- 重组人类酸性成纤维细胞生长因子联合自体骨骼肌卫星细胞心肌移植
- 目的：评价骨骼肌卫星细胞心肌移植各阶段实验方法，初步探讨重组人类酸性成纤维细胞生长因子(recombination human acid fibroblast growth factor，rhaFGF)联合自体骨骼肌卫星...
- 庞新利
- 关键词：自体骨骼肌卫星细胞心肌移植急性心肌梗死
- 文献传递
- 小剂量阿司匹林对动脉粥样硬化兔主动脉MMP-2表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的评估小剂量阿司匹林对动脉粥样硬化兔主动脉基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达及动脉硬化严重程度的影响。方法 24只雄性新西兰兔随机分为对照组(喂食普通兔料)、模型组(喂食高脂饲料)、阿司匹林组(喂食高脂饲料并给予小剂量阿司匹林干预),每组8只。饲养12周后处死动物,取主动脉进行病理学检查,分别应用RT-PCR和Western-bolt分析主动脉病灶中MMP-2 mRNA和蛋白的表达。结果病理学大体观察发现,对照组无动脉粥样硬化斑块形成,模型组和阿司匹林组主动脉斑块最大厚度、平均斑块厚度、管腔狭窄度和斑块所占周径比值等4项指标两两比较均有显著性差异(P<0.01)。对照组中MMP-2蛋白和mRNA呈低水平表达,而在模型组中的表达均明显增高,阿司匹林组MMP-2蛋白和mRNA的表达降低(P均<0.01)。结论 MMP-2在正常血管组织中低水平表达,随血管动脉粥样硬化程度的加重而升高;小剂量阿司匹林可以有效地减少动脉粥样硬化兔主动脉MMP-2表达,减轻动脉硬化的严重程度。
- 姜昕郭毅左彦方左彦方刘华东李方明
- 关键词：阿司匹林动脉粥样硬化基质金属蛋白酶-2新西兰兔
- 青年急性心肌梗死患者CD4^+IFN-γ^+细胞及血清Lp-PLA2水平研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨青年急性心肌梗死患者干扰素-γ(IFN-γ)在辅助型T淋巴细胞(Th细胞/CD4+细胞)中的比例、血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平及其临床意义。方法初发急性心肌梗死青年患者56例(A组),健康青年对照组30例(B组),流式细胞术(method of flow cytometry,FCM)检测CD4+IFN-γ+双阳性细胞比例,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清Lp-PLA2浓度。结果 A组患者CD4+IFN-γ+双阳性细胞比例及血清Lp-PLA2浓度均显著高于B组(P<0.01)。结论 IFN-γ在Th细胞中的比例及血清Lp-PLA2的浓度对青年急性心肌梗死的发生具有预示价值,从炎症及免疫途径为青年急性心肌梗死发病机制提供新思路。
- 庞新利庞新利董少红梁新剑董少红麦爱欢
- 关键词：青年脂蛋白相关磷脂酶A2干扰素-Γ
- ACS患者脂蛋白相关磷脂酶A_2及CD4^+干扰素-γ阳性细胞与TIMI血流的关系被引量：2
- 2010年
- 目的探讨急性冠状动脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)患者脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)、CD4+干扰素γ+(interferon-γ,IFN-γ+)细胞表达与经皮冠状动脉介入(percutaneous coronary intervention,PCI)治疗中心肌梗死溶栓(thrombolysis in myocardial infarction,TIMI)血流的关系。方法选择接受PCI治疗的ACS患者993例为研究对象。所有患者经冠状动脉造影确诊及行PCI治疗,根据TIMI血流0～Ⅲ级分为A、B、C、D共4个亚组;同期选择非冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)体检者580名为对照组。患者发病后24h内采用流式细胞仪检测CD4+IFN-γ+双阳性细胞比例,酶联免疫吸附法检测血清Lp-PLA2浓度。多元回归法分析TIMI血流与血清Lp-PLA2浓度、CD4+IFN-γ+双阳性细胞的比例的关系。结果 ACS患者起病24h内的血清Lp-PLA2浓度、CD4+IFN-γ+比例显著高于对照组比较,差异有统计学意义[(328.2±8.2)μg/L vs.(100.6±11.3)μg/L,P<0.05;32.6%±5.8%vs.8.8%±3.2%,P<0.05]。方差分析显示,A、B、C、D4个亚组PCI治疗后血清Lp-PLA2浓度、CD4+IFN-γ+双阳性细胞的比例比较,差异有统计学意义(P<0.05),且A、B组高于C、D组,差异有统计学意义(P<0.05)。多元回归分析显示,TIMI血流与血清Lp-PLA2浓度、CD4+IFN-γ+双阳性细胞的比例呈正相关(r=-0.693,P<0.05;r=-0.584,P<0.05)。结论检测血清Lp-PLA2浓度、CD4+IFN-γ+细胞比例对斑块的不稳定性评价及预测PCI治疗中的无再流或慢血流现象有重要意义。
- 高虹庞新利陈纪言董少红梁新剑吴美善
- 关键词：干扰素Γ
- 臂一踝脉搏波速度检测在动脉粥样硬化早期诊断中的价值被引量：5
- 2011年
- 目的通过检测臂一踝脉搏波速度（Brachial-ankle Pulse Wave Velocity，BaPWV）不同程度升高的体检人群血小板活化分子表达水平，评价BaPWV在动脉粥样硬化早期诊断中的价值。方法研究对象为2008年某单位年龄≥40岁且〈60岁无症状中年体检人群，共426例，排除动脉粥样硬化相关疾病。应用动脉硬化早期测定仪检测其BaPWV值，根据检测结果分为BaPWV轻、中、重度升高组，以BaPWV正常组为对照组，利用流式细胞术（method of flowcytometry，FCM）检测4组人群外周血小板膜糖蛋白CD62p、CD63、CD41、CD61的表达情况。结果BaPWV中、重度升高组CD62p、CD63表达显著高于正常组（P〈0．01）。结论BaPWV中重度升高而临床无症状人群已经存在血小板活化，提示BaPWV中重度升高可作为动脉粥样硬化的早期诊断指标。
- 庞新利陈科奇麦爱欢董少红
- Chn1基因缺陷性小鼠血管平滑肌细胞株的构建和鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的通过慢病毒介导的RNA干扰技术,构建趋化素基因Chn1的小分子干扰RNA慢病毒表达载体,建立Chn1基因缺陷性小鼠血管平滑肌细胞株,为下一步采用该细胞株研究趋化素与冠状动脉介入治疗后再狭窄的关系奠定实验基础。方法以小鼠Chn1基因mRNA序列作为干扰靶点,设计3组靶向Chn1的shRNA序列,构建慢病毒载体,并筛选出干扰最佳的shRNA,在293T细胞对慢病毒进行包装和滴度测定。体外培养小鼠血管平滑肌细胞,转染慢病毒形成Chn1基因缺陷性血管平滑肌细胞株,用实时定量荧光(real time)PCR检测感染慢病毒后细胞中Chn1 mRNA水平。结果基因测序结果表明慢病毒载体构建成功,慢病毒的滴度约为7.4×106TU/m L。3个p LVX-shRNA均能下调Chn1 mRNA,其中p LVX-shRNA3的沉默效果最明显(P<0.01)。将干扰效果最佳的慢病毒载体p LVX-shRNA3包装慢病毒并转染至血管平滑肌细胞中形成基因缺陷细胞株,用real time PCR血管平滑肌细胞中Chn1 mRNA水平,该细胞株中Chn1 mRNA水平显著下降(P<0.01)。结论慢病毒介导的siRNA可有效沉默血管平滑肌细胞中Chn1基因的表达。
- 熊玮董少红张键李江华吴美善廖碧红庞新利罗林杰
- 关键词：血管平滑肌细胞趋化素RNA干扰慢病毒
- 电穿孔转染酸性成纤维细胞生长因子基因对骨骼肌卫星细胞的影响被引量：1
- 2015年
- 背景:课题组早期研究表明体外一定剂量酸性成纤维细胞生长因子对骨骼肌卫星细胞增殖有促进作用。目的:进一步验证电穿孔转染酸性成纤维细胞生长因子基因对骨骼肌卫星细胞生长、增殖及分化的影响。方法:原代培养、纯化骨骼肌卫星细胞,将带有酸性成纤维细胞生长因子基因的质粒p Sectag-GFP-a FGF通过电转染的方法转染大鼠骨骼肌卫星细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况并计算转染率,以流式细胞仪分析转染后细胞周期,绘制细胞生长曲线,观察转染后肌管形成情况,Western Bloting检测酸性成纤维细胞生长因子基因的表达。结果与结论:1免疫细胞化学检测:骨骼肌肌动蛋白呈阳性表达。2转染效率:p Sectag-a FGF质粒电转染12 h后即可看见散在发绿色荧光的卫星细胞,72-96 h达高峰,阳性表达率约90%。3细胞周期检测:电转染后S期所占的百分比明显多于未转染对照组(P<0.05)。4细胞生长曲线检测:电转染细胞接种后第3天进入对数生长期,第5天后开始减少。5分化能力观察:电转染组肌管较未转染对照组明显减少,老化细胞较少。6Western-blot:酸性成纤维细胞生长因子基因在转染骨骼肌卫星细胞中表达。结果表明,通过电穿孔法可以将酸性成纤维细胞生长因子基因转染进骨骼肌卫星细胞并获得高效持久的表达,并有促进骨骼肌卫星细胞增殖及抑制分化为肌管的作用。
- 李江华董少红熊玮庞新利刘启云李文君
- 关键词：基因转染绿色荧光蛋白骨骼肌卫星细胞电穿孔原代培养
- H_2O_2诱导骨骼肌卫星细胞凋亡及法舒地尔的保护作用
- 2015年
- 背景:骨骼肌卫星细胞是成体骨骼肌中位于肌细胞膜和基膜之间具有增殖分化潜能的肌源性干细胞,研究表明骨骼肌卫星细胞的有效性及安全性,但是移植后的干细胞成活率极低,极大的限制了骨骼肌卫星细胞的应用。目的:观察过氧化氢(H2O2)对大鼠骨骼肌卫星细胞凋亡的影响以及法舒地尔的保护作用。方法:取体外培养的骨骼肌卫星细胞,随机分为正常对照组,H2O2组,H2O2+法舒地尔组(法舒地尔组),采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法检测白细胞介素4、肿瘤坏死因子a的浓度,Western blot检测Bax蛋白的表达。结果与结论:同H2O2组相比,法舒地尔组凋亡发生率明显下降(P<0.05),Bax蛋白水平表达明显降低(P<0.05),白细胞介素4、肿瘤坏死因子a的分泌显著减少(P<0.05)。结果提示,法舒地尔抑制Rho激酶信号途径发挥抗凋亡保护作用,其机制可能与减少Bax蛋白的表达有关。
- 李江华董少红熊玮刘启云梁新剑庞新利
- 关键词：过氧化氢骨骼肌卫星细胞凋亡法舒地尔
- 罗格列酮对大鼠颈动脉球囊损伤后白细胞介素-2、10、17A mRNA表达的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:观察大鼠颈动脉损伤后炎症因子的变化及应用罗格列酮干预后对其表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为对照组、球囊损伤组、罗格列酮组,每组12只。对照组0.9%氯化钠溶液灌胃4d后假手术,术后0.9%氯化钠溶液灌胃13d;球囊损伤组0.9%氯化钠溶液灌胃4d后行左侧颈总动脉球囊损伤,术后0.9%氯化钠溶液灌胃13d;罗格列酮组用罗格列酮灌胃4d后行球囊损伤,术后罗格列酮灌胃13d。3组术后14d取左侧颈总动脉应用Realtime RT-PCR检测损伤血管组织中白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-10、IL-17A水平,应用Western Blot检测核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)水平。损伤血管行苏木精-伊红染色,观察内膜变化。结果:①罗格列酮组IL-2、IL-17A表达水平低于球囊损伤组但高于对照组(P<0.05)。罗格列酮组IL-10表达高于球囊损伤组和对照组(P<0.05)。②罗格列酮组NF-κB水平低于球囊损伤组但高于对照组(P<0.05)。③罗格列酮组内膜面积及内膜面积/中膜面积较球囊损伤组减小但高于对照组(P<0.05)。结论:罗格列酮通过NF-κB调节IL-2、IL-10及IL-17AmRNA表达,调节炎症因子的平衡,抑制损伤血管的炎症反应,减轻损伤血管的狭窄。
- 董少红罗特丹刘华东姜昕梁新剑庞新利
- 关键词：罗格列酮颈动脉球囊损伤血管内膜
- 踝臂血压指数与血小板活化的关系
- 2010年
- 目的探讨无创踝臂血压指数(ankle/brachial index,ABI)与血小板活化之间的关系。方法选择2008年某单位年龄≥40岁且<60岁无症状中年体检人群共426例为研究对象。应用动脉硬化早期测定仪检测其ABI值,其中ABI<0.9为异常组,0.9≤ABI≤1.3为正常对照组,利用流式细胞术检测两组外周血小板膜糖蛋白CD62p、CD63的表达水平。结果异常组CD62p、CD63表达水平显著高于正常组,差异有统计学意义(16.86±3.20vs.6.65±3.25,P<0.05;6.82±1.74vs.1.90±0.67,P<0.05)。结论 ABI<0.9时血小板活化程度显著增高,在初筛动脉功能异常、心脑血管病情评估及长期随访监测中具有实用价值。
- 庞新利庞新利高虹董少红李江华
- 关键词：踝臂血压指数血小板活化CD62PCD63
