李荣田
- 作品数：38 被引量：111H指数：6
- 供职机构：黑龙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家转基因植物研究与产业化专项黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 无融合生殖甜菜M14的GISH和BAC-FISH研究被引量：13
- 2007年
- 无融合生殖是指不经减数分裂和受精作用而产生胚的一种无性繁殖,因此是胚的克隆,母系繁殖.甜菜单体附加系M14是通过二倍体栽培甜菜(Beta vulgaris)和四倍体白花甜菜(B.corolliflora)种间杂交、进而回交,选育出的具有无融合生殖特性的甜菜品系.我们利用GISH技术进一步分析了无融合生殖甜菜M14中的染色体情况,在不封阻的情况下,附加的外源染色体清晰可见,这说明栽培甜菜与白花甜菜基因组间种属特异序列的差异明显.利用无融合生殖甜菜M14和有性生殖栽培甜菜的花期mRNA对白花甜菜第9号染色体的BAC芯片进行了差异杂交分析,发现2个BAC克隆16-M11,26-L15含有M14花期特异表达的基因.选用这2个BAC克隆作为探针,对具有无融合生殖甜菜M14进行荧光原位杂交,供试探针均被定位于附加的白花甜菜第9号染色体长臂末端,呈半合子状态.本研究BAC芯片的杂交结果结合两种生殖途径中胚和胚乳发育表达方式的保守性可推断,甜菜中有性生殖和无融合生殖可能共享某些调节因子的相关路径,正是白花甜菜第9号染色体上的特异基因才使甜菜M14中无融合生殖特性得以表达.
- 戈岩何光存王志伟郭德栋覃瑞李荣田
- 关键词：甜菜无融合生殖BAC克隆双色荧光原位杂交
- 甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库的构建被引量：3
- 2004年
- 为了克隆甜菜单体附加系M14无融合生殖相关基因 ,采用cDNA文库快速构建法制备了M14花蕾cDNA文库。根据甜菜单体附加系M14无融合生殖的细胞胚胎学研究结果 ,提取甜菜M14花蕾三个关键时期的RNA ,分离纯化mRNA ,以Oligo(dT)为引物 ,在逆转录酶的作用下 ,合成第一链cDNA ,进而合成第二链cDNA。含有EcoRⅠ和NotⅠ粘性末端的双链cDNA在T4DNA连接酶的作用下与载体λZAP臂相连 ,并对连接产物进行体外包装 ,得到噬菌体颗粒 ,即甜菜单体附加系M14花蕾cDNA文库。经大肠杆菌寄主菌株XL1-blueMRF’平板检测 ,三个文库滴度分别为 2 .8× 10 5pfu·mL-1、1.6× 10 5pfu·mL-1和 3.5× 10 5pfu·mL-1,克隆重组率为 83%、78%和 81%。
- 郑天然李荣田孙晓凌李海英郭德栋
- 关键词：甜菜无融合生殖单体附加系CDNA文库
- 甜菜非整倍体B_Ⅲ杂种胚囊发育的观察被引量：1
- 2007年
- 由栽培甜菜和白花甜菜杂交分离获得的甜菜单体附加系,其传递后代中分离出少数2n=28的个体。它们是由甜菜单体附加系产生的不减数配子接受外来栽培甜菜花粉结合而成的BⅢ杂种。BⅢ杂种个体繁殖中又反转产生单体附加系,并能稳定传递。对BⅢ杂种胚胎发育进行观察,看到其大孢子母细胞存在不均等分裂,证实BⅢ杂种胚囊发育是独特的。
- 刘丽萍满玉华李荣田
- 关键词：甜菜单体附加系
- 利用CRISPR/Cas9技术创制高效抗除草剂水稻被引量：4
- 2022年
- 【目的】培育抗除草剂品种在水稻育种中具有重要意义。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以黑龙江优质粳稻品种为材料,编辑乙酰乳酸合酶ALS基因,创制具有抗除草剂特性的水稻材料。【方法】利用CRISPR/Cas9技术,以乙酰乳酸合酶ALS为靶基因,构建单碱基突变载体pH-nCas9-PBE-ALS,以松粳22、龙粳46和绥粳18为转化材料,利用农杆菌介导转化获得转基因植株,通过对转基因植株的突变位点进行测序结合除草剂喷施试验,鉴定基因型及表型。【结果】经分子水平检测验证,获得ALS^(S627N)突变植株10株,ALS^(S627N)且^(1884)G-A但第628位氨基酸未改变突变植株1株,ALS^(S627N/G628E)突变植株1株。相较于野生型,以上三类突变植株均具有较强抗除草剂特性。【结论】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得具有抗除草剂特性,能够稳定遗传,不含转基因标记的纯合株系,可为抗除草剂水稻育种提供基础材料。
- 尹丽颖张元野李荣田何明良王芳权许扬刘欣欣潘婷婷田晓杰卜庆云李秀峰
- 关键词：水稻抗除草剂咪唑乙烟酸
- 抗稻瘟病基因鉴定方法及抗稻瘟病早粳稻种质创新
- <b>一种抗稻瘟病基因鉴定方法及抗稻瘟病早粳稻种质创新。准确鉴定选择抗稻瘟病基因，有利于抗稻瘟病种质创新及品种培育。一种抗稻瘟病基因鉴定方法及抗稻瘟病早粳稻种质创新，利用分子标记辅助选择（</b>...
- 李荣田刘长华张游陈全珍
- 文献传递
- 一种观察甜菜胚囊的压片法被引量：3
- 2006年
- 胚囊观察是植物胚胎学的主要研究方法之一。我们在学习了酶解法之后,摸索研究了一种观察甜菜胚囊的压片法。其步骤:固定、硼砂洋红整体染色、酸解离、剥离胚珠、透明、压片、观察。观察到了胚囊的一些情况。此法简捷易行,成本低。
- 刘丽萍李荣田满玉华
- 关键词：甜菜胚囊
- 水稻香味性状简便快速检测方法
- 一种水稻香味性状简便快速检测方法。在香稻育种及良种繁育过程中，需要快速、简便、有效地鉴定水稻香味表型，以便在田间准确地选择水稻香味纯合基因型。一种水稻香味性状简便快速检测方法，在水稻生长发育各个时期，均可利用火焰熏蒸法鉴...
- 李荣田刘长华刘志富
- 文献传递
- Bt早粳稻对土壤微生物数量影响及其外源基因的转移被引量：2
- 2020年
- 为了研究种植Bt早粳稻对土壤微生物数量影响以及Bt早粳稻中的外源DNA向土壤微生物水平转移情况,以Bt早粳稻各生长发育期田间土壤为试材,用平板菌落计数法、PCR法测得土壤微生物数量和Bt基因等DNA片段等数据。结果显示:在水稻生长发育的返青期、分蘖期、孕穗期、抽穗期和成熟期,种植Bt早粳稻‘HD1’‘、HD2’‘、HD3’和‘HD4’等品系的田间根际及行间土壤细菌、放线菌和真菌数量与种植其受体品种对应田间土壤微生物数量相比,均未见显著不同;未发现Bt早粳稻各品系外源DNA片段向土壤细菌、放线菌和真菌等微生物的水平转移现象。Bt早粳稻田间土壤微生物数量与普通水稻相比较没有显著差异,土壤微生物中也未见来自于Bt水稻的外源DNA。
- 李荣田高士童高祎刘长华
- 关键词：基因水平转移土壤微生物环境安全性
- 甜菜单体附加系M14种子形成方式被引量：1
- 2013年
- 以具有显性标记性状的红叶柄栽培甜菜为父本与绿叶柄M14甜菜杂交,观察F1植株叶柄颜色;利用SSR标记分析甜菜M14世代间的遗传相关性。结果显示,甜菜单体附加系M14传递率维持在较高水平;在人工去雄授粉条件下,F1代植株叶柄颜色均为红色,甜菜M14通过接受外来遗传物质及精卵结合的有性生殖方式繁殖种子;M14株系中不存在与其母本株SSR标记基因型精确相同的植株。表明甜菜M14通过精卵融合的有性生殖而非无融合生殖形成种子。Southern杂交结果显示,从甜菜M14反转得到的栽培甜菜染色体中普遍含有白花甜菜DNA,暗示甜菜M14形成雌配子体及卵子过程中存在减数分裂过程和较高频率的染色体畸变。推测甜菜单体附加系M14高频传递现象可能是由于附加的白花甜菜第9染色体具有杀配子功能。
- 马兰杜洪岩李荣田
- 关键词：无融合生殖有性生殖有性杂交SOUTHERN杂交
- 甜菜单体附加系M14品系的创造和遗传鉴定及利用策略
- 以栽培甜菜(Beta vulgaris,VV,2n=2X=18)为母本、以具有无融合生殖特性的野生种白花甜菜(Beta corolliflora,CCCC,2n=4X=36)为父本进行种间远缘杂交,获得了母本不减数配子与...
- 李荣田李海英刘丽萍郭德栋
- 文献传递
