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李绍磊

作品数：1 被引量：5H指数：1
供职机构：中山大学附属第一医院更多>>
发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇增强型绿色
  • 1篇增强型绿色荧...
  • 1篇脂肪干细胞
  • 1篇周围神经
  • 1篇转染
  • 1篇绿色荧光
  • 1篇绿色荧光蛋白
  • 1篇慢病毒
  • 1篇慢病毒载体
  • 1篇干细胞
  • 1篇病毒载体

机构

  • 1篇中山大学附属...

作者

  • 1篇牛晓峰
  • 1篇刘云江
  • 1篇杨有优
  • 1篇李绍磊
  • 1篇江丽
  • 1篇易建华
  • 1篇许银峰

传媒

  • 1篇中华显微外科...

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
携带增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体转染大鼠脂肪干细胞被引量：5
2014年
目的探索脂肪干细胞（ADSCs）的标记方法，观察增强型绿色荧光蛋白（EGFP）阳性ADSCs（EGFP—ADSCs）的体外活性、干细胞特性及体内短期活性。方法用携带增强型绿色荧光蛋白（eGFP）基因的慢病毒载体（Lv-eGFP）在感染复数（MOI）为0、1、5、25、50、100时，转染SD大鼠ADSCs12h，荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率和荧光强度；Mrrr法评价转染后细胞活性；EGFP—ADSCs分别行成脂分化及油红O检测、成骨分化及茜素红染色；将EGFP—ADSCs注射到去细胞神经构建组织工程化神经，修复大鼠坐骨神经缺损，术后1周取材进行冰冻切片观察细胞在体内存活情况。结果转染4d后，EGFP阳性率及荧光强度达到高峰；EGFP基因表达不随细胞传代而消失。MOI=0、1、5、25、50、100时，EGFP阳性转染率分别为0．13％、31．09％、75．33％、92．66％、96．70％、98．38％。实验组阳性率与对照组（MOI=0）选择相比，差异均有统计学意义（P〈0．05）；MOI=25、50、100时，组问阳性率差异无统计学意义（P〉0．05），但与MOI=1、5比时差异（P〈0．05）。MTT试验观察10d内MOI=25、50、100组细胞增值活性与非转染细胞差异无统计学意义（P〉0．05）。选择MOI=25作为最佳转染滴度进行后续实验。转染后ADSCs成骨、成脂分化20d，茜素红染色见橘红色钙沉积，油红O染色见橙红色脂滴。1周冰冻切片观察细胞于体内呈梭形，均匀分布。结论慢病毒载体转染EGFP基因不影响ADSCs活性及成骨成脂分化能力，能为组织工程化神经修复缺损提供示踪种子细胞的方法。
李绍磊刘云江牛晓峰许银峰易建华杨有优江丽
关键词：脂肪干细胞转染绿色荧光蛋白慢病毒载体周围神经
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