曹成
- 作品数:7 被引量:4H指数:2
- 供职机构:河南工业大学更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目河南省教育厅自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 山西省马铃薯Y病毒pl基因的克隆与序列分析
- 2009年
- 依据马铃薯Y病毒基因组序列,设计合成了1对引物,以从山西省获得的带毒马铃薯叶片总RNA为模板,通过RT-PCR扩增得到852 bp的基因片段并进行了序列测定。BLAST分析表明,该DNA序列与PVY N:O株系pl基因序列相似性最高可达99%。
- 吴兴泉刘晓磊陈士华曹成陈琼珍侯志鹏
- 关键词:马铃薯Y病毒
- 南芥菜花叶病毒RT-PCR扩增产物胶体金层析和酶联检测方法的建立被引量:1
- 2011年
- 南芥菜花叶病毒是我国进境植物检疫性有害生物,为建立快速灵敏的检疫检测方法,本研究用生物素标记一条引物,用荧光素(或地高辛)标记另一条引物,经RT-PCR扩增产生双标记的扩增产物,建立了PCR扩增产物的胶体金层析检测和ELISA检测方法。胶体金层析检测方法在15min即可获得检测结果,ELISA方法需20h,后者检测的灵敏度可比前者分别提高100倍和5000倍。所建立的2种方法都免去了普通PCR检测的溴化乙锭染色和电泳的过程。
- 曹成魏梅生张永江李桂芬吴兴泉
- 关键词:南芥菜花叶病毒胶体金试纸条核酸检测
- 双重胶体金层析法快速检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒RT-PCR扩增子被引量:2
- 2011年
- 番茄环斑病毒和烟草环斑病毒是中国进境检疫性有害生物,此研究建立了单个和双重胶体金层析快速检测方法,在15min即可获得对双标记PCR产物的检测结果。单个胶体金层析是在一张层析膜上点上荧光素(或地高辛)的单克隆抗体作为T检测点,经生物素-荧光素(或生物素-地高辛)双标记的RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到。双重胶体金层析是在一张层析膜上分别点上荧光素和地高辛的单克隆抗体作为T1和T2检测点,经生物素-荧光素和生物素-地高辛双标记的两种病毒的RT-PCR扩增产物可分别在T1和T2点上被检测到。
- 曹成魏梅生张永江李桂芬吴兴泉
- 关键词:番茄环斑病毒烟草环斑病毒RT-PCR胶体金
- 菜豆荚斑驳病毒RT-PCR扩增产物胶体金层析检测方法的建立
- 2010年
- 菜豆荚斑驳病毒是我国进境植物检疫性有害生物,为了能在现场快速检测出该病毒,将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金层析方法快速简便、直观的优点结合起来,建立了PCR扩增产物的胶体金层析检测方法。该方法是用生物素标记上一个引物,用荧光素(或地高辛)标记上另一个引物,通过PCR扩增产生双标记的扩增产物。将兔抗生物素多克隆抗体与20-30 nm大小的胶体金颗粒结合上并固定在释放垫上,同时在硝酸纤维素层析膜上点上抗荧光素(或地高辛)的单克隆抗体作为T检测点,点上羊抗兔多克隆抗体作为C质控点。这种RT-PCR扩增产物可在T点上被检测到,同时C点也要显色。用所建立方法在15 min内可检测出菜豆荚斑驳病毒的RT-PCR扩增产物,免去了溴化乙锭染色和电泳的过程。
- 曹成魏梅生吴兴泉张永江李桂芬
- 关键词:胶体金试纸条菜豆荚斑驳病毒RT-PCR核酸检测
- 胶体金核酸层析检测5种检疫性植物病毒的研究
- 随着经济全球化进程的加快,外来检疫性有害生物问题日益严重,直接威胁着我国的农业生产安全。建立快速、准确、灵敏的植物病毒检测方法,是有效防控检疫性植物病毒传入的重要手段,对于我国国家生物安全有着重要而深远的意义。本文选择我...
- 曹成
- 关键词:PCR胶体金试纸条PCR-ELISA
- 一种马铃薯块茎病毒的快速检测方法
- 一种马铃薯块茎病毒的快速检测方法,其特征在于:包括马铃薯块茎RNA的提取、RT-PCR反应和PCR产物的核酸胶体金层析试纸条检测等步骤。本发明是在优化马铃薯块茎病毒RNA提取方法的前提下,将RT-PCR技术与核酸胶体金免...
- 吴兴泉陈士华曹健时妍曹成伊艳杰杨庆东张晓婷张海燕张慧聪
- 文献传递
- 一种马铃薯块茎病毒的快速检测方法
- 一种马铃薯块茎病毒的快速检测方法,其特征在于:包括马铃薯块茎RNA的提取、RT-PCR反应和PCR产物的核酸胶体金层析试纸条检测等步骤。本发明是在优化马铃薯块茎病毒RNA提取方法的前提下,将RT-PCR技术与核酸胶体金免...
- 吴兴泉陈士华曹健时妍曹成伊艳杰杨庆东张晓婷张海燕张慧聪