沈佳
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
- 供职机构：宁波大学海洋学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家新药研究基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 盐度和无机碳对蛋白核小球藻生长、胞外碳酸酐酶活性及其基因表达的影响被引量：10
- 2014年
- 为探讨小球藻中碳酸酐酶对环境调控的响应规律，提高小球藻的生物量及对无机碳的利用，实验采用生化和荧光定量PCR方法研究了盐度和2种无机碳对蛋白核小球藻生长、胞外碳酸酐酶（CA）活性及3种亚型碳酸酐酶基因（ca）表达的影响。结果发现，培养至第9天时盐度15和30培养藻生长较快，盐度45藻细胞密度降为盐度15的0．83倍；CA活性随着盐度增加而降低，盐度45长时间处理酶活性降低更为明显，3种亚型ca基因表达量则随盐度升高而增加。2倍空气CO2浓度培养藻密度可达空气CO2浓度的1．23倍，但CA活性较低，第8天为空气CO：浓度组的0．41倍，α-ca和γ-ca基因表达量比空气CO2浓度组略有升高。在0-10mmol／LHCO3-条件下，蛋白核小球藻随HCO3-含量升高生长加快，CA活性在5mmol／LHCO3-最高，而3种亚型ca基因表达量在1mmol／LHC03处理组最高。研究表明，蛋白核小球藻生长比较适合中低盐度、2倍空气CO2浓度和高HCO3-处理，其CA活性可被低盐、空气CO2浓度和5mmol／LHCO；所诱导，而ca基因表达在高盐、2倍空气CO2浓度和低HCO3-条件下较高。
- 王玮蔚孙雪王冬梅沈佳徐年军
- 关键词：蛋白核小球藻盐度CO2碳酸酐酶
- 海产品中溴酚类海洋风味素的气相色谱-质谱联用分析被引量：12
- 2004年
- 建立了海产品中的溴酚类海洋风味素的毛细管气相色谱-质谱联用检测法。样品中溴酚类化合物在挥发油测定器中用乙酸乙酯通过循环蒸馏萃取,浓缩后用电子轰击源在特征离子碎片扫描检测模式下进行检测。结果表明,5种溴酚类化合物在SBP-50柱上得到良好的分离,色谱出峰尖锐,没有杂峰干扰。本方法在2.5～40 mg·L^(-1)浓度范围内线性关系良好,最低检测限低于1ng·mL^(-1)。当向25.00g样品中添加溴苯酚各2.0μg时,平均回收率分别达到90.45％(2-BP)、60.49％(4-BP)、85.79％(2,4-DBP)、84.98％(2,6-DBP)、90.80％(2,4,6-TBP),标准相对偏差为1.37％～4.16％。对市场上销售的几种海洋经济动物测定,溴酚类风味素含量在5.40～31.38 ng·g^(-1)范围内,而所测得的淡水青虾中溴酚类风味素含量只有0.18 ng·g^(-1)。
- 徐继林严小军徐年军沈佳沈丽君
- 关键词：海产品气相色谱-质谱联用
- 蛋白核小球藻Fesod基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2015年
- 利用RACE技术克隆了蛋白核小球藻Fesod全基因序列,得到1 215 bp序列,其5'非翻译区长52 bp,3'非翻译区长452 bp,共编码236个氨基酸。生物信息学分析结果表明,该Fesod基因编码蛋白的分子量为26.42 k D,等电点为6.98;位于线粒体中的概率是73.9%;该蛋白没有信号肽序列;蛋白质二级结构预测结果表明Fe SOD中α-螺旋和无规卷曲分别占53.39%和39.41%。再利用实时荧光定量PCR技术检测了不同盐度和水杨酸浓度对蛋白核小球藻Fesod基因表达的影响,结果表明Fesod表达量随着盐度升高而增加,45‰盐度表达量为15‰盐度的3.61倍;而植物激素水杨酸的添加一定程度抑制了45‰盐度培养藻Fesod基因的表达,并且随其浓度增加呈现先升后降的趋势。表明蛋白核小球藻Fesod受盐度诱导,而水杨酸对其影响不明显。
- 沈佳江灵芝孙雪
- 关键词：蛋白核小球藻铁超氧化物歧化酶转录表达盐度水杨酸
- 蛋白核小球藻生长和无机碳利用对不同光照强度和CO_2浓度的响应被引量：4
- 2016年
- 为了探讨光照强度和CO_2浓度对蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）生长、无机碳利用的复合效应,丰富绿藻中无机碳浓缩机制的资料,该文设置两种光照强度（40和120μmol photons×m–2×s–1）和两种CO_2浓度（0.04%和0.16%）组合成4种条件,比较了蛋白核小球藻生长、无机碳浓度、pH补偿点、光合放氧速率、碳酸酐酶（CA）活性和α-CA基因转录表达对这4种培养条件的响应。结果发现：蛋白核小球藻在高光强高CO_2浓度组生长最快;低光强高CO_2浓度组培养体系中总无机碳浓度为1 163.3μmol×L–1,显著高于其他3组;高光强低CO_2浓度组藻的p H补偿点最高（9.8）,而低光强高CO_2浓度组藻的p H补偿点最低（8.6）;低光强高CO_2浓度组藻的最大光合速率（Vmax）和最大光合速率一半时的无机碳浓度（K0.5）最高,分别是其他3组的1.28-1.91倍和1.61-2.00倍;高光强低CO_2浓度组藻的胞外CA活性最高;而低光强低CO_2浓度组藻的胞外α-CA基因表达量显著高于其他3组。以上结果表明低CO_2浓度可促进蛋白核小球藻的pH补偿点和无机碳亲和力的提高,诱导胞外CA活性及α-CA基因的表达;该藻主要以HCO_3~–为无机碳源,其对无机碳的利用受光照的调节。
- 沈佳李亚鹤张琳孙雪
- 关键词：蛋白核小球藻光照CO2浓度
- 蛋白核小球藻中3种碳酸酐酶亚型的分析
- 2014年
- 选取蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)中不同碳酸酐酶亚型(α-CA、β-CA、γ-CA)基因,对其编码蛋白的理化性质、跨膜结构域、信号肽及蛋白高级结构进行了分析和预测。结果表明蛋白核小球藻α-CA、β-CA和γ-CA蛋白分子量分别为28.9 kDa、34.9 kDa和24.8 kDa,均为酸性、微亲水和脂溶性蛋白。α-CA可以检测到强的跨膜结构和信号肽区域,推测为胞外CA。β-CA和γ-CA无可信的跨膜结构域和信号肽区域,推测β-CA可能位于细胞质或叶绿体基质中,而γ-CA位于线粒体基质中。CA蛋白的二级结构预测结果表明α-CA中无规则卷曲所占百分比最高(64.66%),β-CA中α螺旋和无规则卷曲所占百分比分别为44.76%和44.13%,而γ-CA中α螺旋和无规则卷曲含量分别为39.48%和40.34%。三级结构预测分析表明α-CA折叠较松散,β-CA、γ-CA折叠程度较紧密,且γ-CA具有反复折叠的结构。
- 王玮蔚王冬梅沈佳孙雪
- 关键词：蛋白核小球藻碳酸酐酶生物信息学分析
