涂晓志
- 作品数：14 被引量：23H指数：3
- 供职机构：深圳市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金佛山市重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RNA干扰技术建立人PARP-1缺陷细胞株被引量：3
- 2005年
- 目的建立并鉴定聚ADP核糖聚合酶1(hPARP1)缺陷细胞株,用于研究hPARP1基因的作用机制及其缺陷与DNA损伤发生的关系。方法将用已经构建的pEGFPC1shRNA(包含两个PARP1基因及一个阴性对照)转染支气管上皮细胞(16HBE),使之在16HBE中表达,转染后命名为16HBEP1、16HBEP2及16HBEN。用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中hPARP1基因的表达水平。结果pEGFPC1shRNA在真核细胞成功表达;16HBEP1和16HBEP2的蛋白表达水平分别下降了84.3%及63.7%。结论hPARP1缺陷细胞株的成功建立和鉴定为hPARP1基因功能研究提供了一种有效手段。
- 沙焱曾玉云庄志雄何云胡大林胡恭华杨建平涂晓志
- 关键词：RNA干扰
- 石英接尘者红细胞膜GSH-px活性影响因素的多元回归分析
- 2005年
- 目的探索石英粉尘接尘者外周静脉血谷胱甘肽过氧化物酶活性影响因素。方法以整群抽样研究方法,抽取健康的职业性石英粉尘接尘者179名,分别采集外周静脉血2ml,以肝素钠抗凝,运用二硫代二硝基苯甲酸法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活力,并计算GSH-px活性水平的平均值作为参考标准;以考马斯亮蓝法测定红细胞膜蛋白含量;利用自制的调查表对8个可能的影响因素进行调查,同时,对厂内各工序点的生产环境噪声及粉尘浓度2个因素进行现场监测,共计考察10个可能因素;按样本红细胞膜GSH-px活性大于或小于参考值标准进行二分变量分类,并以此二分变量为应变量,以被考察的10个可能影响因素为自变量,运用成组资料的非条件Logistic回归分析模型进行筛选,寻找主要影响因素。结果接尘工龄、工序点粉尘浓度、防护口罩使用情况、饮茶习惯及吸烟指数等5个因素,最终进入了回归方程(α=0.05)。结论石英粉尘接尘人员红细胞膜GSH-px活性主要受接尘工龄、工序点粉尘浓度、防护口罩使用情况、饮茶及吸烟等5个因素的影响。
- 胡大林刘移民唐冬生彭晓春何云沙焱涂晓志胡恭华杨建平庄志雄
- 关键词：石英粉尘谷胱甘肽过氧化物酶红细胞膜非条件LOGISTIC回归
- 大气环境总悬浮颗粒污染物有机成份的毒作用研究被引量：2
- 2008年
- 目的了解佛山市城区大气环境总悬浮颗粒(TSP)污染物有机成份(EOM)的毒性作用。方法运用大流量自动采样器,在呼吸带(1.2-2.0m)高度1.5m处,对佛山市城西工业区、旧城区及城南高新技术开发区的大气环境TSP污染物分别进行采样;运用二氯甲烷法(DCM法)抽提TSP污染物中的EOM成份(以DMSO定容);三个区的EOM样本均以3种不同浓度(5μl/ml、10μl/ml、20μl/ml)对人体支气管上皮细胞(16HBE)进行毒理学攻击实验;运用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测16HBE细胞DNA损伤程度。结果城西工业区3种不同浓度的EOM均可引起16HBE细胞的DNA损伤效应,其它两区EOM样本的DNA损伤效应不明显。结论EOM是城西工业区大气TSP污染物的重要毒性成份。
- 张晓林胡大林袁建辉方道奎纪卫东涂晓志彭晓春
- 关键词：TSPDNA损伤SCGE
- 空调冷却水军团菌污染调查被引量：5
- 2008年
- 目的调查某市城区空调系统军团菌(Lp)污染的现状,为军团菌肺炎的预防和控制工作提供参考。方法采取随机抽样研究方法,抽取某市城区空调冷却塔水样32份,作军团菌污染情况检测。结果在32份冷却塔水样中,有13份水样检出了军团菌(Lp1型和Lp2-14型),其阳性检出率为41%。结论该市空调冷却塔水军团菌污染较普遍,应当引起高度重视,加强空调系统的定期和不定期的清洗、消毒工作非常必要。
- 胡大林袁建辉方道奎纪卫东涂晓志彭晓春
- 关键词：军团菌
- 氢醌对L-02肝细胞DNA损伤及细胞周期的影响被引量：6
- 2007年
- 目的探讨氢醌(HQ)对体外培养L-02肝细胞DNA损伤及细胞周期的影响。方法将L-02肝细胞用不同浓度(0、5、10、20、40、80、160和320μmol/L)的HQ作用24h,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定L-02肝细胞的相对存活率,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞DNA的损伤状况,并采用流式细胞术检测细胞周期分布状况。结果在0～80μmol/L的范围内,HQ对L-02肝细胞的存活率没有明显的影响(P>0.05);当染毒剂量超过160μmol/L时,其存活率则明显地下降(P<0.01)。随着HQ作用浓度的升高,L-02肝细胞DNA链的断裂程度也随着逐渐增加。0～80μmol/L范围内的HQ作用24h后,L-02肝细胞的细胞周期也发生了明显的改变,表现为S期细胞比例明显增加,G1期细胞的比例下降。结论HQ对L-02肝细胞DNA具有损伤作用,并且在体外能够引起明显的S期细胞阻滞。
- 胡恭华庄志雄夏芳莲涂晓志纪卫东杨建平沙焱
- 关键词：苯氢醌肝细胞DNA损伤细胞周期
- 几种重要DNA修复基因对化学毒性的保护机制及多态性研究
- 庄志雄唐焕文胡大林江高峰杨淋清黄海燕刘建军袁建辉胡恭华庾蕾刘起展何云朱志良陈雯任泽舫沙焱杜柳涛刘汝青王军彩杨晓华蒋友胜杨建平涂晓志叶小明
- 本研究是申请者在自己多年来主持多项国家级、省级、市级课题的基础上，总结提炼的自选项目，属于预防医学领域。 研究系列结合分子生物学实验研究与流行病学调查的方法，建立了研究DNA 修复基因功能的技术平台，构建了人类错配修复...
- 关键词：
- 关键词：DNA修复基因基因多态性
- 人支气管上皮细胞DNA聚合酶β基因RNA干扰后细胞生物学性状分析被引量：1
- 2010年
- 目的探讨人支气管上皮细胞(HBE)DNA聚合酶β(polβ)基因RNA干扰后的生物学性状变化。方法实验设实验组、空载体组、正常对照组、阳性对照组;运用载体介导的RNA干扰技术抑制polβ基因在HBE中的表达,在光学显微镜下观察转染重组子的实验组细胞及正常对照组细胞的形态学特征;绘制细胞生长曲线;分析细胞倍增时间;运用流式细胞技术分析细胞周期;以Hella细胞作阳性对照,采用软琼脂糖恶性程度鉴定实验分析细胞的恶性程度。结果光镜下可见实验组细胞内颗粒物明显增多,体积稍有增大;3组细胞的生长曲线均呈现相似的S型;实验组、空载体组及正常细胞组的倍增时间相近,分别为0.81、0.84和0.79d;3组细胞的G1期(83.9%、81.0%、84.6%)、G2期(4.9%、5.5%、6.2%)和S期(11.2%、13.5%、9.2%)分布相近;实验组细胞未见在双层软琼脂糖中生长出细胞集落,而阳性对照Hella细胞集落明显。结论 polβ基因缺陷对HBE生物学性状的短期影响不明显。
- 胡大林刘移民袁建辉纪卫东方道奎涂晓志杨建平庄志雄
- 关键词：RNA干扰人支气管上皮细胞生物学性状
- 甲醛诱导下易误性跨损伤合成DNA聚合酶ζ及Rev1的表达改变
- 本研究以甲醛为研究对象，通过MTT法确定甲醛对人支气管上皮细胞(16HBE)的剂量-反应关系，用彗星实验检测甲醛的遗传毒性，以实时荧光定量PCR法检测不同剂量毒物刺激下revl、rev3、rev7基因的表达改变，West...
- 涂晓志
- 关键词：脱氧核糖核酸聚合酶
- 文献传递
- 人DNA聚合酶β基因靶向RNA干扰重组子克隆及序列分析被引量：2
- 2006年
- 目的克隆用于人DNA聚合酶β(DNApolymerasebeta,Polβ)基因靶向RNA干扰的双链RNA(doublestrandRNA,dsRNA)寡核苷酸绿色荧光蛋白C1载体重组子“pEGFPC1pU6dsRNA”,为进一步研究人Polβ基因在环境化学污染物所致的DNA损伤修复中的作用机制作准备。方法依据Genbank中人polβ基因的cDNA序列,运用dsRNAoligonucleotidedesigner设计出用于RNA干扰用的dsRNA寡核苷酸序列,并以化学方法合成之。通过重组DNA技术将合成好的dsRNA克隆到含人pU6启动子的pSIRENRetroQ逆转录病毒载体上,以此重组子转化感受态E.coliDH5α,经氨卞青霉素筛选后进行扩增,并抽提质粒。运用EcoRⅠ和BglⅡ消化并回收“pU6dsRNA”目的片段,再将“pU6dsRNA”亚克隆到pEGFPC1上,获“pEGFPC1pU6dsRNA”重组子,并进行酶切鉴定和序列分析。结果经酶切鉴定发现,“pEGFPC1pU6dsRNA”载体重组子处于预期条带位置,序列分析显示与所设计的目的片段序列完全相符。结论作者克隆了用于人Polβ基因靶向RNA干扰的dsRNA绿色荧光蛋白C1载体重组子“pEGFPC1pU6dsRNA”,为进一步研究Polβ基因功能作好了准备。
- 胡大林庄志雄何云纪卫东唐冬生袁建辉方道奎沙焱杨建平涂晓志胡恭华
- 关键词：DNA聚合酶ΒRNA干扰DSRNA重组子
- 抑制聚ADP核糖聚合酶1活性的短发夹RNA载体构建
- 2006年
- 目的构建抑制人聚ADP核糖聚合酶1(hPARP1)活性的短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达载体。方法化学合成2对编码短发夹RNA序列的、靶向hPARP1基因的寡核苷酸,各69对碱基,退火,然后利用BamHⅡ及EcoRⅠ与pSIRENRetroQ载体连接。用EcoRⅠ及BglⅡ切取其中U6启动子及下游的shRNA部分,与pEGFPC1载体重组构建pEGFPC1shRNA载体。结果重组构建的pEGFPC1P1、pEGFPC1P2、pEGFPC1N载体经双酶切电泳分析及插入基因片段序列分析,结果表明330个碱基成功插入到预计位点。结论载体的成功构建,为进一步研究聚ADP核糖聚合酶在DNA修复过程中的功能打下基础。
- 沙焱庄志雄何云胡大林胡恭华杨建平涂晓志
- 关键词：RNAISHRNAPEGFP-C1
