李雅贞
- 作品数：19 被引量：54H指数：4
- 供职机构：江苏大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省社会发展科技计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人外周血CD8^+T细胞Runx3的基因克隆及其原核表达被引量：2
- 2009年
- 目的:克隆人Runx3基因全长编码区的cDNA,进行鉴定和测序分析,并利用载体pQE30在大肠埃希菌(M15)原核表达人Runx3基因全长序列,为从转录水平探讨Runx3基因与免疫相关性疾病以及肿瘤发生发展的关系奠定基础。方法:MACS分离外周CD8+T细胞;采用RT-PCR方法从人外周血CD8+T细胞获得Runx3基因的cDNA,并连接pMD19-T载体导入大肠埃希菌DH5α,选择阳性克隆,应用M13F/R通用引物进行双向反应测序,以作序列鉴定。利用PCR技术从克隆载体pMD19-T/Runx3获得人Runx3的全长编码序列,亚克隆至原核表达载体pQE30,形成重组表达质粒pQE30/Runx3;酶切鉴定挑选阳性重组质粒转化大肠埃希菌M15,测序鉴定后经IPTG30℃诱导4h,SDS-PAGE电泳判断以包涵体形式存在的带有His标签的融合蛋白并进行Western blot鉴定。结果:扩增获得的Runx3基因CDS区全长1248bp,编码415个氨基酸残基,与GenBank中发表的序列完全一致。成功构建了原核表达载体pQE30/Runx3,并在工程菌M15中获得大量表达.结论:获得了人Runx3基因的克隆,并成功原核表达和制备出人Runx3融合蛋白。
- 李雅贞王胜军石燕戴晓莉彭素芳苏兆亮邵启祥许化溪
- 关键词：RUNX3基因CDNA克隆原核表达
- 皮肌炎患者外周血CD4^+Th1/Th2细胞因子及转录因子的表达被引量：1
- 2008年
- 目的探讨Thl/Th2细胞分化趋势在活动性皮肌炎(DM)发病机制中的作用。方法分别采集15例活动性DM患者(DM组)和15例健康人(对照组)外周血,采用免疫磁珠分离获得CD4+T细胞(Th细胞),逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测两组Thl、Th2转录因子T-bet、GATA3及细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的表达强度。分析T-bet和IFN-γ、GATA3和IL-4的相关性;IFN-γ、IL-4表达与血清肌酸激酶(CK)含量的相关性。结果DM组IFN-γ、GATA3及IL-4表达均明显高于对照组(P<0·05);DM组IL-4与GATA3、血清CK呈正相关(P<0·05)。结论DM患者Thl/Th2无明显极化现象,Thl/Th2细胞因子表达均增强。
- 吴蔚王胜军李遇梅李雅贞许化溪
- 关键词：皮肌炎THL/TH2转录因子
- 胃癌患者外周血单个核细胞RORγt和IL-17 mRNA水平的检测及临床意义被引量：5
- 2009年
- 目的检测胃癌患者外周血中单个核细胞(PBMC)中转录因子RORγt和细胞因子IL-17的表达水平及血浆IL-17的表达,探讨Th17细胞特异性RORγt及IL-17的变化在胃癌临床监测中的意义。方法收集43例胃癌患者外周血标本,40例健康志愿者标本;实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测患者PBMC中RORγt和IL-17 mRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-17的表达;采用直线相关检验方法对健康人群和胃癌患者转录因子RORγt和IL-17表达水平进行相关性分析。结果胃癌患者外周血PBMC的RORγt、IL-17mRNA表达水平均明显高于健康对照组(P<0.05),且二者呈现明显正相关(P<0.01);胃癌转移组与未转移组相比,RORγt和IL-17 mRNA明显升高(P<0.05),此外,血浆IL-17的表达也明显升高(P<0.01)。结论胃癌患者PBMC中RORγt和IL-17 mRNA表达水平及血浆IL-17明显升高,提示Th17细胞与胃癌的发生发展可能存在着一定的关系。
- 彭素芳王胜军陈建国陈勋李雅贞戴小莉苏兆亮薛渊吴燕夏圣邵启祥黄新祥许化溪
- 关键词：胃癌RORΓTIL-17
- Downregulation of Runx3 closely related to the decreased Th1-associated factors in patients with gastric carcinoma
- Background:Runt-related transcription factor 3(RunxS)is a tumor suppressor gene and plays an important role in...
- 李雅贞纪晓昀黄新祥苏兆亮夏圣王胜军许化溪
- 关键词：RUNX3T-BET
- 文献传递
- 类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1RORγ／t和白细胞介素-17表达水平的检测及临床意义被引量：3
- 2010年
- 目的检测类风湿关节炎（RA）患者外周血高迁移率族蛋白1（HMGB1）及Th17细胞特异性转录因子、相关细胞因子的表达水平，同时分析其与C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）和类风湿因子（RF）的关系，初步探讨RA患者HMGB1的表达水平及其与Th17的关系。方法收集80例RA患者外周血标本，其中静止期32例、活动期48例，健康志愿者50名。采用实时荧光定量聚合酶链反应（QRT—PCR）检测外周血单个核细胞（PBMC）中HMGB1、RORγt和白细胞介素（IL）-17的mRNA水平；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆HMGB1、IL-17、IL-23的蛋白浓度，采用单因素方差分析和Spearillan相关分析进行统计学处理。结果RA患者PBMC中HMGB1、RORγt和IL一17mRNA的表达水平均高于健康对照组（P〈0．05），且活动期[HMGB1（0．424±0．262）pg／ml，RORγt（0．34±0．25）pg／ml，IL-17（1．42±0．38）pg／ml]明显高于静止期（R0．01）。血浆HMGB1、IL-23和IL-17蛋白水平也显示类似的结果，RA组明显高于健康对照组（P〈0．05），且与CRP、ESR、RF呈正相关（P〈0．05）。结论检测RA患者外周血HMGB1和Th17细胞特异性转录因子及相关细胞因子水平，有助于探讨HMGB1和IL-17在RA发病过程中的病理生理作用，也为寻找RA的治疗靶点提供了新的思路。
- 石燕王胜军陈建国薛渊何志强周成林郑东杨恒李雅贞仝佳苏兆亮邵启祥许化溪
- 关键词：白细胞介素17
- 脑脊髓损伤大鼠局部Th1/Th2细胞相关因子的表达及意义
- 2013年
- 目的分析大鼠急性脑脊髓性损伤后脑脊髓中Th1和Th2细胞相关因子的表达水平,探讨其在持续性二次损伤中可能的作用。方法制备SD大鼠急性脑脊髓性损伤模型,随机分为损伤组和脂多糖(LPS)处理组,各组又分别对脑和脊髓进行实验处理。用荧光定量PCR分别检测不同组别大鼠脑脊髓中Th1和Th2细胞相关因子,并进行相关性分析。结果与对照组相比,损伤和LPS处理的脑组织Th1细胞相关的细胞因子IFN-γ表达明显增高(P<0.05),而T-bet的表达并无明显改变;在损伤和LPS处理的脊髓中,IFN-γ和转录因子T-bet、HLX的表达均显著升高(P<0.05)。无论是脊髓损伤组还是LPS处理组,细胞因子IL-4和转录因子GATA3均与对照组无异,呈低表达状态。结论脑脊髓损伤后呈现不同程度的Th1细胞相关因子上调,尤以可溶性的细胞因子IFN-γ为显著,脊髓损伤时出现T-bet与HLX表达上调。
- 许燕李雅贞张志坚孙湘兰龚爱华丁红群卢俊浩袁泉许化溪
- 关键词：TH1TH2转录因子
- 皮肌炎患者外周血CD_4^+T细胞IFN-γ和IL-4的表达及意义
- 2008年
- 采集15例活动期皮肌炎(DM)患者和15例健康对照者外周血,磁珠分离获得CD4+T细胞,RT-PCR检测其IFN-γ、IL-4 mRNA,观察IFN-γ和IL-4表达与血清肌酸激酶(CK)含量的相关性。结果显示,活动期DM患者的外周血CD4+T细胞的IFN-γ、IL-4 mRNA分别为0.698±0.468、1.028±0.547,显著高于健康对照者的0.359±0.208、0.628±0.354(P均<0.05)。活动期DM患者CD4+T细胞的IL-4 mRNA与血清CK含量呈正相关(r=0.584,P<0.05)。认为活动期DM患者外周血CD4+T细胞Th1/Th2细胞因子显著升高,无明显极化现象,CD4+T细胞Th1/Th2细胞因子异常表达可能与DM的发病机制有关。
- 吴蔚王胜军李遇梅李雅贞许化溪
- 关键词：皮肌炎淋巴细胞干扰素白细胞介素
- 皮肌炎患者外周血CD4^+ T细胞中TGF-β1 mRNA表达及意义被引量：4
- 2008年
- 目的:检测活动期皮肌炎(dermatomyositis,DM)患者外周血CD4+T细胞中转化生长因子β1(transforminggrowth factor-β1,TGF-β1)以及血清磷酸肌酸激酶(CK)含量。初步探讨CD4+T细胞TGF-β1在皮肌炎发病机制中的作用。方法:收集12例活动期皮肌炎患者和12例健康对照者外周血,采用免疫磁珠分离法获得CD4+T细胞,通过RT-PCR方法检测出各组TGF-β1表达水平。观察CD4+T细胞中TGF-β1表达与CK含量的相关性。结果:活动期皮肌炎患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1相对表达量为0.751±0.107,显著高于健康对照0.438±0.170?P<0.05?。CD4+T细胞TGF-β1表达量与CK含量呈中度正相关?r=0.67,P<0.05?。结论:活动性皮肌炎患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1 mRNA表达显著升高,可能与皮肌炎疾病发生有关。
- 吴蔚王胜军李遇梅李雅贞许化溪
- 关键词：皮肌炎CD4^+T细胞TGF-Β1
- 皮肌炎患者外周血CD4^+ T细胞中TGF-β_1、IL-10 mRNA的表达及临床意义被引量：4
- 2009年
- 目的:检测活动期皮肌炎(DM)患者外周血CD4+T细胞转化生长因子β1(TGF-β1)、白介素10(IL-10)的表达以及血清肌酸激酶(CK)含量。初步探讨CD4+T细胞TGF-β1、IL-10在DM发病机制中的作用。方法:收集15例活动期DM患者和15例健康对照者外周血,采用免疫磁珠分离获得CD4+T细胞,通过逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测出各组TGF-β1、IL-10表达水平。观察CD4+T细胞中TGF-β1、IL-10表达与血清CK含量的相关性。结果:活动期DM患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1和IL-10表达量显著高于健康对照,血清CK含量与CD4+T细胞TGF-β1表达量呈中度正相关。结论:活动期DM患者外周血CD4+T细胞中TGF-β1和IL-10 mRNA表达显著升高,可能与DM疾病发生有关。
- 吴蔚王胜军李遇梅李雅贞
- 铜绿假单胞菌多表位核酸疫苗的构建及其生物学作用的研究被引量：9
- 2008年
- 目的:构建铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)多表位-MyD88基因疫苗并对其免疫原性进行研究。方法:将PA外膜蛋白F(OprF)的三个中和性B细胞表位及一个外源通用T细胞表位串联,采用重叠PCR方法合成DNA,并在此序列前插入组织型纤溶酶原(tPA)的信号肽基因,将此获得的片段与MyD88基因分别克隆入pIRES载体构建重组质粒pIRES-tPA-OprF:MyD88,并将该质粒免疫Balb/c小鼠,采用ELISA法测定特异性抗体水平。气管内接种PA,进行肺组织匀浆PA细菌计数。结果:成功构建真核表达质粒pIRES-tPA-OprF:MyD88,用该质粒免疫小鼠,能刺激机体产生高度特异性抗体,气管接种PA后,免疫组小鼠肺匀浆细菌计数明显低于其他对照组。结论:成功构建了重组有MyD88基因的PA表位核酸疫苗,接种小鼠后可诱导特异性免疫应答,产生较好的抗铜绿假单胞菌感染的免疫保护作用。
- 陈建国苏兆亮柳迎昭王胜军彭素芳李雅贞邵启祥许化溪
- 关键词：铜绿假单胞菌MYD88表位疫苗免疫原性
