王艳双
- 作品数:46 被引量:145H指数:7
- 供职机构:北华大学基础医学院更多>>
- 发文基金:吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金吉林省教育厅科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程天文地球更多>>
- 一种从阿胶中快速提取DNA的优化方法
- 本发明公开了一种从阿胶中快速提取DNA的优化方法。本方法使用DNA纯化柱代替酚、氯仿等有毒的有机溶剂,并经过数次优化,确定了提取阿胶中驴源性基因组DNA的最适条件,有效去除阿胶中的蛋白质成分,最高效率的从深加工的阿胶及阿...
- 孙丽媛陈思秀刘玟妍艾金霞李明成赵云冬王艳双高丽君王雪松段思琪李盈诺王天添
- 文献传递
- 常规RT-PCR快速检测诺如病毒方法的建立被引量:3
- 2020年
- 目的建立一种可同时检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒(Norovirus,NOV)的常规RT-PCR方法.方法针对GⅠ、GⅡ型诺如病毒RdRp区域的基因进行引物设计,优化PCR反应体系及条件,评价该方法的灵敏度、特异度.结果该引物对诺如病毒的特异度强,同一体系内的GⅠ、GⅡ型诺如病毒相互之间无干扰,与轮状病毒、星状病毒、肠道腺病毒、甲型肝炎病毒同时检测无交叉反应;对GⅠ、GⅡ型诺如病毒核酸的最低检测限值是10~3拷贝/μL.结论本研究建立常规RT-PCR检测方法对GⅠ、GⅡ型诺如病毒进行快速检测,具有很好的灵敏度和特异性.
- 曲莉王洪艳李环母润红王艳双
- 关键词:诺如病毒双重RT-PCR
- 基于PCR指纹技术鹿鞭鉴定方法的建立及检测试剂盒的研制被引量:2
- 2021年
- 目的建立鹿鞭及其伪品指纹鉴定方法,开发鹿鞭DNA检测试剂盒。方法采用改良的SDS方法从鹿鞭及牛鞭基因组中提取DNA。以鹿鞭线粒体细胞色素b作为靶基因,设计鹿鞭特异性引物,利用现代DNA指纹技术,研制了鹿鞭DNA提取和检测试剂,建立鹿鞭指纹鉴定方法,开发出鹿鞭DNA检测试剂盒。结果利用PCR指纹技术提取的鹿鞭基因组DNA为21000 bp,纯度为1.80±0.10之间;应用特异性引物可准确鉴别鹿鞭及牛鞭样品,鹿鞭特异性扩增产物DNA分子片段为307 bp,而牛鞭及阴性对照无扩增条带;自主研发鹿鞭DNA检测试剂盒经反复冻融依然有效,多次进行特异性、稳定性和重现性试验,结果完全一致。结论鹿鞭DNA检测试剂盒可作为鹿鞭鉴定的有效方法,该方法客观、准确、方便,可有效区分鹿鞭及其伪品。
- 王雪松艾金霞薛晗孙丽媛王艳双周亭亭李明成张丽华
- 关键词:鹿鞭牛鞭细胞色素B
- 鹿胎多重PCR-RFLP-CE DNA指纹图谱及鉴定方法
- 本发明公开了一种涉及中药材鹿胎的鉴定方法,具体是采用多重PCR(多重聚合酶链式反应)、RFLP(限制性片段长度多态性分析)结合CE(毛细管电泳技术)建立鹿胎DNA指纹图谱及鉴定方法。具有分辨率高、灵敏度高、高稳定性、操作...
- 周亭亭苑广信艾金霞王雪松王艳双
- 文献传递
- 狗源性DNA检测试剂盒的研制与评价被引量:3
- 2020年
- 本研究旨在研制一种快速鉴定肉制品中狗源性成份的DNA检测试剂盒,并对此试剂盒做出方法学评价。以改良SDS-PK法提取狗肉及掺假肉品种(狐肉、貂肉)基因组DNA,选择具有种属特异性的线粒体细胞色素B基因作为鉴定靶基因,应用Primer5.0设计特异性引物,建立狗源性DNA检测方法,组装狗源性DNA检测试剂盒,并进行特异性、稳定性及重复性评价。结果表明,本试剂盒可有效检测肉制品中狗、狐、貂源性成分,DNA提取效率高,仅0.05 g肉样即可提取浓度高于100 ng/μL的基因组DNA,OD260/280处于1.80~2.00之间,最低检测限为10-4 ng/μL,所有检测步骤可在4.5 h内完成,操作简便,特异性高。试剂盒所采用试剂安全无毒,反复冻融20次后仍然有效,可于-20℃保存一年。随机抽取12份市售样品进行检测,有3份样本中存在狐、貂肉冒充狗肉现象,掺假率高达25%,该结果与长春食品药品检验中心检测结果一致。狗源性DNA检测试剂盒灵敏性高、特异性强,检测结果准确稳定,具有良好重复性,适用于狗肉快速定性检测。
- 王天添刘佳琳李亚晗王艳双李明成孙丽媛
- 关键词:试剂盒线粒体细胞色素B
- 蕲蛇毛细管电泳DNA指纹图谱及鉴定方法
- 本发明公开了一种涉及中药材蕲蛇DNA鉴定技术,该方法具体是CTAB法提取蕲蛇DNA,构建毛细管电泳指纹图谱及鉴定方法。具有分辨率高、操作简便、快速、结果准确等特点,能够用于蕲蛇样品的鉴定。
- 苑广信李盈诺张丽华王冰梅付桂莲孙云朋王艳双周亭亭王雪松李梓僮牛思懿卢忠超林豪
- 文献传递
- 中药材沙苑子及其伪品的超微指纹特征研究被引量:1
- 2019年
- 目的:应用扫描电子显微镜技术对沙苑子及其伪品紫云英子超微结构进行研究,建立沙苑子的超微指纹鉴别方法。方法:分别在35倍、800倍、3000倍电镜下观察沙苑子正品(扁茎黄芪种子)及其伪品紫云英子的超微指纹特征,并进行对比分析研究。结果:沙苑子和紫云英子在颜色、形状上略有差异,在扫描电镜下观察其超微结构有显著差异。结论:本研究建立的超微指纹鉴别方法可简便、快速、准确的区分沙苑子和紫云英子,为沙苑子药材鉴别提供科学依据。
- 刘玟妍陈思秀董春香王雪松王艳双孙丽媛
- 关键词:沙苑子扫描电子显微镜
- 快速鉴定松茸及其制品的可视化核酸试纸条方法建立
- 2024年
- 松茸(Tricholoma matsutake)是一种稀有、珍贵的野生食用菌,至今还无法人工栽培,目前菌菇市场中存在大量假冒松茸商品。文章建立了快速鉴定松茸及其制品的可视化核酸试纸条法。该方法设计特异性引物,通过聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增特异性鉴定松茸特异性基因标志物,优化扩增条件为退火温度63 ℃、15个循环。扩增产物使用胶体金核酸试纸条检测,松茸样本均出现2条红色条带,同时凝胶电泳验证可扩增出352 bp特异性DNA片段。其他菌类及空白对照均在质控线出现1条红色条带,检测线无显色条带,且凝胶电泳无扩增条带,结果特异良好。该方法灵敏度高、稳定性强,模板DNA的最低检出量为0.1 ng/μL,检测试纸条可在常温保存至少12个月。所建立的松茸特异性基因标志物成分检测的可视化核酸试纸条方法检测性能优异,结果稳定可视、操作简便,适用于松茸原料和加工制品的现场检测。
- 朱建宇尹荣王艳双常明珠周亭亭
- 关键词:松茸聚合酶链式反应
- 狗源性DNA检测试剂盒及鉴定方法
- 本发明涉及肉类检测技术领域,是一种狗源性DNA检测试剂盒,其特征是由样本前处理液、线粒体DNA提取体系、PCR反应体系三部分体系组成。PCR反应体系总体系为20μL,其中含有Taq Plus PCR Master Mix...
- 孙丽媛王天添陈思秀刘玟妍关奕泽艾金霞李明成赵云冬王艳双高丽君王雪松
- 文献传递
- 茜草蒽醌对肝癌SMMC-7721细胞抗氧化作用被引量:3
- 2010年
- 目的探讨茜草提取物蒽醌单体对人肝癌SMMC-7721细胞的抗氧化作用。方法采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,TAB法检测丙二醛(MDA)活力。结果茜草蒽醌能增加肝癌SMMC-7721细胞SOD活力,降低MDA活力。结论茜草蒽醌具有抗氧化的作用,可能是蒽醌抗肿瘤的重要机制之一。
- 王艳双罗速
- 关键词:人肝癌SMMC-7721细胞抗氧化