邹镇
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 日本血吸虫23KD膜蛋白的原核表达与纯化及双价膜锚定型和分泌型表达疫苗抗感染效果的比较研究
- 本文对日本血吸虫23KD膜蛋白的原核表达与纯化及双价膜锚定型和分泌型表达疫苗抗感染效果的比较进行了研究。本研究分为两个部分：
第一部分：日本血吸虫23KD膜蛋白的原核表达与纯化。
目的：构建日本血吸虫23KD...
- 邹镇
- 关键词：免疫生物学
- 血吸虫多基因非融合性膜锚定表达疫苗的研究被引量：2
- 2008年
- 目的构建日本血吸虫多基因非融合性膜锚定表达疫苗pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,并研究其免疫原性及免疫保护作用。方法构建日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14)、谷胱甘肽-S-转移酶(Sj26)和副肌球蛋白(Sj97)的跨膜共表达质粒pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,转染HeLa细胞。通过RT-PCR法检测Sj14、Sj26和Sj97mRNA的表达,免疫荧光(IFA)检测Sj14、Sj26和Sj97蛋白的表达。用纯化的该质粒免疫BALB/c小鼠(100μg/只),设生理盐水和空载体对照组,20只/组,每隔2周加强免疫1次,共免疫3次。末次免疫2周后,每组取10只小鼠,眼球取血并断颈处死,取脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞。分别检测免疫小鼠血清中总IgG抗体及脾淋巴细胞培养上清干扰素-γ(IFN-γ)水平,淋巴细胞刺激指数(SI)及NO释放量,并分析脾淋巴细胞亚群。各组中余下小鼠每只经腹部感染40±1条尾蚴,45d后剖杀,计数成虫数及肝卵数,计算减虫率和减卵率。结果构建的质粒可在体外表达。疫苗组、生理盐水组和空白质粒组血清总IgG抗体含量分别为(5.62±0.64)、(1.22±0.20)及(1.48±0.36)mg/ml,疫苗组与各对照组差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。疫苗组、生理盐水组和空白质粒组小鼠腹腔巨噬细胞NO含量分别为(321.19±18.03)、(184.12±11.05)及(213.51±15.93)nmol/ml,疫苗组与生理盐水组间差异有统计学意义(P<0.05)。疫苗组、生理盐水组、空白质粒组小鼠脾淋巴细胞刺激指数分别为(2.25±0.29)、(1.18±0.07)及(1.22±0.09),疫苗组显著升高(P<0.01)。疫苗组INF-γ水平与各对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01);CD4+和CD8+T细胞百分比明显升高。疫苗组减虫率和肝减卵率分别为39.9%和43.94%。结论pIRES-Sj97-Sj14-Sj26疫苗具有较强的免疫原性,可对日本血吸虫感染的小鼠产生一定保护作用。
- 唐成武刘朔婕马彦彬梁靓郭萍王淑玉邹镇高红段秋红程继忠戴五星
- 关键词：日本血吸虫免疫保护作用
- 香菇多糖联合丙肝核酸疫苗诱导抗原特异性免疫应答研究被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨香菇多糖(Lentinan,LNT)联合丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3核酸疫苗诱导NS3抗原特异性免疫作用。方法:将不同剂量香菇多糖与等量HCVNS3质粒(100μg/只),采用初次加强免疫法联合免疫BALB/c小鼠。第二次免疫10天后取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,与NS3抗原多肽共育作为效应细胞。另培养NS3抗原致敏的P815细胞作为靶细胞。采用MTT法分别检测NS3抗原特异性T细胞增殖反应和细胞毒T细胞特异性杀伤反应(CTL)。同时采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-4和IFN-γ分泌水平。结果:研究发现高剂量及中剂量香菇多糖与NS3质粒联合在效靶细胞比为50:1时,可明显加强NS3抗原特异性CTL反应,与单用NS3质粒相比有显著差异(P<0.01和P<0.05);中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用明显增强NS3抗原特异性T细胞增殖反应(均为P<0.01);细胞因子分析显示中剂量和低剂量香菇多糖与NS3质粒联用使IFN-γ分泌增加(均为P<0.01)。结论:采用初次加强免疫法将中剂量香菇多糖(0.1ml/10g)与HCVNS3质粒联合免疫BALB/c小鼠,可激发明显增强的抗原特异性T细胞增殖和CTL反应,并伴有大量的IFN-γ分泌,提示香菇多糖可作为丙肝病毒NS3核酸疫苗的免疫佐剂,加强抗原特异性免疫应答效应。
- 邹镇彭佳蓓谢潜红向明
- 关键词：非结构蛋白3香菇多糖核酸疫苗
