质粒经肌注、滴鼻途径免疫小鼠,每2周免疫1次,共3次,于免疫前和免疫后4周断尾取血测定IgG抗体和血清中的细胞因子干扰素(IFN-γ)、白介素(IL-4);取免疫小鼠脾脏测定T淋巴细胞增殖活性、自然杀伤细胞(NK细胞)活性及T细胞亚群。结果经肌注免疫的小鼠IgG抗体生成明显(P<0.05),经滴鼻免疫的小鼠细胞免疫水平明显增强(P<0.01)。同时经2种途径免疫的小鼠体液免疫和细胞免疫水平均明显增强(P<0.01),且免疫鼠生存率大大提高(P<0.05)。结论多种免疫途径结合可有效增强弓形虫多价DNA疫苗的免疫原性。
- 丛华古钦民周怀瑜李瑛何深一赵群力王静雯
- 关键词：弓形虫DNA疫苗免疫途径
- 囊尾蚴病的危害与防治（公卫）被引量：1
- 2003年
- 何深一周怀瑜
- 关键词：囊尾蚴病流行病学
- 含弓形虫复合抗原基因的真核表达质粒在哺乳动物细胞中的表达
- 2005年
- 目的研究弓形虫复合抗原真核表达质粒pcDNA3.1-P30-P22-CTXA2/B在哺乳动物细胞中的表达情况。方法利用脂质体介导的转染技术,将真核表达质粒pcDNA3.1-P30-P22-CTXA2/B和空载体pcDNA3.1分别转染He-la细胞,400μg/mlG418加压筛选和200μg/mlG418维持筛选,获得稳定转染的Hela细胞。采用SDS-PAGE和West-ern-blot方法对复合基因P30-P22-CTXA2/B的表达产物进行鉴定。结果SDS-PAGE结果显示,重组质粒转染Hela细胞后的表达产物分子质量单位为64ku,Western-blot显示此蛋白条带能被抗P30抗体识别。结论构建的真核表达质粒pcDNA3.1-P30-P22-CTXA2/B能在哺乳动物细胞中成功表达插入基因所编码的融合蛋白,为进一步动物实验提供了实验依据。
- 江渊古钦民李瑛周怀瑜赵群力
- 关键词：弓形虫真核表达质粒基因表达P30P22
- 人体寄生虫学实验教学多媒体资源库的建设与应用被引量：19
- 2006年
- 本文探讨了医学高等院校寄生虫实验教学多媒体资料库的构建及其对实验教学改革的支持效果。
- 周怀瑜赵群力张加勤古钦民李瑛丛华何深一
- 关键词：人体寄生虫学实验教学多媒体资源库教学课件
- 护校学生肠道寄生虫感染调查资料分析
- 2004年
- 为了解在校大、中专学生肠道寄生虫感染情况,为学校开展健康教育和制定寄生虫病防治规划提供依据,作者对原山东医科大学护校1992～2001年在校学生粪便检查资料进行整理分析,结果报道如下.
- 赵群力周怀瑜李瑛丛华何深一古钦民
- 关键词：护校学生肠道寄生虫寄生虫感染健康教育
