陈连祥
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市基础研究重大（重点）项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 蛋白磷酸酶2A调节亚基PR55-γ基因克隆及真核细胞表达被引量：1
- 2014年
- 目的:构建蛋白磷酸酶2A(PP2A)调节亚基PR55-γ(PPP2R2C)慢病毒过表达质粒,并在U87细胞株中稳定过表达PPP2R2C,探讨PPP2R2C对PP2A活性的影响。方法:通过反转录(RT)-PCR扩增PPP2R2C的编码序列并克隆至慢病毒载体PWPIR-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)中,获得PWPIR-EGFP-PPP2R2C载体,通过酶切鉴定、质粒测序确定质粒克隆成功,用磷酸钙沉淀法将质粒转导至U87细胞中,流式细胞分析术检测U87细胞转导效率,蛋白质印迹法检测目的蛋白表达,通过PP2A蛋白免疫共沉淀法检测PP2A活性。结果:PWPIR-EGFP-PPP2R2C载体构建及U87细胞株稳转过表达PPP2R2C成功,并且细胞转导效率超过90%,外源性PPP2R2C表达率上升近23倍,过表达PPP2R2C能够增强PP2A活性。结论:PWPIR-EGFP-PPP2R2C载体构建成功,并通过慢病毒转导细胞U87细胞株表达PPP2R2C成功,过表达PPP2R2C能够增强PP2A活性,为进一步研究PPP2R2C功能奠定基础。
- 魏波华梁惠欣王翠翠陈连祥叶静陆一鸣
- 关键词：蛋白磷酸酶2A真核表达
- RHPS4限制端粒重复序列结合因子2蛋白的端粒保护作用被引量：1
- 2015年
- 目的 :探讨抗肿瘤药物RHPS4影响端粒重复序列结合因子2(TRF2)对端粒保护作用的机制。方法:在过表达TRF2的A375细胞体系中加入RHPS4,通过蛋白质印迹及免疫荧光结合共聚焦显微镜成像技术检测细胞DNA损伤情况,通过流式细胞技术及细胞增殖实验检测药物对细胞增殖的影响。结果 :在A375细胞中过表达外源性TRF2能抑制DNA损伤的修复,但过表达TRF2不能抑制RHPS4诱导端粒损伤,RHPS4诱导的细胞周期停滞和细胞衰老过表达不依赖于TRF2的表达量。结论:TRF2高水平表达不能拮抗RHPS4的致端粒损伤和细胞周期抑制的作用,肿瘤细胞中高表达TRF2不是应用RHPS4药物的反指征。
- 王翠翠应亦林陈连祥魏波华梁惠欣叶静陆一鸣
- 关键词：端粒抗肿瘤治疗DNA损伤
- 欧美青少年公共营养政策及对我国的启示被引量：1
- 2013年
- 青少年饮食与营养问题是一项涉及家庭、学校、社会等众多因素的综合性事务。解决青少年的各类不健康饮食行为必须充分发挥学校-家庭-社会以及营养相关服务机构的共同力量。近年来,部分欧美发达国家对于青少年膳食营养问题开展了深入研究,先后出台了众多相关性政策,并取得了一定效果。我国青少年营养政策的制定起步较晚,借鉴欧美发达国家在青少年学校营养改善措施、家庭营养政策等方面的先进经验,对我国青少年膳食营养政策制定与营养状况的改善具有十分重大的现实意义。
- 陈连祥张眉
- 关键词：青少年
- 端粒保护蛋白复合体在氧化应激中作用
- 2014年
- 端粒特异性保护蛋白复合体（sheherin）是与端粒结合的六蛋白复合体，包括：TRFI．TRF2，TIN2，Rapl，TPPl和POTI。6种成分以不同的方式参与维持端粒的结构和功能稳定：（1）TRFI和TRF2负性调节端粒长度。（2）TRF2介导t-环结构形成^[1-2]以及稳定t-环结构^[3]，与拓扑异构酶II相互作用维持端粒的拓扑结构^[4]。（3）POTI、Rapl等维持3’悬臂稳定。（4）Sheherin盖帽作用抑制DNA损伤系统激活^[5]。（5）shelterin还能募集大量非端粒特异性蛋白成员，包括ERCCI／XPF，Apollo等形成端粒蛋白网络，共同肌同参勺端粒保护和端粒复制延伸^[6]。正是由于sheherin的作用，使得端粒得以躲过DNA损伤反应（DNADamgae Response，DDR）体系的攻击，并在维护染色体稳定、避免染色体末端受核酸酶降解和荩因重排中起重要作JH。大量研究表明shelterin除保护端粒作用外，其可参与细胞多种反应过程，本文将重点讲述sheherin在氧化应激进程中作用。
- 陈连祥朱小伟邢骏姚明玲叶静陆一鸣
- 关键词：蛋白复合体端粒长度氧化应激拓扑异构酶IIDNA损伤TRF2
