朱萍
- 作品数：34 被引量：122H指数：6
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金南宁市科学研究与技术开发计划项目广西大学科研基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学文化科学更多>>
- RT-qPCR分析拷贝数及mRNA转录水平对表达左聚糖蔗糖酶的影响
- 2022年
- 采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术对重组毕赤酵母基因组中左聚糖蔗糖酶基因(SacB)的拷贝数及信使核糖核酸(mRNA)转录水平进行检测分析,并用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定菌株不同诱导时间下左聚糖蔗糖酶水解活力。结果表明,在BMMY液体培养基中经甲醇诱导24 h时,样品转录水平皆达到最大值,此时多拷贝菌株转录水平(2.13)为单拷贝菌株(0.42)的5.1倍;左聚糖蔗糖酶活力在甲醇诱导24 h后均随诱导时间不断上升,多拷贝菌株酶活(13.96 U/mL)较单拷贝菌株(5.48 U/mL)提高1.5倍。重组毕赤酵母整合的左聚糖蔗糖酶基因在1~3个拷贝范围内,随着拷贝数增加,多拷贝菌株较单拷贝菌株的mRNA转录水平及相应的蛋白表达量均显著增加(P<0.05),说明毕赤酵母是表达基因SacB的良好宿主。
- 陈硕昌仝秋平郭晓磊朱萍蒙健宗杨辉
- 关键词：毕赤酵母拷贝数转录水平
- 改革生物工程实验教学体系，培养学生工程素质被引量：11
- 2005年
- 生物工程技术人员的任务是实现生物技术的产业化，因此要求既要懂得上游技术和实验室技术，又要有丰富的工程素养。高等院校生物工程和生物技术专业作为培养生物高科技人才的摇篮，在实验教学改革方面，通过转变实验教学观念，改革实验教学内容和方法，建立以综合设计性实验为主体的多层次的生物工程实验教学体系，可培养具有工程素质的生物高科技人才。
- 粟桂娇杨洋阎欲晓朱萍莫柏立韦小英
- 关键词：生物工程实验教学体系综合设计性实验
- 高浓度初始葡萄糖发酵生产凝胶多糖培养基的响应面优化
- 2020年
- 实验室前期选育可在高浓度初始葡萄糖下直接发酵凝胶多糖的放射形土壤杆菌突变株sp.A-15,本文拟对该突变株进行发酵培养基优化。对培养基组分先进行单因素优化,再进行响应面优化。得到回归方程:Curdlan yield(g/100mL)=4.09-0.16A+0.16B+0.028C+0.27AB+0.060AC-0.065BC-0.39A2-0.29B2-0.23C2,R2=0.9755,该方程可以较合理预测凝胶多糖产量。优化的培养基配方为:6.86%葡萄糖,0.066%NH4NO3,0.2%KH2PO4,0.2%MgSO4·7H2O,0.2%CaCO3,0.05%玉米浆,以此培养基发酵凝胶多糖产量达40.8g/L,转化率达到59.5%,比优化前分别提高了70.7%和49.5%,为进一步生产研究提供了基础。
- 李文强罗宁张茜黄飞从豪朱萍杨辉
- 关键词：凝胶多糖发酵响应面优化
- 嗜热菌Geobacillus sp.HB1的分离鉴定及其α-淀粉酶基因克隆表达被引量：1
- 2015年
- 淀粉加工和利用是广西的支柱产业,各种优良淀粉酶的开发一直是研究热点。本文从云南腾冲热海温泉分离到一株产嗜热Ⅶ-淀粉酶的菌株Geobacillus sp.HB1,经扩增其16Sr DNA测序比对,表明其与已公布基因组序列的嗜热芽孢菌Geobacillus sp.C56-T3具有99%的相似性。根据Geobacillus sp.C56-T3的AMY2基因设计引物,从Geobacillus sp.HB1中扩增出Ⅶ-淀粉酶基因HBCANH1,其与AMY2基因的核苷酸序列和氨基酸序列的一致性分别为96.7%和98.0%,以p ET-22b(+)为载体构建重组质粒p HBCANH1并在大肠杆菌中获得了外源基因的表达,经破胞后测得表达活力为172.38U/m L。重组酶HBCANH1最适反应温度为70℃,最适反应p H为6.4,具有较好的应用研究前景。
- 张光旭谢模意王凡余磊梁海秋朱萍杨辉
- 关键词：嗜热菌
- 复合诱变选育葡萄糖耐受型凝胶多糖高产菌株
- 2018年
- 凝胶多糖是一种不溶于水的线性β-1,3-葡聚糖,具有优良的成胶性能和流变特性。凝胶多糖已经在食品方面有了广泛应用,并且在制药、免疫等领域也有很好的应用前景。葡萄糖是凝胶多糖工业发酵生产的主要碳源,但是培养基中高浓度的葡萄糖会对菌体生长和多糖发酵产生一定的抑制作用。通过遗传突变选育葡萄糖耐受型凝胶多糖高产菌株,可以简化生产工艺,提高产率。本文以放射形土壤杆菌Agrobacterium radiobactersp.FD3-5为出发菌株,通过紫外线、硫酸二乙酯(DES)和常压室温等离子体(ARTP)交替复合诱变,在含有高浓度葡萄糖的苯胺蓝平板培养基上筛选得到高产菌株sp.A-15,其凝胶多糖产量比出发菌株提高了114.6%。结果表明,本文复合诱变方法对遗传改造放射形土壤杆菌与产多糖相关的代谢途径有较好效果。所得耐葡萄糖突变株可以作为遗传材料,值得将来进一步从分子遗传学角度研究其耐葡萄糖机理,并为深入研究凝胶多糖代谢调控机制及工业生产指导提供帮助。
- 谢晓旭侯媛媛仝秋平李文强杨海波朱萍梁海秋周河治杨辉
- 关键词：凝胶多糖复合诱变高浓度葡萄糖
- 以情动人 朴实中见伟大——浅析《索玛花儿为什么这样红》
- 2006年
- 《索玛花儿为什么这样红——记优秀共产党员、木里县马班邮路乡邮员王顺友》是一篇优秀人物通讯,其突出特色就在于以感情为主线,串连起主人公一个个传奇而感人的故事;选取典型的细节来展现主人公的情感;侧面描写,用群众朴实的语言和行动来体现主人公;以物寄情,以物喻人的手法更增添通讯的感情色彩。
- 朱萍
- 关键词：写作结构表现手法
- 黑曲霉Ni-5k原生质体的制备和再生被引量：10
- 2005年
- 研究不同配比的酶解液、菌丝的菌龄、酶处理的温度和时间、培养方法及其他因素对黑曲霉(A sp erg illus n ig er)N i-5k原生质体的形成量和再生率的影响,结果表明,酶解液浓度1.0%(其中含纤维素酶0.7%,蜗牛酶0.2%,溶菌酶0.1%),菌龄18 h、酶解温度30°C、酶解时间3 h,原生质体的形成量达到106个/mL;采用双层平板法于32°C再生,再生率达39%。
- 朱萍梁海秋张弘周河治
- 关键词：黑曲霉原生质体
- 原生质体融合构建直接利用淀粉产衣康酸菌株被引量：3
- 2008年
- 采用衣康酸高产菌株栖土曲霉T-730的原生质体,与葡萄糖淀粉酶产生菌黑曲霉Ni-5k的原生质体进行融合处理。在以30%PEG6000为促融剂,30℃保温20min的融合条件下进行融合,所得异核体经诱导获得3株稳定的融合株(F3,F9,F11)。以生淀粉为唯一碳源,对F3,F9,F11的发酵性能测定表明,F3在发酵过程中积累葡萄糖淀粉酶和衣康酸;对F3进行发酵条件初步探讨的结果表明,以10%生淀粉为碳源,连续发酵6d,F3的衣康酸产酸率达40.9mg/mL,对供给淀粉的转化率为40.9%。
- 朱萍杨辉周河治
- 关键词：衣康酸淀粉葡萄糖淀粉酶原生质体
- 德氏乳杆菌保加利亚亚种抗噬菌体菌株的选育被引量：1
- 2008年
- 从酸奶异常发酵液中分离纯化保加利亚乳杆菌Lb2噬菌体LP5。以自然选育方法筛选出其抗噬突变株,再经紫外线诱变,获得3株产酸与出发菌株相当的抗噬株N491,N492,N761。对三抗株进行多次传代和酸奶发酵试验,结果表明,三抗株的抗噬性稳定,其中N761酸奶发酵产酸达94°T,酸奶的组织状态及风味优于Lb2,可应用于酸奶的发酵生产。
- 朱萍粟桂娇
- 关键词：噬菌体抗噬菌体菌株德氏乳杆菌保加利亚亚种酸奶菌种选育
- Bacillus paralicheniformis左聚糖蔗糖酶基因克隆表达及酶学性质研究被引量：3
- 2020年
- [目的]从耐热菌株中克隆表达左聚糖蔗糖酶基因,以获得热稳定性较好、底物耐受性高的重组酶,为左聚糖蔗糖酶催化机理及生产应用研究提供技术基础。[方法]从市售菌肥中筛选耐热菌株并克隆其左聚糖蔗糖酶基因,以pSE380为载体构建重组质粒并转化至大肠杆菌诱导表达,随后通过镍亲和层析获得电泳纯的重组左聚糖蔗糖酶并研究其酶学性质。[结果]分离到耐热菌株LN-05,经16S rDNA序列分析鉴定为Bacillus paralicheniformis。克隆表达的B.paralicheniformis左聚糖蔗糖酶与已公布地衣芽孢杆菌(B.licheniformis) RN-01的左聚糖蔗糖酶存在19个氨基酸残基差异。重组酶催化水解反应最适pH为6.0,最适温度为45℃,于40和45℃保温3 h后残余酶活力分别为89%和78%。Mn^2+、Ag^3+和Cr^2+对重组左聚糖蔗糖酶的水解活力有明显抑制作用,Co^2+和Al3^+对水解活力具有一定促进效果;Ba^2+、Mg^2+和Mn^2+对聚合活力有明显抑制作用,Ag^3+、Cu^2+和K^+对聚合活力具有促进作用。EDTA对重组酶水解活力和聚合活力均具有抑制作用。在最适条件下,重组左聚糖蔗糖酶的最大反应速率(V(max))=74μmol/(min·mg),米氏常数(Km)为7.57 mmol/L。催化聚合反应的最适温度随着底物蔗糖浓度而变化,当蔗糖浓度为50%时,最适温度为40℃;最适聚合反应pH为5.0;当酶浓度为0.9 U/mL,在最适条件下反应24 h,左聚糖产糖量达183.00±1.73 g/L,蔗糖转化率为(36.76±1.84)%。[结论]B.paralicheniformis左聚糖蔗糖酶的热稳定性较好,左聚糖产量高,具有转化蔗糖生产高附加值左聚糖的应用潜力。
- 丛豪罗宁黄飞梁月昭陈硕昌张声峰朱萍杨辉
- 关键词：克隆表达酶学性质
