李现亭
- 作品数：5 被引量：32H指数：3
- 供职机构：北京大学基础医学院人类疾病基因研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 单次趋化素样因子1导入所致小鼠肺病变的转归及其意义被引量：6
- 2009年
- 目的研究单次趋化素样因子1（CKLF1）导入所致小鼠肺病变的转归及其意义。方法120只BALB／c小鼠随机分为实验组和对照组，每组60只。实验组小鼠股四头肌内注入自行构建的pcDNA3．1-CKLF1-Myc—His表达质粒（CKLF1质粒）100μg，对照组小鼠相同部位注入pcDNA3．1-Myc—His空质粒100μg，注入后均给予局部电脉冲刺激。质粒导入后第1、4、8周末每组各处死20只小鼠，观察并比较2组支气管肺泡灌洗液（BALF）及肺组织的病理学变化。结果导入质粒后1和4周，实验组小鼠BALF中中性粒细胞分别为（35．0±5．2）％和（22．9±2．2）％，淋巴细胞分别为（34．5±2．8）％和（22．0±2．0）％，均明显高于对照组[中性粒细胞（6．7±2．2）％、（7．0±2．4）％，淋巴细胞（5．9±1．6）％、（6．1±2．7）％，均P〈0．01]。肺组织病理学检查显示，CKLF1质粒导入后1周小鼠气道上皮细胞脱落，肺间质充血水肿、炎细胞渗出；4周可见肺泡间隔增厚，中性粒细胞、巨噬细胞及成纤维细胞明显增生，大量胶原纤维沉积于肺间质；8周可见肺组织病变明显减轻，肺泡结构渐趋恢复。结论CKLF1可引起支气管肺组织的炎性损伤，单次CKLF1导入所致肺病变可自行逆转。
- 谭亚夏杨通陈桥丽叶枫江梅李时悦丁静宋泉声李现亭唐岩钟南山
- 关键词：炎症趋化因子类电穿孔小鼠
- 人凋亡相关基因TFAR19缺失突变体的原核表达、产物纯化及鉴定被引量：16
- 2002年
- 构建TF 1细胞凋亡相关基因 19(TF 1cellapoptosisrelatedgene 19,TFAR19)缺失突变体的原核表达载体 ,获取缺失突变体蛋白 ,用于TFAR19促凋亡分子机理的研究 .从真核表达载体pcDI TFAR19扩增出野生型TFAR19和 4个缺失突变体 ,重组到原核表达载体pGEX 4T 2 .经亲和层析方法对缺失体蛋白进行纯化后 ,再利用凝胶过滤的方法进一步纯化 .利用抗GST和抗TFAR19的单克隆抗体对蛋白进行免疫学鉴定 .用白血病细胞株HL 6 0检测蛋白活性 .成功地克隆并重组了野生型TFAR19及缺失突变体 pGEX 4T 2表达载体 ,对融合蛋白的表达条件进行了优化 .SDS PAGE结果显示 ,各个缺失突变体融合蛋白均有较高水平的表达 .免疫学检测证实获得了正确的表达产物 .活性检测证实 ,野生型TFAR19和缺失突变体 4可以明显促进去血清诱导的HL 6 0细胞凋亡 ,第
- 李现亭莫晓宁夏东岚刘雅楠宋泉声张颖妹马大龙
- 关键词：原核表达产物纯化GST
- 人程序性细胞死亡分子5（PDCD5）相互作用蛋白的研究
- PDCD5(ProgrammedCellDeath5)是该实验室利用cDNA-RDA（cDNArepresentationaldifferencesanalysis）技术克隆的一个凋亡相关基因,最初命名为TFAR19（T...
- 李现亭
- 关键词：PDCD5缺失突变体XIAP
- 人重组胱天蛋白酶原-3的表达和体外活化
- 2002年
- 目的 :建立一个在短时间内获取大量活化胱天蛋白酶 3的方法。方法 :将胱天蛋白酶 3酶原的基因从真核表达载体中克隆到原核表达载体 pMTY4 His中 ,在大肠杆菌中以包涵体的形式表达MS2 胱天蛋白酶原 3融合蛋白 ;将包涵体变性 ,经酸化和浓缩进行体外活化 ;对所得蛋白用Westernblot和活性试验进行鉴定。结果 :构建成pMTY4 His 胱天蛋白酶 3原核表达载体 ,在大肠杆菌中获得了较高水平表达的胱天蛋白酶原 3酶原 MS2融合蛋白。体外活化后每升诱导菌可获得约 10mg蛋白 ,用抗胱天蛋白酶 3单克隆抗体证实所得蛋白为胱天蛋白酶原 3,活性试验证实得到高活性的蛋白。结论 :成功地建立了大量获取高活性的胱天蛋白酶 3的方法 ,为深入研究胱天蛋白酶
- 李现亭夏东岚莫晓宁宋泉声张颖妹马大龙
- 关键词：体外活化基因重组细胞凋亡单克隆抗体
- 大鼠趋化素样因子对成肌细胞促增殖作用的研究被引量：10
- 2002年
- 目的 探讨大鼠趋化素样因子 1和 2 (rCKLF1、2 )对成肌细胞的增殖促进作用。方法 构建pcDNA3.1/rCKLF1和pcDNA3.1/rCKLF2真核表达载体 ,并瞬时转染 2 93T细胞 ,收获培养上清。分别以3 H -TdR掺入和MTT比色法 ,分析rCKLF1和rCKLF2对小鼠肌母细胞系C2C12和原代肌卫星细胞增殖的促进作用。结果 成功地构建了rCKLF1和rCKLF2的真核表达质粒 ,并在SV4 0转化的 2 93T细胞中瞬时表达rCKLF1和rCKLF2。瞬时转染上清能够使C2C12细胞的3 H -TdR的掺入值增加 2倍或 3倍。MTT比色法分析表明 ,rCKLF1和rCKLF2的转染上清 ,对Wistar大鼠乳鼠肌卫星细胞具有增殖促进作用。结论 rCKLF1和rCKLF2能够促进骨骼肌细胞的增殖 。
- 夏东岚娄雅欣韩文玲李现亭宋泉声张颖妹马大龙
- 关键词：细胞增殖肌卫星细胞
