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秦春香: 作品数：13 被引量：21H指数：4; 供职机构：广西兽医研究所更多>>; 发文基金：广西留学回国人员基金广西壮族自治区科技攻关计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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禽呼肠病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析被引量：4: 2006年; 根据GenBank上的禽呼肠病毒（ARV）S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT—PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp，编码98个氨基酸；P17蛋白基因ORF全长为441bp，编码146个氨基酸。这13个ARV毒株P10、P17蛋白基因核苷酸同源性分别在96．6%～100%和95．2％～99．3%之间，推导的氨基酸同源性分别在98．2％～100%和91．9%～99．0%之间。将这13个ARV毒株与Gen Bank上其他正呼肠病毒毒株，包括番鸭株（DRV）和飞狐上分离到的内尔森海湾病毒（Nelson Bay Vir US，NBV）及两个澳洲分离株（ARM—1和SOM-4）进行同源性比较和遗传进化树分析，结果表明，呼肠病毒有地域和种类的差别。; 秦春香谢芝勋谢丽基; 关键词：禽呼肠病毒克隆

禽呼肠孤病毒非结构蛋白的克隆表达及重组蛋白ELISA方法的建立: 根据GenBank上的禽呼肠病毒(ARV)S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因OR...; 秦春香; 关键词：禽呼肠孤病毒非结构蛋白蛋白纯化酶联免疫吸附试验; 文献传递

禽呼肠孤病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析: 本文根据GenBank上的禽呼肠孤病毒(ARV)S1基因序列,设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物.对ARV的13个毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定.结果显示,13个ARV毒株的P10蛋白...; 秦春香谢芝勋谢丽基; 关键词：禽呼肠孤病毒非结构蛋白基因克隆; 文献传递

禽呼肠孤病毒δNS和P17非结构蛋白作为ELISA鉴别诊断抗原的研究: 采用已构建好的PGEX-4T-1-δNS和PGEX-4T-1-P17质粒,原核表达了禽呼肠孤病毒(ARV)的两个非结构蛋白δNS和P17,将这两个蛋白进行包涵体纯化后作为包被用抗原,分别进行间接ELISA,并确定它们的最...; 谢芝勋秦春香谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤; 关键词：禽呼肠孤病毒原核表达间接ELISA; 文献传递

利用σ3和σ2重组蛋白检测禽呼肠孤病毒抗体ELISA的建立被引量：9: 2009年; 将纯化好的两个ARV结构蛋白σ3和σ2作为包被用抗原,分别进行间接ELISA,并确定它们的最佳抗原包被浓度分别为9.5、12.0μg/mL;一抗血清的稀释度为1∶200;HRP酶标羊抗鸡IgG稀释度为1∶5000,初步建立了能检测ARV抗体的σ3-ELISA、σ2-ELISA以及σ3、σ2两个蛋白同时包被的σ3-σ2-ELISA检测方法。分别用上述3种方法对制备的ARV SPF鸡阳性血清进行检测,结果阳性检出率分别为90.91%、69.70%和100%。表明σ3-σ2-ELISA方法在ARV抗体检测方面具有较高的敏感性。; 秦春香谢芝勋谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤; 关键词：禽呼肠孤病毒结构蛋白间接ELISA

禽呼肠孤病毒δNS和P17非结构蛋白作为ELISA鉴别诊断抗原的研究: 采用已构建好的PGEX-4T-1-δNS和PGEX-4T-1-P17质粒，原核表达了禽呼肠孤病毒(ARV)的两个非结构蛋白δNS和P17，将这两个蛋白进行包涵体纯化后作为包被用抗原，分别进行间接ELISA，并确定它们的最...; 谢芝勋秦春香谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤; 关键词：禽呼肠孤病毒原核表达非结构蛋白 ELISA方法

禽呼肠孤病毒μNS非结构蛋白基因的克隆及序列分析: 本文根据GenBank中禽呼肠孤病毒(ARV)M3基因序列设计并合成了一对跨越μNS非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物。对ARV的10个毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定。结果表明,10个毒株μNS...; 秦春香谢芝勋谢丽基; 关键词：禽呼肠孤病毒克隆

禽呼肠孤病毒σNS基因的克隆及其功能分析被引量：5: 2007年; 采用RT-PCR技术对8株禽呼肠孤病毒(ARV)σNS基因进行了扩增,将获得的PCR产物分别与pMD18-T载体连接。测序结果表明,所构建的克隆质粒中均含有相应的σNS蛋白基因,大小为1 107bp。经DNAStar软件分析,除R1株外,其他ARV毒株的σNS基因核苷酸及其推导氨基酸序列与标准毒株S1133和1733株的同源性很高。Antheprot 5.0蛋白分析软件的分析结果表明,σNS蛋白无跨膜区,拥有较多的疏水区和抗原位点,可作为诊断候选蛋白。; 谢丽基谢芝勋秦春香; 关键词：禽呼肠孤病毒克隆

禽呼肠孤病毒P17蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其ELISA检测方法的建立被引量：7: 2007年; 用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARV S1133株进行了RT-PCR扩增。扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。经0.2 mmol/LIPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4 ku,占菌体总蛋白的34%。表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%。Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性。以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA。; 谢芝勋秦春香谢丽基; 关键词：禽呼肠孤病毒原核表达酶联免疫吸附试验

禽呼肠孤病毒δ3和δ2重组蛋白作为ELISA检测抗原的研究: 将纯化好的两个ARV结构蛋白δ和δ作为包被用抗原,分别进行间接ELISA,并确定它们的最佳抗原包被浓度分别为9.5μg/mL和12.0μg/mL;一抗血清的稀释度为1:200;HRP酶标羊抗鸡IgG稀释度为1:5000。...; 秦春香谢芝勋谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤; 关键词：禽呼肠孤病毒结构蛋白间接ELISA; 文献传递