张宇耕
- 作品数：7 被引量：19H指数：1
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省杰出人才创新基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 传染性法氏囊病病毒河南分离株(HN04)A片段cDNA的克隆及序列分析
- 2012年
- 利用RT-PCR技术,以传染性法氏囊病毒河南分离株(HN04)基因组RNA为模板,扩增并克隆IBDV HN04株基因组A片段cDNA。测序结果表明:克隆的A片段全长3260个核苷酸,包括2个部分重叠的开放阅读框(ORFl和ORF2)及两端的非编码区。ORFl和ORF2分别编码含有1012个氨基酸的结构蛋白(VP2-4-3)及含有145个氨基酸的VP5。IBDV HN04株基因组A片段核苷酸序列与来自GenBank IBDV血清Ⅰ型毒株核苷酸序列的同源性高达94.9%～99.4%,血清Ⅱ型毒株核苷酸序列同源性为83.8%。对IBDV HN04株的A片段核苷酸及其推导氨基酸进行序列分析,结果显示HN04株与国内外IBDV数株弱毒株的同源性在99.0%以上。
- 张宇耕卢佳崔保安李新生王子馨陈礼朋
- 关键词：IBDV克隆
- 2010—2011年河南省部分地区H9亚型禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎的流行病学调查被引量：18
- 2012年
- 为了解河南省H9亚型禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎的流行情况。从河南省15个地市发病鸡场采集病鸡组织样品309份,采用鸡胚尿囊腔传代接种法分离病毒,并利用血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HI)和RT-PCR试验对分离毒株进行鉴定。结果表明:3类病毒的总检出率为26.54%,其中NDV、IBV和AIV(H9)的检出率分别为11.00%、3.88%和11.65%。2010年10月NDV和IBV检出率均最高,分别为30.00%、15.00%,2011年1月AIV(H9)检出率最高,为43.24%。2类病毒混合感染的检出率达3.24%。表明2010年7月—2011年4月H9亚型禽流感、新城疫以及鸡传染性支气管炎在河南省部分地区普遍流行,且存在一定程度的混合感染。为有效预防和控制河南省3种主要疫病提供了科学依据。
- 岳旭龙陈礼朋李双亮高文明张宇耕崔保安李新生
- 关键词：流行病学调查H9亚型禽流感新城疫鸡传染性支气管炎
- 猪细环病毒和猪圆环病毒2型混合感染的检测被引量：1
- 2012年
- 为诊断中牟某猪场送检病料的感染类型,调查了其流行病学、临床症状和病理剖检特征,并采用PCR检测技术对其进行检测。结果表明,该猪场存在猪细环病毒与猪圆环病毒2型的混合感染。
- 王子馨李坤崔保安王淑娟陈红英张宇耕
- 关键词：猪圆环病毒2型
- 传染性法氏囊病病毒 PY05 株的分离鉴定
- 2012年
- 为了分离到鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)病毒,从河南省濮阳地区某疑似感染鸡法氏囊病病毒的鸡场采集病料,用SPF鸡胚对病毒进行分离培养,通过琼脂扩散试验和RT-PCR扩增VP4片段对其进行鉴定。结果显示该毒株能引起鸡胚规律性死亡,且出现CAM增厚、鸡胚出血等明显病变;待检抗原、标准阳性血清之间出现阳性沉淀线;琼脂电泳得到大小约为1200bp片段,与预期结果相符。结果证明该分离株为IBDV地方株,并命名为PY05株。
- 卢佳张宇耕崔保安李新生刘媛媛陈礼鹏岳旭龙王俊亚
- 2010-2011年河南省部分地区H9亚型禽流感、新城疫和鸡传染性支气管炎的流行病学调查
- 河南省15个地市发病鸡场病鸡组织309份,应用鸡胚法进行病毒的分离,并通过血凝(HA)试验、血凝抑制(HI)试验和RT-PCR试验对分离毒株进行鉴定.结果分离得到H9亚型禽流感病毒36株,新城疫病毒34株,鸡传染性支气管...
- 岳旭龙陈礼朋李双亮高文明张宇耕崔保安李新生
- 关键词：H9亚型禽流感新城疫病毒鸡传染性支气管炎流行病学
- 新城疫病毒HN09-69株P基因的克隆、序列分析及表达
- 2012年
- 【目的】对新城疫病毒(NDV)HN09-69株P基因进行克隆、序列分析和表达鉴定,为研究P和V蛋白的功能,及NDV新流行毒株的免疫预防提供理论依据。【方法】以HN09-69株NDV为研究对象,根据GenBank上发布的相关P基因参考序列设计引物,进行RT-PCR扩增、克隆和序列测定分析,将P基因的核苷酸序列与相关参考株的P基因序列进行比对分析并构建进化树。将P基因克隆到原核表达载体PET28a(+)中,得到重组质粒rPET28a(+)-P,将重组表达质粒转化到BL21(DE3)中诱导表达,用SDS-PAGE电泳和Western blotting检测表达情况。【结果】扩增出了HN09-69株P基因的ORF,序列长度为1 188bp。NDV HN09-69株核苷酸与弱毒株La Sota、clone-30同源性分别为82.5%和82.4%,与强毒株F48E8同源性为84.9%,与鸭源,鹅源NDV核苷酸同源性分别为97.9%～98.4%和96.0%～98.0%。SDS-PAGE电泳和Western blotting检测结果表明,重组P蛋白分子质量约为54ku,符合预期结果,在大肠杆菌中主要以可溶性的形式表达。【结论】NDV HN09-69株与SDWF-02和SD-09鸭源强毒分离株同源性高,亲缘关系近。重组P蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。
- 陈礼朋王忠田岳旭龙王泽仁高文明李双亮张宇耕崔保安李新生
- 关键词：新城疫病毒P基因SDS-PAGEWESTERNBLOTTING
- 河南省部分地区传染性法氏囊病病毒分离株的分子流行病学研究
- 传染性法氏囊病(Infectiousbursaldisease，IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectiousbursaldiseasevirus，IBDV)引起的急性接触性传染病，该病毒IBDV主要侵害雏鸡的中枢...
- 张宇耕
- 关键词：传染性法氏囊炎VP2基因系统进化树分子流行病学
- 文献传递
