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宽宿主谱噬菌体的人工改造技术的研究: 本发明公开了一种人工改造噬菌体拓宽其宿主谱的方法，属于食品安全检测领域，是生物技术在食品安全检测方面的探索性应用。方法包括野生烈性噬菌体的筛选、较宽裂解谱的烈性噬菌体的筛选K1、噬菌体基因组的人工改造、将敲除后的基因组通...; 潘风光吴涵赵娅娅李洪山方珍秦亚楠庞勇邢贺钦郭娜张鸣镝; 文献传递

一种利用凝胶分子筛去除猪凝血酶中内毒素的方法: 本发明公开了一种利用凝胶分子筛去除猪凝血酶中内毒素的方法方法，属于农副产品深加工领域。方法包括离心分离、柱层析、酶的激活和分子筛分离去除内毒素。优点是分离效果好，凝血酶的活性高，凝血酶中热源物质和内毒素少，临床使用安全性...; 潘风光方珍于挺敏姚刚吴涵王楠; 文献传递

微波辅助酶解制备猪血活性肽的方法: 本发明公开了一种微波辅助酶解制备猪血活性肽的方法，属于畜禽副产品精深加工及综合利用领域。方法包括猪血抗凝，离心分离，超声波破壁，微波辅助酶解，二次酶解，灭酶，膜过滤，喷雾干燥。产品可作为各种食品原料或添加剂。与传统方法相...; 潘风光李洪山刘静波赵娅娅吴涵秦亚楠方珍; 文献传递

超声预处理微波辅助酶解生产猪血活性肽工艺优化被引量：7: 2011年; 为了充分挖掘畜禽血液蛋白质资源及开发具有保健功能的血液深加工生物制品,以猪血细胞为原料,在超声波破碎细胞后,利用微波辅助技术,对Alcalase内切酶酶解猪血红蛋白的工艺条件进行了优化。结果表明:当水与血细胞体积比为5:1,超声波功率为300 W时,超声处理25 min后,在功率为500 W的微波中进行酶解,得出最佳酶解条件为:Alcalase内切酶加酶量体积比6.77%,酶解温度54℃,酶解时间11 min,得到血红蛋白的水解度为23.63%,酶解产物大部分为相对分子质量在635.7～1151.1 Da的短肽。该文提供了一种快速提取猪血活性肽的试验方法,在实际生产中具有较好的应用价值。; 潘风光李洪山刘静波赵娅娅秦亚楠方珍吴涵; 关键词：微波多肽水解度猪血

大肠杆菌O157:H7异硫氰酸荧光素标记抗体的制备及评价被引量：9: 2013年; 目的:制备高效价、高纯度、特异性好、荧光强度高及稳定的抗大肠杆菌O157∶H7异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体,初步探讨其在大肠杆菌荧光免疫检测试验中的应用。方法:复苏培养E.coli O157∶H7标准菌株,甲醛灭活制备疫苗免疫家兔。4次免疫后,颈动脉采血分离血清,经辛酸-饱和硫酸铵法粗提后应用蛋白亲和层析柱HiTrap Protein G HP进行IgG纯化,借助SDS-PAGE电泳、BCA试剂盒法、间接ELISA法分别对蛋白纯度、蛋白含量及抗体效价进行测定。应用不同FITC与蛋白量比值以及不同标记反应条件对多克隆抗体进行标记。比较荧光抗体F485/535,结合差异性显著分析对FITC与蛋白量比值及反应条件进行合理选择,应用标记抗体与E.coli O157∶H7和金黄色葡萄球菌混合菌液反应验证标记效果。结果:HiTrap Protein G进行E.coli O157∶H7多克隆抗体纯化的最佳纯化方法为35%、100%二梯度洗脱,制备抗体效价为1∶25 600,与沙门氏菌、阴沟肠杆菌等8种肠杆菌无交叉反应,最佳FITC与蛋白量比值为1∶10,最佳标记反应条件为20℃、2h。由最佳条件制得的荧光抗体与E.coli O157∶H7反应明显,强荧光连续照射15min后仍显示高亮度荧光反应,且不与金黄色葡萄球菌反应。结论:本实验首次制备出纯度高、荧光强度高、持续时间长的E.coliO157:H7FITC标记多克隆抗体,为E.coli O157:H7荧光免疫检测方法的建立完成了关键步骤。; 方珍鞠文秦亚楠孟日增潘风光; 关键词：多克隆抗体

单增李斯特菌多克隆抗体制备及其在乳胶凝集试验中的应用被引量：2: 2012年; 目的:制备高效价高纯度兔抗单增李斯特菌(LM)多克隆抗体,并初步探讨其在乳胶凝集试验(LAT)中的应用。方法:复苏并扩大培养LM标准菌株,制备灭活疫苗免疫家兔,采用ELISA法测定耳缘静脉血抗体效价。4次免疫后,颈动脉采血分离血清,采用辛酸-饱和硫酸铵法粗分离,经蛋白亲和层析柱HiTrap Protein GHP进行IgG纯化,采用SDS-PAGE电泳、紫外分光光度法、间接ELISA法分别测定蛋白纯度、蛋白含量及抗体效价。得到的高效价提纯IgG与乳胶微球进行共价偶联,并选择偶联乳胶的IgG含量及偶联时间等条件,建立快速检测模拟样品中LM的方法。结果:制备并纯化的兔抗LM IgG蛋白浓度为23.364g.L-1,效价为1∶12 800～1∶25 600,与霍乱弧菌、沙门氏菌、志贺菌等多种菌均无交叉反应,与斯氏李斯特菌有弱交叉反应;致敏时IgG与乳胶微球偶联比率为1∶40;利用LAT方法检测246份样品,阳性检出率为87.5%,最低检出抗原含量为0.039 8g.L-1。结论:制备了高效价、高纯度的兔抗LM多克隆抗体;建立的LAT方法特异性强,敏感性较高,重复性好,便于基层推广使用,为LM的现场检测提供了一种新手段。; 鞠文宋秀玲原野张士尧方珍徐坤李娟孟日增; 关键词：单增李斯特菌多克隆抗体乳胶凝集试验

应用液相蛋白芯片技术检测食源性大肠杆菌0157：H7的研究: 本研究建立了大肠杆菌O157:H7(E.coli O157:H7)液相蛋白芯片检测方法，初步探究了N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)作为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)的溶...; 方珍; 关键词：液相蛋白芯片大肠杆菌O157:H7 牛肉 DMAC; 文献传递

高能束辐照下铝中空位簇缺陷的形成与演化: 本文采用高纯铝薄膜作为实验样品,通过空间环境模拟装置产生的质子束流对其进行辐照,对质子束模拟辐照后材料内部形成的晶体缺陷尤其是空位簇缺陷进行观察和分析,探讨这些结构缺陷的形成与演化规律及其与材料变形行为之间的关系。1)质...; 方珍; 关键词：质子强流脉冲电子束微观结构; 文献传递

超声预处理微波辅助酶解生产猪血活性肽工艺优化: 为了充分挖掘畜禽血液蛋白质资源及开发具有保健功能的血液深加工生物制品,以猪血细胞为原料,在超声波破碎细胞后,利用微波辅助技术,对Alcalase内切酶酶解猪血红蛋白的工艺条件进行了优化。结果表明：当水与血细胞体积比为5∶...; 潘风光李洪山刘静波赵娅娅秦亚楠方珍吴涵; 关键词：超声预处理生物制品活性肽

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方珍

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