程腊梅
- 作品数：30 被引量：83H指数：5
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程自动化与计算机技术更多>>
- 血清及细胞因子对人骨髓间质干细胞增殖的影响被引量：12
- 2003年
- 目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 5 %～ 30 %的血清浓度范围内 ,骨髓间质干细胞集落数随血清浓度的升高而增多。bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6等细胞因子可促进骨髓间质干细胞的增殖。结论 :血清浓度与细胞因子bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL
- 雷军程腊梅谭孟群王绮如
- 关键词：骨髓间质干细胞增殖血清细胞因子
- SPARC基因敲除小鼠的繁育及子代基因型的鉴定
- 2010年
- 目的:探讨富含半胱氨酸的分泌型酸性蛋白(SPARC)基因敲除小鼠的繁殖和鉴定方法,为进一步研究SPARC蛋白的功能奠定基础。方法:将所引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型。提取子鼠鼠尾基因组DNA,用PCR法扩增SPARC和Neo基因片段,通过限制性内切酶酶切反应,证实PCR扩增产物的正确性;应用Westernblot检测SPARC蛋白质的表达,进一步证实PCR鉴定方法的可靠性。结果:SPARC基因杂合子小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,SPARC基因缺失纯合子小鼠有繁殖能力。琼脂糖凝胶电泳结果显示PCR产物分子量大小与预期的目的基因片段相对分子质量大小一致,酶切和Westernblot结果证实PCR结果可靠。结论:PCR方法能够准确鉴定SPARC基因突变小鼠基因型。
- 罗盘罗振赵秀华肖娜程腊梅
- 关键词：基因敲除基因型鉴定
- 小鼠肝脏窦状内皮细胞分离和培养的一种新方法被引量：5
- 2010年
- 目的:建立小鼠肝窦状内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSEC)的分离培养方法,研究其生物学特性。方法:中性蛋白酶消化小鼠肝脏组织,Percoll密度梯度离心分离消化后的细胞悬液,用内皮细胞筛选培养基及酶差异消化法纯化LSEC;免疫细胞化学染色检测LSEC的表面标志,分析LSEC的超微结构,观察DiI荧光标记的乙酰低密度脂蛋白(acetylated-low density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)摄取能力,以体外成血管能力分析LSEC的功能。结果:分离纯化后的细胞呈典型鹅卵石样内皮细胞形态,这些细胞表达VIII因子,不表达CD31,CD90和CK19,具有窦状内皮细胞特征性的窗孔结构;能摄取DiI-Ac-LDL,并有一定的成血管能力。结论:建立了一种分离、培养LSEC的方法,为研究LSEC的功能奠定了基础。
- 赵秀华罗彬罗盘程腊梅
- 关键词：条件培养基窗孔小鼠
- 人类卵黄囊造血及卵黄囊内皮细胞的培养
- 2004年
- 马丽霞程腊梅黄艳红王绮如
- 关键词：造血功能内皮细胞细胞培养造血基质细胞
- 诱导人巨核细胞系细胞Meg-01分化的机制探讨
- ＜正＞巨核系细胞生成的调节是一个十分复杂的过程。造血微环境中的基质细胞、基质细胞分泌的的细胞外基质和各种造血因子对巨核系细胞的生成均有重要作用。我室实验结果已表明骨髓成纤维细胞条件培养液（bone marrow fibr...
- 周小莹黄艳红程腊梅王绮如谭孟群
- 文献传递
- 诱导人胚胎干细胞向造血细胞分析
- ＜正＞ 应用基质细胞条件培养液及细胞因子诱导人类胚胎干细胞系chCHE-3细胞生成造血干/祖细胞。实验分4组。第1、2、3组分别为:基质细胞条件培养液+细胞因子组;基质细胞条件培养液组;细胞因子组。第4组为自发分化组。经...
- 赵惠萍王绮如程腊梅谭孟群
- 文献传递
- 间充质干细胞在1型糖尿病治疗中的应用被引量：3
- 2009年
- 胰岛移植是治疗1型糖尿病最有希望的方法,但由于供体不足而受到限制。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)具有自我更新和分化为3个胚层细胞的能力,是糖尿病β细胞替代治疗的另一可供选择的细胞来源。MSC能分化为β细胞替代受损的β细胞;同时MSC能迁移到受损的胰腺,通过分泌多种生物活性物质和调节性的增长因子,促进血管生成,改善β细胞生存微环境,修复受损胰腺。此外,MSC还具有调节免疫作用,通过减少自体免疫介导的对胰岛的攻击,从而阻止胰岛β细胞的进一步受损。
- 肖娜程腊梅
- 关键词：间充质干细胞1型糖尿病细胞移植
- 一种从脐血培养高增殖潜能内皮祖细胞的新方法被引量：1
- 2013年
- 【目的】建立一种培养脐血高增殖潜能内皮祖细胞(High proliferative potential-endothelial progenitorcells,HPP-EPCs)的稳定经济的新方法,并将由HPP-EPCs增殖而来的内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)与脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)进行体外比较。【方法】分离脐血单个核细胞,接种到纤连蛋白(Fibronectin,FN)预处理的器皿中,用含有血管内皮生长因子(VEGF)和内皮细胞生长添加物(ECGS)等的MCDB131培养基培养,4d后去除未贴壁细胞,继续培养10～21d后,可以得到HPP-EPCs来源的EPC克隆;从人脐带中分离HUVECs,用含有EGF的MCDB131培养基扩增培养;同时分离培养人成纤维细胞(Humanembryonic fibroblast cells,hEFs)。通过免疫表型、UEA1结合试验、Matrigel试验、DiI-Ac-LDL吞噬试验等对分离的脐血EPCs进行鉴定,以HUVECs为阳性对照,hEFs为阴性对照。【结果】1个HPP-EPC可在2个月中扩增出108～1010个EPCs细胞,在长期体外培养中可以保持正常核型。脐血EPCs和HUVECs均可表达CD31、CD144、vWF,结合UEA1,并能在Matrigel上形成毛细血管样结构,也能吞噬DiI-Ac-LDL。【结论】本研究所建立的新方法能从脐血中高效经济地获得较原始的EPCs,并能在体外长期扩增培养,有望成为缺血性疾病细胞替代治疗有效的种子细胞。
- 孙璇梅花卢光琇程腊梅
- 关键词：脐血内皮祖细胞脐静脉内皮细胞细胞培养
- LFA-1和VLA-4参与人高增殖潜能内皮祖细胞与血管内皮的黏附和跨内皮迁移被引量：7
- 2008年
- 为了了解淋巴细胞功能相关抗原1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)和极迟反应抗原4(very late antigen 4,VLA-4)在高增殖潜能内皮祖细胞(high proliferative potential endothelial progenitor cells,HPP-EPCs)归巢过程中与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中的作用,利用流式细胞术检测HPP-EPC中整合蛋白β1和β2的表达以及小鼠骨髓内皮细胞相应的受体的表达。利用体外黏附和迁移实验研究经过功能级别的中和抗体阻断VLA-4和LFA-1后HPP-EPC黏附和迁移细胞数目的变化。结果表明,HPP-EPC表达整合蛋白β1和β2,活化后小鼠骨髓内皮细胞表达细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1);加CD11a抗体组黏附细胞或CD49d抗体组黏附和迁移细胞均较同型对照抗体组少,而且加CD11a和CD49d两种抗体联用组黏附和迁移细胞明显减少,其细胞数较任何单一抗体组少。结论:LFA-1和VLA-4在HPP-EPC与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中发挥了重要的作用。
- 段华新卢光琇程腊梅
- 关键词：LFA-1VLA-4
- 间充质干细胞染色体制片技术的优化被引量：2
- 2019年
- 目的 探索间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)染色体制片的最佳条件,以满足扩大生产以及临床应用的质控需要。 方法 常规染色体制片,从MSCs细胞的培养浓度、秋水仙碱作用的时间以及低渗的时间等方面对现有的制片技术进行优化。 结果 经过反复的实验,将MSCs染色体的最佳制片条件确定为T25培养瓶的40%~50%[约(1~2)×106个细胞],秋水仙碱作用的时间为2 h 10 min,低渗时间为1 h。 结论 用上述条件制备的MSCs染色体细长,条带清晰,完全能够满足细胞遗传学的临床质控要求。
- 陈茂胜李闯程德华谭跃球梅花王斯琪李想程腊梅
- 关键词：间充质干细胞染色体制片核型分析
