孙文洁
- 作品数：12 被引量：11H指数：2
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- 放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子研究
- 目的将放射敏感性的CArG元件与肿瘤特异性的人端粒酶反转录酶(human telomerasereverse transcriptase,hTERT)基因启动子相结合,构建新的嵌合启动子。方法构建含不同CArG元件数量的...
- 熊杰周云峰孙文洁王伟峰廖正凯周福祥谢丛华
- 关键词：基因治疗
- 文献传递
- B7家族新成员HHLA2在人类恶性肿瘤中的研究现状被引量：1
- 2017年
- HHLA2 （human endogenous retrovirus-H long terminal repeat-associating 2 ）是第二信号分子B7家族的一个新成员，与不同的受体结合提供T细胞活化的共抑制或共刺激信号。研究表明，HHLA2很少表达于人类正常组织，却高表达于多种人类恶性肿瘤组织，提示HHLA2可能参与免疫逃逸，对恶性肿瘤的发生、发展、转移及预后有一定影响，可能是恶性肿瘤免疫治疗的一个新靶点。因而，深入研究HHLA2在多种恶性肿瘤中的表达情况有重要意义。
- 孙文洁李姝颖罗园孙绍星谢丛华
- 关键词：B7家族恶性肿瘤免疫治疗
- 放射线对肝癌细胞中端粒酶启动子活性的影响
- 2007年
- 目的:研究放射线对不同的肝癌细胞株中人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子活性的影响。方法:报告质粒phTERTp-Luc经脂质体METAFECTENE介导瞬时转染4种不同的肝癌细胞株后,给予2 Gyγ射线照射,观察照射组与非照射组中荧光素酶的表达。结果:瞬时转染4种不同的肝癌细胞株后,检测到照射可经hTERT启动子而诱导荧光素酶的表达增强,即hTERT启动子在2 Gy照射组中比在非照射组中具有更高的活性。结论:2Gyγ射线可以诱导肝癌细胞中hTERT启动子活性增强,有望用于增强肝癌细胞中hTERT启动子介导的靶向基因治疗,并为进一步深入研究奠定了基础。
- 孙文洁廖正凯周福祥张红艳黄成虎熊杰周云峰
- 关键词：启动子人端粒酶逆转录酶肝癌细胞放射线
- 放射诱导辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因表达对肺癌细胞系的生物效应研究被引量：1
- 2010年
- 目的 检测放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子介导的辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统对肺癌细胞A549、SPC-A1的生物效应.方法 构建含有6个CArG元件的人端粒酶逆转录酶基因嵌合启动子调控的辣根过氧化物酶表达的质粒载体,及单个端粒酶逆转录酶启动子质粒和对照质粒,分别为pE6-hTERT-HRP、phTERT-HRP、pControl-HRP、pControl-luc.分别用细胞计数法、Annexin V-FITC染色检测此嵌合启动子质粒系统对肺癌细胞A549、SPC-A1和正常人胚肺细胞（hEL）的生长抑制及凋亡效应.利用成克隆分析法检测此系统对肺癌细胞A549、SPC-A1放射敏感性的影响.结果 在6 Gy放射线诱导下质粒pE6-hTERT-HRP、phTERT-HRP、pControl-HRP、pControl-luc介导的自杀基因系统对A549细胞的平均生长抑制率分别为72.92%、40.60%、51.00%、25.19%（F=67.31,P〈0.01）,对SPC-A1细胞的平均抑制率分别为64.63%、30.02%、48.23%、23.16%（F=64.94,P〈0.01）,而对正常hEL细胞则分别为20.81%、18.05%、44.20%、18.32%（F=52.19,P〈0.01）.同样四种质粒对A549细胞的平均早期凋亡率分别为36.63%、22.30%、24.33%、12.53%（F=50.99,P〈0.01）,对SPC-A1细胞的平均早期凋亡率分别为33.73%、17.37%、22.43%、11.20%（F=20.76,P〈0.01）,而对正常hEL细胞则分别为13.53%、12.5%、21.93%、12.16%（F=15.08,P〈0.01）.同样四种质粒对A549细胞放射增敏比分别为3.45、2.29、3.05、1.21,对SPC-A1细胞的放射增敏比则分别为2.68、2.15、2.28、1.15.结论 放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子介导的辣根过氧化物酶/吲哚乙酸自杀基因系统对肺癌细胞A549、SPC-A1具有特异杀伤作用,具有很好的应用前景.
- 熊杰周云峰王伟锋孙文洁廖正凯周福祥谢丛华
- 关键词：细胞系肺肿瘤自杀基因系统放射生物效应
- 辐射诱导启动子介导的腺病毒自杀基因联合照射的抗肿瘤效应被引量：1
- 2011年
- 目的检测利用肿瘤特异性辐射诱导嵌合启动子介导的腺病毒自杀基因系统联合放射线对肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法构建含有6个串联放射反应元件的人端粒酶反转录酶基因嵌合启动子调控辣根过氧化物酶表达的复制缺陷型腺病毒，同时建立人肝癌细胞MHCC97裸鼠皮下移植瘤模型，瘤内注射重组腺病毒，腹腔注射吲哚乙酸，同时给予叮射线照射，观察肿瘤生长、裸鼠生存状态，以及肿瘤组织和正常器官的组织病理学改变。结果分组处理后第31天，阴性对照病毒组、单纯病毒组、单纯照射组及联合组裸鼠皮下移植瘤相对体积分别为49．23±4．55、27．71±7．74、28．53±10．48和．11．58±3．23，组间差异具有统计学意义（F=16．288，P〈0．01），其中联合组的肿瘤抑制作用最强，生长抑制率为76．5％；与对照组相比，非对照组均能延长裸鼠中位生存期（r=18．307，P〈0．01），其中联合组差异最显著（13d与43d）；光镜下各治疗组肿瘤组织均出现坏死，其中联合组肿瘤坏死较多，而正常器官组织病理学检查未发现治疗相关损伤改变。对照组裸鼠肝脏显示出密集的肝癌转移灶，单纯治疗组仅有少数转移灶，而联合组肝脏未见明显异常。结论复制缺陷型腺病毒介导的靶向自杀基因治疗联合放疗能有效抑制肝癌皮下移植瘤生长，延长裸鼠生存期，为肝癌的治疗提供了新的途径，具有良好的应用前景。
- 孙文洁於海军熊杰徐禹廖正凯周福祥谢从华周云峰
- 关键词：腺病毒人端粒酶反转录酶
- 放射线对肝癌细胞中端粒酶启动子活性的影响
- 目的研究放射线对不同的肝癌细胞株中人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子活性的影响。方法报告质粒 phTERTp-Luc 经脂质体 METAFECTENE 介导瞬时转染4种不同的肝癌细胞株后,给予2Gy γ射线照射,观察照...
- 孙文洁廖正凯周福祥张红艳黄成虎熊杰周云峰
- 文献传递
- 去水淫羊藿黄素对非小细胞肺癌细胞的放射协同作用
- 2020年
- 目的:探究去水淫羊藿黄素(ICT)对非小细胞肺癌(NSCLC)的放射协同作用。方法:采用CCK-8实验、克隆形成实验、免疫荧光爬片实验、流式细胞术、细胞划痕术、Transwell小室侵袭实验及免疫印迹实验探讨该药物对A549及H1975细胞生长、增殖、凋亡及侵袭与迁移的影响。结果:ICT在12. 5μmol/L时,A549及H1975细胞细胞活性为空白组的70%~80%;低剂量放疗(2 Gy)联合组对A549及H1975细胞克隆生长抑制率对比单纯处理组显著增加(P<0. 05);联合组增殖与修复相关因子Ki-67、γ-H2AX的荧光表达量显著减少(P<0. 05);联合组的G2期进一步阻滞,凋亡率增高(P<0. 05);高剂量放疗(10 Gy)联合组的侵袭率与迁移率显著降低(P<0. 05);联合组相对10 Gy单纯照射组的中Bcl-2的蛋白表达降低,Caspase3/8、BAX增高,细胞周期蛋白(Cyclin-B/D,CDK1)降低,Ecadherin升高,N-cadherin和Vimentin降低。联合组相对2 Gy单纯照射组的凋亡相关蛋白BAX表达量升高,BCL-2则降低;修复相关蛋白BRAC-1、XRCC-5、Rad51表达量降低,γ-H2AX升高。结论:去水淫羊藿黄素能协同低剂量(2 Gy)单次放射抑制非小细胞肺癌细胞的增殖,协同单次高剂量(10 Gy)放射进而抑制细胞的侵袭迁移,促进细胞凋亡。
- 徐越清孙英明马诗静孙文洁蒋雪萍陈纪龚䶮谢丛华
- 关键词：淫羊藿非小细胞肺癌
- 人端粒酶逆转录酶启动子在裸鼠中增强人喉癌对基因放射治疗的敏感性被引量：1
- 2008年
- 目的探索人端粒酶逆转录酶启动子（hTERTp）介导自杀基因辣根过氧化酶（HRP）-吲哚乙酸（IAA）系统联合射线，对相同来源而放射敏感性不同的人喉癌移植瘤模型的治疗作用。方法建奇相同来源而放射敏感性不同的人喉癌（Hep-2和Hep-2R细胞）移植瘤模型，并分为联合治疗组（A组和AR组）、基因治疗组（B组和BR组）、单纯放射组（C组和CR组）和对照组（D组和DR组）。瘤内注射脂质体包裹的质粒phTERTp—HRP，腹腔内注射IAA并联合放疗30Gy，观察对移植瘤生长的抑制作用。应用原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测肿瘤细胞的凋亡情况；应用AP法检测瘤内HRP蛋白的表达。结果裸鼠移植瘤生长以联合治疗组最慢，以对照组最快。A组的肿瘤抑制率为54．8％，B组为10．0％，C组为31．9％，AR组为52．7％，BR组为24．8％，CR组为17．0％。A组和AR组可见大量肿瘤细胞坏死和凋亡，凋亡指数分别为16．6％±1．3％和17．6％±1．3％，高于其他组（P〈0．05）。B组的HRP蛋白表达率（21．9％±5．7％）低于BR组和（33．3％±8．9％），辐射诱导后，A组和AR组的HRP蛋白表达率分别增加2．1和1．6倍（P〈0．05）。结论在不同放射敏感性的喉癌移植瘤模型中，hTERTp能被射线诱导，并根据瘤内端粒酶活性增强HRP基因的表达。hTERTp—HRP—IAA系统通过诱导肿瘤细胞凋亡和引起细胞坏死，抑制裸鼠移植瘤生长，并与射线协同作用，起到放射增敏作用。
- 黄成虎廖正凯周福祥王伟锋谢丛华张红艳孙文洁周云峰
- 关键词：人端粒酶逆转录酶启动子喉肿瘤裸鼠
- 放射诱导的肿瘤特异性嵌合启动子研究被引量：1
- 2010年
- 目的将放射敏感性的CArG元件与肿瘤特异性的人端粒酶反转录酶（hTERT）基因启动子相结合，构建新的嵌合启动子。方法构建含不同CArG元件数量的嵌合hTERT启动子，在放射线诱导下（单剂量或分割照射），利用荧光素酶报告基因检测其在肿瘤细胞（HeLa、A549、MHCC97细胞）及正常细胞（hEL细胞）中的活性。结果包含6个CArG元件的hTERT嵌合启动子较含其他数量CArG的嵌合启动子显示了更好的放射诱导性，并在4～6Gy时达到顶峰，而构建的嵌合启动子在正常的hEL细胞中活性很低。在肿瘤细胞中，3次2Gy与单次6Gy剂量照射相比较，报告基因的表达相当。结论包含6个CArG元件的肿瘤特异性嵌合启动子具备良好的放射诱导性，这种嵌合的启动子系统具有肿瘤基因治疗的潜力。
- 熊杰周云峰孙文洁王伟峰廖正凯周福祥谢丛华
- 关键词：基因治疗
- 靶向HRP/IAA自杀基因系统联合IL-12基因治疗Lewis肺癌的研究被引量：3
- 2011年
- 目的:观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动辣根过氧化物酶(HRP)/吲哚乙酸(IAA)系统联合白细胞介素-12(IL-12)基因对小鼠Lewis肺癌的疗效。方法:建立Lewis肺癌移植瘤模型,随机分为对照组、HRP组、IL-12组和联合组,分别给予AdCMVGFP、AdhTERTHRP、AdCMVmIL-12单一或联合注射,然后腹腔注射IAA,观察肿瘤生长情况。蛋白质印迹法和ELISA检测瘤组织HRP和IL-12表达;免疫组化检测瘤组织内CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况。结果:与对照组、单一治疗组相比,联合组小鼠肿瘤生长受到显著抑制(联合组vs对照组:P=0.000,9 d;联合组vsHRP组:P=0.005,15 d;联合组vsIL-12组:P=0.046,12 d),生存期显著延长(联合组vs对照组:χ2=9.529,P=0.002;联合组vsHRP组:χ2=9.039,P=0.003;联合组vsIL-12组:χ2=8.595,P=0.003),肿瘤组织广泛坏死,CD4+、CD8+淋巴细胞浸润显著增多。结论:IL-12基因治疗可诱导宿主产生抗肿瘤免疫应答,与靶向HRP/IAA自杀基因系统联合具有协同抗肿瘤作用。
- 徐禹周云峰於海军孙文洁廖正凯周福祥谢丛华
- 关键词：LEWIS肺癌基因治疗人端粒酶逆转录酶白细胞介素-12
