安铁洙
- 作品数：113 被引量：291H指数：9
- 供职机构：东北林业大学生命科学学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 兽用孕马血清促性腺激素冻干针剂制备及其应用效果观察
- 孕马血清促性腺激素(PMSG)是由妊娠母马子宫内膜杯状细胞分泌的一种糖蛋白激素，分子量52KD，由于其具有FSH和LH的双重活性，且在体内的半衰期长，故而能强烈刺激母畜同期发情和超数排卵。本文论述了PMSG冻干针剂的制备...
- 谭建华安铁洙万忠海魏海军
- 关键词：孕马血清促性腺激素冻干针剂糖蛋白激素
- 文献传递
- 拟蜘蛛拖丝蛋白基因重组蛋白的纯化及其抗血清制备
- 2011年
- 为了制备可用于拟蜘蛛拖丝蛋白体外检测的抗血清,利用前期工作中获得的蜘蛛拖丝蛋白基因重组原核表达载体2S-pET-52b(+),采用原核表达方法获得大量重组蜘蛛拖丝蛋白2S-His,对此重组蛋白进行His标签特异性的亲和纯化,再依次经SDS-PAGE、切胶和与佐剂混合后作为抗原;皮下多点注射法将抗原注入新西兰大白兔皮下进行免疫;采集已免疫的兔血清,采用ELISA检测方法对其效价进行检测。结果显示,重组质粒2S-pET-52b(+)转化BL21-pLysS后获得最佳的表达菌株;在筛选得到的最佳IPTG、温度和时间(分别为1.0 mmol/L、30℃和2 h)条件下诱导获得2S-His重组蛋白;经免疫的4只兔血清中,2只兔的血清效价达1∶25 600和1∶12 800。表明利用2S-pET-52b(+)重组质粒成功获得可用于拟蜘蛛拖丝蛋白体外检测的抗血清。本研究为加快建立在被毛中特异表达大量蜘蛛拖丝蛋白的新方法提供依据。
- 王春生罗芳张志人赵健灵朴善花安铁洙
- 关键词：原核表达蛋白纯化抗血清制备
- 牛体外受精胚胎细胞核移植的实验研究
- 1996年
- 将采自肉联厂屠宰车间的牛卵巢中的卵母细胞置于ＴＣＭ－１９９＋１０％ＥＣＳ（０ｄ）＋ＦＳＨ（１万ＩＵ／Ｌ）＋ＬＨ（５ｍｇ／Ｌ）中培养成熟，用含０．３％透明质酸酶的消化液将卵母细胞周围的卵丘细胞去掉，并以７．５ｍｇ／Ｌ的ＣＢ液处理后，用微吸管吸去透明带内的第一极体及极体下面的部分卵母细胞质，然后将经体外受精并发育至８～１６细胞期胚胎的卵裂球注入去核卵母细胞的卵周隙中，再将移核胚置于电融合槽内进行融合（电场强度为１２００Ｖ／ｃｍ，持续时间为８０μｓ，１次脉冲刺激）。将融合的胚胎移入生长有单层贴壁颗粒细胞的发育培养液（ＴＣＭ－１９９＋１０％牛血清）中培养，观察移核胚的融合率及发育率，部分去核卵母细胞经染色后观察去核率。结果表明：（１）移核胚的融合率为８６．９％（５３／６１）；（２）发育至２～８细胞期的胚胎占培养的移核胚胎总数的２１．３％（１０／４７）；（３）卵母细胞的去核率为６８．２％（４５／６６）。
- 李子义李德雪岳占碰安铁洙毛振宾卢圣忠刘云海韩燕清敖红朱裕鼎
- 关键词：核移植体外受精胚胎繁殖
- 利用成体干细胞治疗糖尿病被引量：7
- 2008年
- 糖尿病是一类严重的代谢疾病,正危害着世界上越来越多人口的健康。胰岛移植是一种治疗糖尿病的有效方法,却因供体缺乏和移植后免疫排斥问题制约了其广泛应用。干细胞为具有强增殖能力和多向分化潜能的细胞,是利用细胞替代疗法治疗重大疾病的细胞来源之一,其中成体干细胞因不存在致瘤性及伦理道德问题而被人们寄予厚望。成体胰腺干细胞在活体损伤及离体培养条件下均能产生胰岛素分泌细胞,肝干细胞、骨髓干细胞和肠干细胞等在特定离体培养条件下或经过遗传改造后也均可产生胰岛素分泌细胞,将这些干细胞来源的胰岛素分泌细胞移植到模型糖尿病小鼠中可以治疗糖尿病。因而,成体干细胞可以为细胞替代疗法治疗糖尿病提供丰富的胰岛供体来源。
- 张丽新滕春波安铁洙
- 关键词：糖尿病成体干细胞胰腺干细胞肝干细胞骨髓干细胞
- 牛腔前卵泡的机械分离与采集被引量：4
- 2004年
- 本实验建立了皮肤移植刀切割、剪碎、分级过筛的牛卵巢腔前卵泡体外分离技术 ,分离出了在直径 6 0～180 μm的不同大小的腔前卵泡 ,提高了腔前卵泡的回收效率 [5 7.2 3± 10 .2 1(个 /h) ,n =2 0 ]。
- 李海周虚高志花安铁洙
- 关键词：腔前卵泡机械分离体外分离
- 绦虫催乳素基因cDNA克隆及序列分析被引量：8
- 2002年
- 根据文献报道的脊椎动物催乳素基因 c DNA序列的保守区 ,设计 1对引物。提取绦虫总 RNA,采用 RT- PCR扩增绦虫催乳素基因 ,琼脂糖凝胶电泳分析 PCR产物 ,将回收产物连接到 p MD- 18T克隆载体 ,对待选克隆进行 PCR和酶切鉴定。阳性克隆进行序列测定 ,获得全长 893bp的 c DNA序列 ,共编码 2 2 2个氨基酸 ,其中前 2 2个氨基酸为信号肽 ,成熟蛋白共编码 2 0 0个氨基酸。将测序结果与 Gen Bank中已知序列比较 ,推导氨基酸序列并进行活性位点分析 ,所得序列与脊椎动物催乳素同源性最高 ,含有催乳素的 2个活性区域 ,证明所得到的序列就是催乳素序列。
- 陈泽良刘波刘明远欧阳红生安铁洙
- 关键词：绦虫催乳素基因克隆CDNA
- 带有绿色荧光蛋白外源DNA转染绵羊成纤维细胞的研究被引量：2
- 2009年
- 为了优化建立转染绵羊成纤维细胞系的外源基因转染体系,本研究利用带有绿色荧光蛋白（GFP）的外源基因,采用阳离子脂质体法,探讨了DNA用量、脂质体用量和转染时间等因素对转染绵羊成纤维细胞的影响。结果表明,在500μL转染培养基中成纤维细胞达到85%汇合时,添加由50μL DMEM中含有0.2μg DNA和50μL DMEM中含有2.0μL Lipo-fectamineTM2000的两种溶液混合构成的转染液并转染12 h,可获得最高的转染效率。当转染12 h后,用基础培养液培养至第24小时,细胞核周区出现强绿色荧光,而当转染后48～64 h观察时,细胞核周区的荧光强度明显弱,而远离核周区的胞质中的荧光强度增加。
- 安星兰王子竹张志崇曲丽威王春生朴善花安铁洙
- 关键词：质粒DNA转染脂质体法
- 小鼠MyoD基因真核表达载体的构建与检测被引量：1
- 2015年
- 为了最终建立诱导小鼠iP S细胞为成肌细胞的方法,试验在克隆小鼠Myo D基因的基础上,将其与pc DNA3.1载体连接,以构建真核表达载体;采用脂质体法将重组质粒转染到小鼠胚胎成纤维细胞中,利用Real-time PCR技术、免疫荧光检测和流式分析等技术对转染前后细胞的Myo D基因表达情况进行检测。结果表明:成功克隆获得Myo D基因,并构建真核表达载体Myo D-pc DNA3.1;转染Myo D-pc DNA3.1的小鼠胚胎成纤维细胞经免疫荧光检测后在荧光显微镜下呈现表达Myo D基因的红色;Real-time PCR检测其Myo D基因相对表达量提高至8.926±0.010;经BD Accuri-C6个人型流式细胞仪检测,约有93%的转染细胞表达Myo D蛋白,在荧光倒置显微镜下可观察到表达Myo D蛋白而呈现的绿色荧光。说明已成功构建特异表达Myo D基因的真核表达载体Myo D-pc DNA3.1。
- 马丽媛王春生杜文敬朴善花安铁洙
- 关键词：小鼠成肌细胞转染成纤维细胞表达量
- 逆转录病毒载体的研究进展被引量：3
- 2010年
- 基因传递技术被广泛应用于基因治疗、基因改造等领域,其中逆转录病毒载体由于其遗传的稳定性、转染的高效性而得到迅速地发展。作为传递基因的工具,打靶到特定组织和细胞的能力、效率、目的基因的表达情况及生物安全性问题都值得深入探讨。文章从逆转录病毒的分类和基因结构、载体的发展历程、构建特点等几方面进行了阐述。
- 梁洋杜文敬苏畅安铁洙
- 关键词：逆转录病毒基因传递
- 小鼠体外受精及胚胎发育的影响因素被引量：8
- 2002年
- 为了完善小鼠体外受精和胚胎的体外培养系统 ,以 M16为基础培养液 ,探讨了葡萄糖、磷酸盐、EDTA、谷氨酰胺及β-巯基乙醇等对小鼠体外受精和胚胎体外培养的影响。结果表明 ,在 M16液中添加 EDTA和 L -谷氨酰胺(m M16液 ) ,小鼠的体外受精率由 2 6 %提高到 5 1%;当在 m M16液中去掉磷酸盐 ,或添加 Hepes,或添加 β-巯基乙醇 ,体外受精率由 5 1%增至 6 2 %～ 74%;m M16液中添加 Hepes,或去掉磷酸盐 ,可阻碍胚胎的体外发育 ,囊胚的扩张率由 80 %降至 49%和 5 8%,而在无糖 m M16液中添加 β-巯基乙醇 ,可显著地提高扩张囊胚率 (91%)。以上结果表明 ,M16液中添加 EDTA、谷氨酰胺和 β-巯基乙醇后 ,适用于小鼠体外受精 ;同时去掉葡萄糖后 ,则适用于 2细胞胚的体外培养。
- 安铁洙谭建华岳占碰高丰姜玉富
- 关键词：小鼠体外受精胚胎发育影响因素
