王晓慧
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：青岛市科技局资助项目国家自然科学基金青岛市科技局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 补体C5a 通过促进间充质干细胞凋亡而参与介导糖尿病慢性并发症的发生发展
- 背景：糖尿病并发症的本质是长期高血糖等因素导致的多种组织和细胞(如血管、肾脏、视网膜、神经元等)的病变及损伤;间充质干细胞在组织损伤修复中起着不可替代的作用;已有研究表明,糖尿病患者体内间充质干细胞的功能异常,比如趋化、...
- 朱明王晓慧邱伟何骁邢伟郭韡黄宏徐祥
- 关键词：间充质干细胞细胞凋亡补体
- 重组原核表达载体pGEX-4T-1-eIF5A的构建及表达被引量：1
- 2012年
- 目的构建人eIF5A基因的融合表达载体并在大肠杆菌中诱导表达pGEX-4T-1-eIF5A融合蛋白。方法以pCMV6-XL4-eIF5A作为模板,经PCR技术扩增目的片段,将获得的目的片段重组到原核表达载体pGEX-4T-1上,经酶切鉴定、DNA测序检测插入序列的正确性。将测序正确的重组表达质粒pGEX-4T-1-eIF5A转化到E.coliBL21内,经IPTG诱导后,GSTpull-down后SDS-PAGE电泳分析以及Western blot检测人eIF5A的表达。结果成功构建重组表达质粒pGEX-4T-1-eIF5A,经DNA测序证实插入序列与设计完全一致,GSTpull-down后电泳分析以及Westernblot结果说明大肠杆菌BL21诱导后表达出人eIF5A的glutathioneS-transferase(GST)融合蛋白。功能研究初步证明重组eIF5A在细胞增殖过程中发挥重要作用。结论构建成功的重组原核表达载体能在E.coliBL21内表达eIF5A的GST融合蛋白,为进一步研究人eIF5A蛋白的结构和生理功能如促进创伤修复提供帮助。
- 邱伟李向云王晓慧徐祥黄宏徐云升
- 关键词：质粒融合蛋白
- 高浓度葡萄糖和亮氨酸联合作用对人脐带血间质干细胞增殖和凋亡的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨高浓度葡萄糖和亮氨酸联合作用对人脐带血间质干细胞(human cord blood-derived mesenchymal stem cells,hUCB-MSCs)增殖和凋亡的影响。方法贴壁培养法分离、纯化并传代培养hUCB-MSCs,采用流式细胞术检测第3代hUCB-MSCs表面抗原CD29、CD34和CD44的表达;将hUCB-MSCs分为葡萄糖组、亮氨酸组和联合刺激组,葡萄糖液和亮氨酸液终浓度分别为28和1.35 mmol/L,并设PBS对照组。37℃培养3 d后,采用MTT法检测细胞的增殖活力;流式细胞术Annexin-V/PI染色法检测细胞的凋亡情况;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果 hUCB-MSCs呈CD29+CD44+CD34-。药物处理3 d后,与PBS对照组相比,葡萄糖组和亮氨酸组hUCB-MSCs的增殖活力、凋亡率、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平均无明显变化(P>0.05);而联合刺激组hUCB-MSCs的增殖活力受到明显抑制,凋亡率显著升高,Bcl-2蛋白的表达水平明显降低,Bax蛋白的表达水平明显升高(P<0.01)。结论高浓度葡萄糖和亮氨酸联合作用可抑制hUCB-MSCs增殖,促进其凋亡。本研究在一定程度上为干细胞治疗糖尿病提供了实验依据。
- 王晓慧邱伟徐祥黄宏刘晓萍
- 关键词：葡萄糖亮氨酸细胞增殖
- PAI-1基因4G/5G多态性与中国地区原因不明习惯性流产的Meta分析(英文)被引量：6
- 2013年
- 目的:探讨PAI-A基因4G/5G多态性跟中国地区原因不明习惯性流产的关系。方法:采用Stata10.0对所有纳入结果进行异质性检验,敏感分析,影响分析和发表偏移检验。结果:6篇文章共540名病例和672名对照纳入研究。敏感性分析之后,4G/5G多态性跟习惯性流产明显相关(显性模型OR=1.934,95%CI=1.355-2.760,隐性模型OR=1.657,95%CI=1.142-2.405),共显性模型OR=1.604,95%CI=1.309-1.965)。结论:PAI-1基因4G/5G可能与中国地区原因不明习惯性流产有关。但仍然需要更多的实验证实。
- 王晓慧姜文洁张东峰谢竹田赵新新
- 关键词：PAI-1基因多态性习惯性流产
- 葡萄糖对体外培养hUVECs增殖以及凋亡影响
- 2013年
- 目的分析不同浓度的葡萄糖对体外培养的人脐静脉内皮细胞(hUVECs)增殖及凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法体外培养hUVECs,与不同浓度的葡萄糖(28、42mmol/L)作用48h后,四甲基偶氮唑盐比色法测定hUVECs增殖率,流式细胞仪和Western Bloting技术分别检测细胞凋亡率及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比值的变化。结果随着葡萄糖浓度的增高,hUVECs的增殖率逐渐降低,凋亡率逐渐增高,凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的比值逐渐降低,与空白对照组比较,差异均有显著性(F=11.08～249.49,q=5.38～27.59,P<0.05)。结论高浓度葡萄糖通过调节Bcl-2/Bax比值的变化,诱导hUVECs凋亡,同时抑制hUVECs的增殖。
- 王晓慧刘晓萍邱伟徐祥黄宏
- 关键词：内皮细胞脐静脉葡萄糖细胞增殖
- AP-1和Smad3双功能诱骗寡核苷酸对L929成纤维细胞增殖及纤维化介质表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨AP-1和Smad3双功能诱骗寡核苷酸对L929成纤维细胞增殖及纤维化介质表达的影响。方法设计并合成AP-1和Smad3双功能诱骗寡核苷酸、AP-1,Smad3阳性对照诱骗寡核苷酸及随机诱骗寡核苷酸,然后通过脂质体分别转染进入L929成纤维细胞内。分别通过ELISA法、细胞计数、ATP生物荧光法及免疫印迹法检测合成的诱骗寡核苷酸及其对L929细胞增殖及纤维化介质表达的影响。结果与随机诱骗核酸对照相比,双功能诱骗核苷酸既能明显抑制AP-1的DNA结合活性,又能抑制Smad3的DNA结合活性(P<0.01)。与随机诱骗寡核苷酸相比,AP-1和Smad3双功能诱骗寡核苷酸、AP-1,Smad3阳性对照诱骗核酸均能抑制TGF-β诱导的L929细胞的增殖并且降低其表达FN、PAI-1、c-fos、Collα2、TGF-β1、CTGF等纤维化介质,其中以AP-1和Smad3双功能诱骗寡核苷酸的作用最为显著。结论设计并合成的AP-1和Smad3双功能诱骗寡核苷酸可以有效地抑制L929成纤维细胞的增殖和纤维化介质的表达。
- 亓俊华聂刚徐祥黄宏刘晓萍王晓慧吴梅
- 关键词：AP-1L929成纤维细胞
