明付焕 作品数:5 被引量:25 H指数:3 供职机构: 中南林业科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中南林业科技大学青年科学基金 湖南省研究生科研创新项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
绵毛优若藜冷诱导SSH文库构建研究 被引量:8 2010年 绵毛优若藜是我国近年成功引种的高抗逆性饲用及防风固沙植物。以常温下的绵毛优若藜叶片和嫩枝为对照组,冷胁迫诱导处理后的叶片和嫩枝为试验组,获得两者高质量mRNA后反转录成cDNA,RsaI消化使其平末端化,试验组cDNA的5’末端连接上2个特异接头,然后分别与过量对照组cDNA进行杂交,把两份杂交样品混合后,与过量的新鲜变性的对照组cDNA过夜杂交,杂交后的混合液稀释后进行第一轮抑制性PCR以选择扩增特异表达的cDNA,然后以第一轮PCR产物为模板用巢式引物进行二次抑制性PCR,获得的富集差异表达cDNA即为绵毛优若藜冷胁迫SSH文库。将SSH文库的cDNA插入到载体中,共获得了362个克隆,为后续绵毛优若藜的抗冻基因克隆与转基因应用奠定了基础。 张党权 明付焕 江平 樊绍刚 杨自辉 邓顺阳关键词:绵毛优若藜 冷胁迫 抗冻基因 CDNA克隆 绵毛优若藜冷胁迫均一化全长cDNA文库的构建 被引量:4 2011年 以绵毛优若藜叶片和嫩茎为材料,对盆栽的绵毛优若藜小苗进行梯度低温胁迫处理后,采用SMART(switching mechanism at 5’end of RNA transcript)与DSN(duplex-specific nuclease)均一化相结合技术构建绵毛优若藜冷胁迫均一化全长cDNA文库。经测定,原始文库的库容量为1.4×10^6pfu。PCR检测结果显示:插入片段的长度在0.5~3kb之间,平均大于1kb,表明文库构建效果较好。该文库包含有大量的未知基因,有待进一步的发掘和研究。 明付焕 张党权 宋志丹 谷振军 祝全东 韩欣 郭林林关键词:绵毛优若藜 全长CDNA文库 冷胁迫 抗逆基因 黑麦草抗冻蛋白基因的cDNA克隆及序列分析 被引量:3 2010年 对多年生黑麦草进行冷胁迫处理后,提取叶片总RNA,采用RT-PCR法获得了LpAFP成熟蛋白的cDNA克隆。序列分析结果表明,该成熟蛋白的开放读码框(ORF)长度为357 bp,编码一条由118个氨基酸组成的多肽。生物信息学分析结果表明,黑麦草成熟抗冻蛋白与其他植物抗冻蛋白的同源性较低,与鱼类抗冻蛋白和昆虫抗冻蛋白则没有同源性。 邓顺阳 张党权 樊绍刚 谷振军 黄青云 明付焕 祝全东 郭林林关键词:黑麦草 抗冻蛋白 CDNA克隆 开放读码框 绵毛优若藜冷胁近均一化全长cDNA文库构建及EST分析 绵毛优若藜是原产美洲大陆的一种沙漠常绿灌木,是荒漠牧场冬季和春季的重要灌木饲草,近年来已在我国西北成功引种。绵毛优若藜的恶劣环境适应性极强,可在零下30℃、年降雨量为70—500mm、pH值为7.0—9.0的逆境中生长,... 明付焕关键词:绵毛优若藜 表达序列标签 功能基因 生物信息学 文献传递 抗冻蛋白和冰核蛋白对植物抗冻性能的作用机制 被引量:14 2009年 植物抗冻蛋白是避免植物寒害冻害发生的重要物质,相对而言,极地的鱼类和昆虫的抗冻蛋白具有低热滞活性和高重结晶抑制活性的特征。冰核活性蛋白是由冰核活性细菌、真菌或昆虫合成的生物冰核剂,降温初期可提高水溶液的冰核形成的温度,温度过低时可降低水的过冷却点。比较分析了抗冻蛋白和冰核蛋白的生物学特性、蛋白特征及其对水分子固液两相间变化的调控机制,这对于揭示植物抗冻性能的复杂的作用机制和植物抗冻基因工程应用的研究有着重要的意义。 樊绍刚 张党权 邓顺阳 明付焕关键词:抗冻蛋白 植物抗冻性