左皓
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：清华大学医学院生物医学工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 神经干细胞体外增殖分化的钙成像研究被引量：3
- 2006年
- 神经干细胞具有广阔的应用前景,但对于其增殖和分化的内源机制、外部环境信号还并不十分了解。研究表明,钙信号很可能在其中起到了调控作用。利用钙离子成像技术,观察神经干细胞的单细胞体外增殖和分化过程,记录了在细胞分裂过程中钙信号变化的曲线。发现细胞增殖和分化过程中都会产生钙浓度的变化,但在细胞分裂后期两者钙信号的模式却存在差别。实验结果提示,胞内钙水平的波动只是细胞增殖的伴随产物,但却是细胞分化的必要条件。由此提出钙信号对神经干细胞分化调控机制的假设,并指出其对今后研究的意义。
- 刘一夫左皓周畅文梅梅谢佐平
- 关键词：神经干细胞钙信号
- 人BDNF的克隆、表达及其活性检测被引量：1
- 2004年
- 为了研究脑源性神经营养因子在大肠杆菌中的表达及其在治疗Parkinson病中的作用,采用RT-PCR技术,从人胚脑组织扩增及克隆了BDNF全长及其成熟蛋白编码基因,经测序证实后,将其分别克隆至表达载体pcDNA3.1与pGEX6p-1,构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-BDNF和重组原核表达载体pGEX6p-BDNFs。pcDNA3.1-BDNF经脂质体介导转染至体外培养的E16胚鼠中脑星形胶质细胞,以G418筛选出抗性阳性克隆,该克隆株与E12-E14胚鼠中脑神经干细胞体外共培养,酪氨酸羟化酶免疫细胞化学反应显示,转染细胞株所表达的BDNF蛋白具有生物学活性,可延长前体细胞的存活并促进其向多巴肢神经元分化。将pGEX6p-BDNFs转化大肠杆菌,以IPTG诱导,获得了相对分子质量约为40 kD的GST-BDNF融合蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的10％,并经免疫印迹证实具有特异的免疫反应性。
- 左皓谢佐平孙朝晖李鹏赖燕来
- 关键词：脑源性神经营养因子星形胶质细胞多巴胺神经元克隆
