王志胜
- 作品数：40 被引量：40H指数：4
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪伪狂犬病病毒AH02LA株的分离鉴定及其对仔猪致病性研究被引量：12
- 2016年
- 从安徽六安某爆发伪狂犬病猪场送检的流产仔猪脑组织样品中分离获得1株病毒,经鉴定为伪狂犬病毒（pseudorabies virus,PRV）,命名为PRV AH02LA株。PRV AH02LA株的糖蛋白g D和g I基因序列与2011年以来我国分离的变异株同源性最高（99.5%~100%）,而与其他毒株同源性低。该分离株在BHK21细胞上增殖能力强,最高滴度达到109.0TCID50/m L。该分离株对4~5周龄和9~10周龄的PRV阴性猪能引起100%发病和死亡。临床上4~5周龄猪有严重的神经症状,也有明显的呼吸道症状;而9~10周龄猪主要表现呼吸道症状。说明本研究分离获得的PRV AH02LA是一株伪狂犬病毒变异株,其对仔猪的致病力较强。
- 乔永峰顾一奇柳畅呙荣兵许梦微王志胜刘娅梅郭容利刘芳侯继波王继春
- 关键词：伪狂犬病病毒变异株糖蛋白D
- 伪狂犬病病毒三基因缺失弱毒株及其应用
- 本发明提供伪狂犬病病毒三基因缺失弱毒株及其应用，属于动物疫苗领域。该伪狂犬病病毒三基因缺失弱毒株的US3（PK）基因缺失位点为第1～13位核苷酸，TK基因缺失位点为第184～530位核苷酸，gE基因缺失位点为第13～12...
- 王继春许梦微张传健王志胜郭容利郑亚婷陈赛赛
- 猪源伪狂犬病病毒变异株传代致弱株LA2017株的获得与鉴定
- 2021年
- 将猪源伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的强毒变异株AH02LA株在鸡胚成纤维细胞上进行连续传代,获得了不同代次的弱毒株,检测其安全性、免疫效力、生长特性及稳定性,并对其gE基因上、下游片段进行测序。对PRV AH02LA株的F151代进行3轮挑斑纯化,获得了1个毒株并将其命名为PRV LA2017株。用该毒株接种(剂量为106.00TCID50/头)试验猪,在接种后14 d内无任何临床症状;在免疫(106.00 TCID50/头)后21 d攻毒(106.50TCID50/头),所有试验猪未出现任何猪伪狂犬病症状,体温正常,没有排毒。在攻毒前用ELISA检测,PRV gB抗体全部为阳性,PRV gE抗体全部为阴性;在攻毒后14 d这两种抗体均为阳性,体现出良好的安全性与保护性。对照组BarthaK61在攻毒后试验猪全部发病,体温高至40.5℃以上,且均检出排毒。测序结果显示LA2017株的gI部分基因与gE全部基因缺失。该毒株在CEF细胞及ST细胞上生长良好,在CEF上的滴度达到108.0TCID50/mL,在ST细胞上的滴度最高达109.5TCID50/mL,能满足活疫苗生产的要求。LA2017株安全性好,免疫效力强,生长滴度高,可以作为研制针对PRV变异株疫苗的候选毒株。
- 郑亚婷郭容利陈赛赛乔永峰乔永峰许梦微王志胜张传健许梦微王继春
- 关键词：变异株基因缺失免疫效力
- 猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗（LA-A株）的最小免疫剂量和制品保存期的研究被引量：1
- 2020年
- 本研究将伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株(PRV AH02LA株)的gE基因缺失株(LA-A株)接种BHK-21细胞,经纯悬浮培养制备抗原,甲醛灭活后制备油乳剂灭活疫苗,并确定该灭活疫苗的最小免疫剂量和效力检验方法,以及在2~8℃保存期。结果显示:猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗(LA-A株)的效力检验方法为以2.0 mL(抗原含量108.20TCID50)接种4~5周龄PRV阴性健康仔猪,颈部肌肉注射,间隔28 d以相同剂量和方法加强免疫,加强免疫后第21 d,免疫猪血清PRV抗体中和指数应不低于10000,攻毒保护率应不低于80%;最小免疫剂量为1.0 mL(抗原含量107.90 TCID50);制品保存期:在2~8℃保存期为18个月。该研究结果为新型疫苗的研制提供了重要的试验依据。
- 乔永峰郭容利郭容利刘娅梅刘娅梅郑亚婷许梦微王志胜张传健侯继波王志胜王继春
- 关键词：猪伪狂犬病灭活疫苗最小免疫剂量保存期
- 乳酸杆菌S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附及入侵Caco-2细胞的拮抗作用被引量：8
- 2010年
- 【目的】对嗜酸乳杆菌的S-层蛋白（S-layer protein）进行提纯,研究嗜酸乳酸杆菌和S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附和入侵的拮抗作用。【方法】应用阴离子交换柱（DE52）对嗜酸乳酸杆菌的S-层蛋白进行提纯,然后分别研究了嗜酸乳酸杆菌和S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附及入侵Caco-2细胞的作用。【结果】S-层蛋白能显著地抑制鼠伤寒沙门氏菌的黏附及入侵;在竞争、排斥、置换3种黏附试验中,S-层蛋白可显著降低鼠伤寒沙门氏菌的黏附,其相对黏附力分别为1.17%±5.97%、8.71%±1.36%、10.56%±0.92%,差异极显著（p〈0.01）,其中竞争试验效果最好;并且S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附抑制作用极显著高于嗜酸乳酸杆菌（p〈0.01）;此外,S-层蛋白也能显著抑制鼠伤寒沙门氏菌入侵。【结论】乳酸杆菌S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌可产生显著的拮抗作用,这可能与S-层蛋白和鼠伤寒沙门氏菌的宿主黏附受体存在竞争作用有关;提示乳酸杆菌S-层蛋白可用于预防和治疗鼠伤寒沙门氏菌感染,并有望成为抗生素的替代品。
- 李鹏成叶小兰王志胜庾庆华杨倩
- 关键词：S-层蛋白鼠伤寒沙门氏菌CACO-2细胞
- 表达禽流感病毒H5亚型基因重组鸭瘟病毒的构建被引量：1
- 2015年
- 为了应用和发展鸭肠炎病毒(DEV)载体疫苗,基于细菌人工染色体(BAC)人工合成带有p MCMV IE启动子和HA基因序列的表达盒,将其插入到UL55和LORF11之间的非编码区,从而构建出DEV载体疫苗。RFLP分析结果显示DEV BAC及其突变体条带与预期结果存在轻微的差异,将BAC及其突变体拯救后发现其生长性能与亲本病毒没有显著差异。间接免疫荧光和Western blot结果显示,载体疫苗在感染鸡胚成纤维细胞(CEF)后大量表达了HA蛋白质。表明成功构建了能稳定表达禽流感病毒H5亚型基因重组鸭瘟病毒。
- 许梦微王志胜乔永峰顾一奇柳畅侯继波姜平王继春
- 关键词：细菌人工染色体HA基因
- 表达猪流行性腹泻病毒变异株S基因重组伪狂犬病病毒的构建与鉴定被引量：2
- 2023年
- 为研制预防猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株感染的重组伪狂犬病病毒(PRV)活载体疫苗,本研究应用PRV变异株的细菌人工染色体和同源重组技术,将PEDV流行株的S基因表达盒插入PRV基因组UL40与UL41之间的非编码区,构建重组病毒rPRV-S(UL40-41),该毒株还缺失了TK和gE基因。生长动力学显示该毒株在猪睾丸(ST)细胞的增殖效率与亲本毒株相似,表明S基因表达盒的插入对病毒生长性能无显著影响。重组病毒在ST细胞传至15代,PCR和测序鉴定S基因未发生碱基的丢失和变异,间接免疫荧光显示重组病毒感染鸡胚成纤维细胞后可稳定表达S蛋白。应用该毒株接种断奶仔猪,产生低水平的针对PEDV的抗体。该研究为PRV活载体疫苗的构建奠定了基础。
- 张传健郭仕琦郭容利郭容利陈赛赛王志胜王志胜咼荣兵王继春
- 关键词：伪狂犬病病毒重组病毒S基因细菌人工染色体
- 乳酸杆菌S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附及入侵Caco-2细胞的作用
- 本研究首先对嗜酸乳杆菌的S-层蛋白(S-layer protein)进行了提纯,然后研究了嗜酸乳酸杆菌和S-层蛋白对鼠伤寒沙门氏菌黏附和入侵的拮抗作用。结果显示,S-层蛋白能显著地抑制鼠伤寒沙门氏菌的黏附及入侵;在竞争、...
- 李鹏成叶小兰王志胜庾庆华杨倩
- 关键词：S-层蛋白鼠伤寒沙门氏菌CACO-2细胞
- 文献传递
- 表达H5N1血凝素HAl重组乳酸菌的构建及其免疫效力的研究
- 为研制安全、有效、方便操作的口服免疫禽流感活载体疫苗,本试验从健康成年鸡回盲肠黏膜处分离筛选到一株具有较强耐酸能力及较好上皮细胞粘附能力的鸡源乳杆菌DLD17.通过分子生物学的方法,我们构建了重组H5N1血凝素乳酸乳球菌...
- 王志胜
- 关键词：禽流感血凝素口服免疫基因表达
- 文献传递
- 灭活禽流感病毒实现黏膜免疫的重大创新
- 杨倩庾庆华秦涛阴银燕王志胜康海泓梁金逢张晓
- 该项目所属学科分类：兽医免疫学。
中国预防禽流感主要通过肌肉或皮下注射的传统方式，但该方式不仅不能有效控制禽流感发生，还给动物造成较大应激反应。通过黏膜免疫直接切断病毒的入侵途径是预防禽流感发生的最有效方法。由于禽流感...
- 关键词：
- 关键词：禽流感免疫增强剂
