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正交实验法优化千金藤属植物的DALP反应体系被引量：3: 2007年; 目的建立一套稳定的千金藤植物DALP反应体系,为开展该属植物的DALP分子标记奠定基础.方法采用正交实验设计,以云南地不容Stephania yunnanensesLo与地不容Stephania epigaeaLo基因组DNA为模板,对DALP反应程序的重要参数进行优化.结果最佳的反应体系为20μL,包含模板DNA2.0μL,2.5 mmol/L的MgCl22.5μL,2.5 mmol/L的dNTPs 2.0μL,5 pmol/L的选择性引物1μL,5 pmol/L的反向引物3μL,0.5 U/μL的Taq酶5μL,10×Buffer 2.0μL,灭菌超纯水2.5μL.结论该DALP应用反应体系稳定、可靠、重现性好,可有效的地应用于千金藤植物的种间及居群间分类鉴定.; 马云淑李永谊虞泓; 关键词：分子标记

云南川百合DALP遗传变异分析被引量：4: 2009年; 采用DALP分子标记技术,对10个川百合居群进行DNA指纹检测,结果筛选出5个引物组合,扩增后共产生192条DNA基因片段,其中178条谱带具有遗传多态性,占92.71%;10个居群的总等位基因数(Na)为1.9271、平均为1.0823,总有效等位基因数(Ne)为1.4430、平均1.0533,基因多样性指数(H)为0.2673、平均0.0303,总Shannon多样性指数(I)为0.4105、平均为0.0447,基因分化系数(Gst)为0.8874,即遗传变异有88.74%发生在居群间、有11.26%发生在居群内,表明川百合居群间存在较大的遗传分化。此外,昆明市西山的川百合野生居群(DC)的遗传多样性明显高于栽培居群,这与川百合栽培品种长期人工驯化有直接关系。同时野生居群受到人为活动干扰严重。研究结果表明,DALP分析可为川百合遗传育种的可持续利用提供理论依据。; 吴刚虞泓梁淑云杨逢春李永谊毛钧; 关键词：居群

亚洲系百合九个品种的亲缘关系研究——来自nrDNAITS证据被引量：7: 2005年; 对亚洲系百合9个品种的nrDNA的内转录间隔区(ITS)进行了PCR扩增和产物直接测序,扩增出约670bp的序列(ITS1、5.8S和ITS2及部分18S和26SrRNA基因片段)。选取亚洲系百合祖先种泸定百合和岷江百合等6个野生种序列为参考外类群,确定其ITS全序列(ITS1、5.8S和ITS2)的长度约为627bp,并根据nrRNAITS区碱基序列差异计算品种间的遗传距离和构建UPGMA系统树,探讨了9个百合品种之间的亲缘关系。; 虞泓毛钧瞿素萍熊丽李永谊和锐; 关键词：NRDNA ITS

亚洲百合种内杂交后代的多态性及其分离被引量：2: 2009年; 利用7对DALP引物组合对5个亚洲百合杂交组合后代的多态性及分离方式进行了研究。结果表明,筛选出的7对DALP引物共检测出136个位点,5个杂交组合共得到680个位点,其中多态性位点为379个,多态性位点出现的平均频率是55.7%,呈现出的多态性较高;DALP标记在杂交后代中的分离方式有不分离、发生分离和异常分离3种方式。3种分离方式出现的平均频率与数量分别为44.3%、60;41.8%、57;14.1%和19。该研究结果可为进一步构建百合遗传图谱打下良好的基础,并提供了一定的理论依据。; 瞿素萍虞泓吴学尉李永谊熊丽; 关键词：多态性

云南常见药用红景天的RAPD分析被引量：26: 2005年; 目的研究云南常见药用植物红景天的遗传背景。方法采用RAPD技术对3种6个居群59个红景天样品进行了遗传关系研究。结果大花红景天3个居群的多态位点百分率(PPB)分别为37.97%、46.15%、39.45%,Nei's基因多样性(h)分别为0.1103、0.1437、0.1371,Shannon's信息指数(I)分别为0.1736、0.2221、0.2067,物种水平的PPB为70.47%,I为0.2583,基因分化系数Gst为0.2630;长鞭红景天2个居群的PPB分别为43.67%、44.42%,I分别为0.2153、0.2174,物种水平的PPB为65.51%,Gst为0.3132,I为0.3139;云南红景天的PPB为36.97%,I为0.1881。结论RAPD分子标记可很好地用于红景天物种的分子鉴定和遗传背景研究。; 虞泓朱荣勋李永谊和云峰; 关键词：大花红景天药用 S基因 RAPD分析居群 RAPD分子标记

莲瓣兰DALP遗传多样性研究被引量：4: 2012年; 采用DALP(Direct amplification of length polymorphism)检测莲瓣兰5个居群的遗传结构。5个引物组合共检测到103个多态位点。和其它具有相似生活史(多年生草本、以动物为媒介的杂交、种子随风散布)的物种相比,莲瓣兰原变种水平(PPB=88.18%,A=1.8818,Ae=1.4880,H=0.2911,I=0.4412)和物种水平(PPB=93.64%,A=1.9364,Ae=1.5262,H=0.3129,I=0.4732)均具有较高的遗传多样性;各居群间(Gst=0.3292)存在较大的遗传分化。基因流的估计值(Nm=1.0186)表明莲瓣兰物种水平上各居群间每代有1.0186个移居个体。地理隔离和选择压力可能是造成莲瓣兰居群间基因流动受到限制的原因。在这些研究的基础上,探讨了野生莲瓣兰资源的保护问题。; 贾琳史云东虞泓骆扬李永谊; 关键词：莲瓣兰遗传分化

红景天属植物DALP反应体系的建立被引量：13: 2005年; 目的利用直接扩增片段长度多态(DALP)这一新分子标记技术建立一套稳定的红景天属植物的DALP反应体系。方法以红景天基因组DNA为模板,对DALP反应程序的一些重要参数进行摸索和优化试验。结果建立了一套稳定性强、可靠性高的DALP应用反应体系;经过大量重复性实验,反应体系为20μL,Mg2+浓度为2.5 mmol/L,dNTPs浓度为1.25 mmol/L,模板DNA的量为60 ng,5 pmol/L选择性引物1μL,5 pmol/L反向引物3 μL,引物浓度比为1:3,Taq酶2 U。反应过程为:95℃预变性5 min、94℃变性30 s、50℃退火30 s、72℃延伸1 min;30个循环,再72℃延伸10 min,完成整个PCR反应。结论该体系可有效地应用于红景天属药材的分类鉴定和地道性鉴定。; 李永谊虞泓朱荣勋和锐倪念春; 关键词：红景天属引物 MG^2+DNA 地道性

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李永谊