葛正珍
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 硼对大豆愈伤组织的细胞结构及形态的影响被引量：6
- 2009年
- 硼是植物生长发育必需的微量元素之一,对维持植物细胞壁与细胞膜的结构和功能发挥起着重要的作用。在对大豆愈伤组织诱导培养技术成熟的基础上,研究高浓度的硼对大豆愈伤组织的细胞结构和细胞形态的影响,探讨组织培养中硼对愈伤组织诱导与再生的调节作用。采用植物组织培养的方法,在硼酸含量不同的培养基上诱导大豆下胚轴产生愈伤组织,并进行继代培养试验。结果表明:下胚轴在硼酸浓度大于70mg·L-1的培养基上诱导20d后,一些新生的愈伤组织结构疏松,细胞分散,细胞间的正常连接无法形成。把这些结构疏松的愈伤组织在正常的培养基MS+2,4-D0.4mg·L-1上进行继代试验,发现细胞仍具有分裂能力,新生的愈伤组织细胞结构更加松散,单细胞的数目增多,并且细胞的形态也各异。
- 葛正珍杨光宇仲艳杜青珍孟祥勋
- 关键词：大豆硼愈伤组织细胞结构细胞形态
- 硼介导的大豆转基因方法的初探
- 本试验以大豆愈伤组织作为转基因受体材料，进行新的转化方法的研究。
实验首先建立了大豆愈伤组织诱导以及离体培养的完整体系，愈伤组织的诱导率达到100％。在此基础上研究B营养对大豆愈伤组织细胞结构及其形态的影响。结...
- 葛正珍
- 关键词：大豆硼营养转基因植物蛋白质基因工程
- 文献传递
- 人抗黏病毒蛋白-MxA基因克隆及在大肠杆菌中的表达
- 2009年
- 目的克隆人抗黏病毒蛋白-MxA基因,构建其原核表达载体并进行表达、纯化、活性鉴定,为深入开展该蛋白功能的研究奠定基础。方法从IFN-β诱导的A549细胞系中提取总RNA,通过RT-PCR技术扩增出MxA全长cDNA,克隆于pUC119载体,酶切鉴定后并经测序证实序列正确,再克隆于pET-32a(+)载体上构建表达载体pET-32a(+)-MxA,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达并优化诱导条件,通过NTA-Agarose亲和层析和割胶电洗脱法获取纯化MxA蛋白,用SDS-PAGE电泳分析表达产物,并通过对病毒VSV的抑制作用鉴定其活性。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示RT-PCR扩增出两条片段,大小同预计片段相符,并经测序证实与公布的MxA基因序列一致;重组载体转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳初步鉴定,目的蛋白约占总菌体蛋白的25%,与预计的分子量91kd相一致。用NTA-Agarose亲和层析法可获得纯度>95%的目的蛋白,割胶电洗脱回收法可获得纯度>90%的目的蛋白。结论克隆了人抗黏病毒蛋白-MxA基因,克隆基因在大肠杆菌中获得了较高水平的表达,并通过两种方法获得了该蛋白的纯化物。
- 刘鹏吴康王坤葛正珍孟祥勋
- 关键词：MXA原核表达纯化
