杨莹珠
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 供职机构：浙江省宁波市妇女儿童医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CCL18过表达对卵巢上皮性癌细胞生物学行为的影响被引量：8
- 2013年
- 目的 探讨C-C型趋化因子配体18（CCL18）过表达对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞生长和浸润转移的影响.方法 构建CCL18重组表达载体并介导SKOV3细胞过表达CCL18,分别采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、流式细胞仪、穿膜小室（transwell小室）迁移、侵袭和纤连蛋白黏附方法测定SKOV3细胞（实验细胞为SKOV3-CCL18,以SKOV3-pEGFP-N1为对照细胞）过表达CCL18后细胞生长曲线、细胞生长周期以及细胞体外迁移、侵袭、黏附能力的变化.结果 （1）成功构建CCL18-pEGFP-N1重组质粒并转染至SKOV3细胞,筛选和建成稳定生长的SKOV3-CCL18细胞.（2）SKOV3-CCL18细胞与空白SKOV3、SKOV3-pEGFP-N1细胞比较,生长曲线差异无统计学意义（P均＞0.05）；但SKOV3-CCL18细胞处于增殖状态（S＋G2 ＋M期）的比例明显高于SKOV3、SKOV3-pEGFP-N1细胞（分别为32.80％、27.06％、26.98％）,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.（3）SKOV3-CCL18细胞的体外侵袭、迁移和黏附能力（分别为0.49±0.18、1.16±0.25和0.39±0.10）均明显高于空白SKOV3细胞（分别为0.23 ±0.13、0.36±0.10、0.16±0.03）和SKOV3-pEGFP-N1细胞（分别为0.19±0.05,0.38±0.23和0.13±0.11）,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 卵巢癌SKOV3细胞CCL18过表达导致其体外侵袭、迁移和黏附能力增强.
- 张玮杨莹珠李力王琪
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤转移
- CCL18蛋白在卵巢癌组织上皮细胞中定位及定量的初步研究被引量：4
- 2014年
- 目的：了解趋化因子配体18（CCL18）蛋白在卵巢癌组组织上皮细胞中的定位及定量.方法：使用激光捕获纤维切割（LCM）获取卵巢癌、卵巢良性肿瘤及卵巢正常组织的上皮细胞,免疫磁珠分别获取CCL18蛋白,微量层析柱浓缩CCL18样品,并除盐后,基质辅助激光解吸电离飞行时间-质谱技术（MALDI-TOF）检测CCL18蛋白在不同组织细胞中的表达情况.结果：卵巢癌组织上皮细胞中CCL18蛋白呈高表达,且阳性率为9/10例,表达量为103～105;卵巢良性肿瘤组织上皮细胞中CCL18蛋白阳性率为2/6例,表达量为10a～104,而卵巢正常组织上皮细胞中未检测到CCL18蛋白的表达.结论：CCL18蛋白在卵巢癌组织上皮细胞中明显高表达,可能成为卵巢癌的新一代肿瘤标志物.
- 张玮杨莹珠李力潘忠勉阳志军王琪
- 关键词：LCMMALDI-TOF
- 趋化因子配体18基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及临床意义被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨趋化因子配体18(CCL18)基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达及临床意义。方法:采用荧光定量PCR法对经病理确诊的卵巢恶性肿瘤31例,良性卵巢肿瘤14例和正常卵巢组织14例中CCL18mRNA表达进行测定并分析其与临床病理的关系。结果:(1)CCL18基因在恶性肿瘤组织中较良性肿瘤组织、正常卵巢组织中的阳性率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)恶性肿瘤组织中CCL18基因的表达在组织学类型、手术病理分期、病理分级、残余灶等方面,差异均无统计学意义(均P>0.05)。(3)CCL18基因阳性患者中位生存时间为(32.088±4.284)个月,阴性患者中位生存时间为(20.625±3.572)个月,CCL18表达阳性的患者其中位生存时间较阴性表达患者长,但两组患者的生存时间差异无统计学意义(P>0.05)。(4)Cox比例风险回归模型显示残余灶是影响预后的独立因素,而CCL18mRNA过度表达与否不是影响预后的独立因素。结论:CCL18基因的过度表达可能与卵巢癌发病相关。
- 张玮杨莹珠阳志军潘忠勉王琪
- 关键词：卵巢恶性肿瘤荧光定量PCR
- 趋化因子配体18重组成熟肽段的表达
- 2009年
- 目的构建PET SUMO-CCL18原核表达质粒，并表达、纯化获得重组趋化因子配体18成熟肽段。方法从人卵巢癌组织中克隆CCL18基因全长，继而扩增表达成熟蛋白质的核酸序列，连接人PETSUMO载体，重组阳性克隆转入感受态细胞BL21（DE3）中IPTG诱导表达，基质辅助激光解吸／电离质谱技术（MALDI-TOF）验证后以SUMO蛋白酶切除载体部分，纯化浓缩，MALDI-TOF鉴定表达结果。结果测序分析证实，克隆人PETSUMO载体的CCL18序列与Genbank中报道序列完全一致，纯化后蛋白质谱鉴定与天然CCL18成熟蛋白序列一致。结论成功构建了高表达CCL18蛋白的表达系统，得到重组CCL18成熟肽段，为进一步研究CCL18蛋白在卵巢癌中的作用提供实验基础。
- 杨莹珠王琪周怡张玮黎丹戎詹步坚李力
- 关键词：趋化因子配体18卵巢癌原核表达蛋白纯化
- siRNA沉默CCL18的表达抑制卵巢上皮癌SKOV3细胞的侵袭和迁移被引量：5
- 2013年
- 目的:探讨体外沉默CCL18基因的表达对卵巢上皮癌SKOV3细胞侵袭和迁移的影响。方法:化学合成3对靶向CCL18的siRNA(CCL18-siRNA61、CCL18-siRNA127、CCL18-siRNA224),体外转染至CCL18阳性的SKOV3细胞,RT-PCR检测SKOV3细胞中CCL18 mRNA的表达,选取其中干扰效率最好的序列,构建靶向CCL18的干扰质粒pSilencer4.1-CCL18-siRNA61。pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染SKOV3细胞后,MTT法测定SKOV3细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的细胞周期,采用Transwell法、Migration法以及Fibronectin黏附法分别测定细胞的体外侵袭、迁移、黏附能力。结果:3对靶向CCL18的siRNA中CCL18-siRNA61干扰效果最好,进而成功构建靶向CCL18的pSilencer4.1-CCL18-siRNA61干扰质粒,pSi-lencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染可显著下调SKOV3细胞中CCL18 mRNA的表达。pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染不影响SKOV3细胞的增殖,但pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染组SKOV3细胞中(S+G2+M)期细胞比例明显低于对照质粒pSilencer4.1-Ctrl-siRNA转染组[(19.71±4.4)%vs(26.45±7.91)%,P<0.05];且与pSilencer4.1-Ctrl-siRNA质粒转染相比,pSilencer4.1-CCL18-siRNA61质粒转染可有效抑制SKOV3细胞的侵袭、迁移和黏附能力[(9.91±3.41)%vs(23.75±6.81)%,(16.80±8.71)%vs(31.74±11.23)%,(6.73±4.33)%vs(17.53±6.54)%;均P<0.05]。结论:siRNA沉默CCL18的表达可抑制卵巢上皮癌细胞株SKOV3的侵袭、迁移和黏附能力。
- 张玮杨莹珠李力王琪
- 关键词：卵巢上皮癌SKOV3细胞SIRNA迁移
- 趋化因子配体18基因与卵巢肿瘤的关系研究
- 卵巢恶性肿瘤以其发病隐匿、症状不明显、进展迅速、早期发现率低以及生物学特性错综复杂，加之术后易复发，5年生存率徘徊在25％至30％，而成为目前女性生殖器恶性肿瘤中威胁最大的疾病。目前CA125在临床上得到广泛应用，但临床...
- 杨莹珠
- 关键词：卵巢肿瘤趋化因子配体18
- 文献传递
