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基因治疗中若干关键问题的基础研究: 钱关祥戴冰冰卢健李锋应磊张萍梅文瀚徐荣婷胡亮王克敏; 该项目是针对基因治疗中存在的一些关键问题的基础研究工作，从目的基因的克隆，基因表达的靶向性以及基因表达水平的提高多个方面进行了研究。主要用于基因治疗中进一步的基础以及临床研究工作。主要是：用于提高肿瘤基因治疗中的目的基因...; 关键词：; 关键词：基因治疗靶向表达

含受缺氧调控的人工转录因子的载体系统，其构建及应用: 本发明公开了一种受缺氧调控的人工转录因子，由GAL4 DNA结合结构域与HIF1α转录激活结构域融合而成。本发明还公开了含上述转录因子的载体系统，该系统由两个载体组成：含受缺氧调控的人工转录因子的载体以及含G5TATA启...; 应磊钱关祥卢健戴冰冰李锋; 文献传递

双腺病毒介导的Trail基因治疗肿瘤的体外实验研究: 肿瘤的基因治疗有两个关键问题有待解决。一是靶向性,二是高效性。在我们的实验中,首先,我们选择了肿瘤坏子因子相关的凋亡诱导配体Trail作为治疗分子。Trail蛋白能选择性地诱导恶性转化的肿瘤细胞发生凋亡,而对正常细胞没有...; 张萍应磊卢健钱关祥; 文献传递

GAL4/VP16融合人工转录因子的活性研究: 2013年; 目的构建含有融合转录因子GAL4/VP16的表达载体和含有上游激活序列(UAS)启动子驱动报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达载体组成的GAL4/VP16-UAS系统,观察融合转录因子GAL4/VP16的活性。方法构建含有融合转录因子GAL4/VP16的表达载体pcDNA3-GAL4/VP16,含有5个拷贝UAS串联排列序列和腺病毒E1b基因核心启动子的人工杂合启动子驱动报告基因EGFP的表达载体pGL3-G5E1b-TATA-EGFP,利用脂质体将两种载体瞬时转染Hep3B和HEK293细胞,48 h后采用RT-PCR和流式细胞术检测EGFP的表达,观察GAL4/VP16融合转录因子对G5E1B-TATA的转录调节作用。结果在GAL4/VP16融合转录因子存在的情况下,G5E1b-TATA启动子活性明显上调,甚至可以达到巨细胞病毒(CMV)启动子的活性程度。结论 GAL4/VP16融合转录因子具有上调G5E1B-TATA启动子转录活性的作用,并且该转录活性足以达到驱动下游目的基因高效表达的水平,在基因治疗和基因功能的研究中具有一定的应用潜力。; 张萍应磊钱关祥徐让; 关键词：GAIA 人工转录因子增强型绿色荧光蛋白

新型受缺氧调控的腺病毒载体的构建及应用: 恶性肿瘤是人类死亡的主要原因之一,手术、放疗和化疗等传统的治疗方法对肿瘤治疗的效果并不理想.近年来的研究表明恶性肿瘤的发生和发展与多个基因的表达异常有关,因此,恶性肿瘤从本质上讲是一种基因病.基因治疗可纠正肿瘤的基因表达...; 应磊; 关键词：腺病毒肿瘤人端粒酶逆转录酶启动子缺氧诱导因子-1Α; 文献传递

肠外营养与淤胆鼠肝细胞白蛋白合成分子调控的关系: 目的:观察不同配方的TPN对阻塞性黄疸大鼠肝功能的影响;消化脏器的形态学影响;白蛋白(ALB)和D-位点合成蛋白(DBP)的转录的意义.材料与方法:Sprague-Dawley大鼠126只,随机分成14组,每组9只,给予...; 应磊; 关键词：肠外营养阻塞性黄疸白蛋白分子调控; 文献传递

受缺氧反应元件调控的荧光素酶报告基因在缺氧肿瘤细胞内的表达活性研究: 2007年; 目的研究缺氧反应元件调控的荧光素酶报告基因在肿瘤细胞内的缺氧反应性。方法将pGL3—6HRE—TATA—luciferase—SV40pa报告载体以Lipofectamine2000介导瞬时转染Helas3和HepG2细胞，分别于缺氧（1％O2）和常氧（21％O2）培养后检测相对荧光素酶活性。结果pGL3—6HRE—TATA—luciferase—SV40pa报告载体转染细胞后，缺氧培养条件下相对荧光素酶的活性较常氧培养条件下显著上调，差异具有统计学意义（P〈0．01），并且该缺氧诱导性具有一定的时间依赖性，即Helas3细胞中，缺氧培养12—24h，相对荧光素酶的活性上升到了最高值；而HepG2细胞中，缺氧培养36h，相对荧光素酶的活性上升到了最高值。结论6HRE人工启动子在肿瘤细胞内具有显著的缺氧诱导性；6HRE人工启动子缺氧诱导性具有一定的时间效应，并且在不同肿瘤细胞中其诱导效应和时间效应可存在着差异。研究结果为实体肿瘤基因治疗奠定了理论和实验基础。; 沈晓娣张萍应磊葛盛芳钱关祥; 关键词：肿瘤反应元件细胞低氧

含受缺氧调控的人工转录因子的载体系统,其构建及应用: 本发明公开了一种受缺氧调控的人工转录因子，由GAL4 DNA结合结构域与HIF1α转录激活结构域融合而成。本发明还公开了含上述转录因子的载体系统，该系统由两个载体组成：含受缺氧调控的人工转录因子的载体以及含G5TATA启...; 应磊钱关祥卢健戴冰冰李锋; 文献传递

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应磊