黄明钜
- 作品数：14 被引量：52H指数：4
- 供职机构：重庆三峡中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域：医药卫生艺术更多>>
- FOLR1慢病毒表达载体的构建及鉴定被引量：1
- 2013年
- 本研究通过构建叶酸结合蛋白1(FOLR1)基因的慢病毒表达载体并进行表达鉴定。采用PCR技术扩增出基因全长,克隆至pWPI载体质粒,重组阳性克隆行PCR和测序鉴定,将重组载体质粒与辅助质粒共同转染人肾上皮(293T)细胞包装病毒,病毒颗粒感染人卵巢上皮癌(SKOV3)细胞,流式分选,RT-PCR和Western blot检测病毒感染后细胞中的FOLR1基因和蛋白表达。经鉴定结果显示重组载体质粒构建成功,293T细胞高效包装此慢病毒,携带FOLR1基因的慢病毒感染SKOV3细胞后可见大量绿色荧光细胞,流式分选后经两种方法分别检测出FOLR1基因和蛋白稳定表达。这为探讨FOLR1基因在卵巢恶性肿瘤中的生物学功能提供了实验基础。
- 黄明钜王琪张玮尹巧云李状李力
- 关键词：慢病毒表达载体卵巢癌
- FOLR1基因对顺铂作用卵巢癌上皮细胞生物学影响的体外实验研究
- 黄明钜张玮王琪阳志军李力
- 文献传递
- 卵巢恶性肿瘤组织叶酸结合蛋白表达检测及其临床意义被引量：3
- 2012年
- 背景与目的:叶酸结合蛋白(folate binding protein,FOLR1)又称为叶酸受体蛋白,对细胞分裂、增殖和生长有着非常重要的作用。FOLR1在正常组织中表达较低,但在卵巢癌中存在过度表达。本研究探讨卵巢恶性肿瘤组织中FOLR1的表达及其临床意义。方法:采用Western blot检测80例卵巢恶性肿瘤组织、50例卵巢良性肿瘤组织及30例正常卵巢组织中的FOLR1表达情况,分析其与卵巢恶性肿瘤临床病理及多药耐药的相关性。结果:FOLR1在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织和卵巢恶性肿瘤组织中的表达量依次增高(P<0.01)。FOLR1在卵巢恶性肿瘤临床分期中Ⅰ～Ⅱ期的表达量低于Ⅲ～Ⅳ期(P<0.05)。FOLR1在铂类药物耐药型卵巢恶性肿瘤中的表达量低于铂类药物敏感型(P<0.01);治疗后肿瘤进展者的表达量低于缓解者(P<0.01)。FOLR1在黏液性肿瘤中的表达量低于浆液性肿瘤(P<0.05),恶性卵巢肿瘤有淋巴结和远处器官转移的高于无转移者(P<0.05),其表达量与患者的不同肿瘤病理分类、是否有大网膜转移和腹水量无明显相关(P>0.05)。取FOLR1表达量界值为3.115时来判断卵巢肿瘤性质,ROC曲线的Youden指数最大,卵巢恶性肿瘤FOLR1表达量的高低与中位生存时间长短差异无明显相关(P>0.05),Cox模型多因素分析显示,FOLR1表达量不是影响患者生存预后的独立因素。结论:FOLR1可作为一种新型的卵巢恶性肿瘤早期诊断标志物,并可成为判断卵巢恶性肿瘤多药耐药潜在标志之一。
- 黄明钜王琪张玮尹巧云李状李力
- 关键词：卵巢恶性肿瘤耐药
- 携带人二氢叶酸还原酶基因慢病毒表达载体构建及鉴定
- 2012年
- 目的:构建携带人二氢叶酸还原酶(DHFR)基因的慢病毒表达载体pWPI。方法:采用PCR方法扩增二氢叶酸还原酶cDNA全长,与EZ-T克隆载体连接,HindIII及BamHI-HF限制性内切酶双酶切回收的PCR片段并补平其缺口。慢病毒系统载体使用pWPI系统,采用PmeI酶切载体后回收片段,将其磷酸化,T4酶连接载体与目的基因。表达载体鉴定均采用核苷酸序列测定,重组质粒采用脂质体转染293T包装细胞后获得包装的病毒颗粒。结果:成功扩增二氢叶酸还原酶全长并连接入pWPI载体构建成重组表达载体DHFR-pWPI,重组质粒测序结果显与DHFR基因的同源性达100%,按标准生产程序转染293T后有DHFR基因的表达。结论:成功采用慢病毒载体系统构建了二氢叶酸还原酶重组慢病毒转基因,为探讨DHFR在肿瘤多药耐药过程中的分子机理奠定基础。
- 李状王琪张玮阳志军黄明钜李力
- 关键词：DHFR293T细胞
- 同步放化疗对中晚期宫颈鳞癌患者生存状况的影响
- 2016年
- 目的探讨同步放化疗对中晚期宫颈鳞癌患者生存状况的影响。方法选择2008年2月至2009年1月重庆三峡中心医院收治的126例中晚期宫颈鳞癌患者为研究对象,依据随机数字表法分为两组,放化疗组(63例)进行同步放化疗,对照组(63例)进行单纯放疗。比较两组患者的临床疗效、不良反应及1.5、3、5年生存率。结果放化疗组总有效率高于对照组[90.5%(57/63)比74.6%(47/63)],差异有统计学意义(P<0.05)。放化疗组患者的白细胞下降、血红蛋白下降、血小板下降、恶心和呕吐、血液毒性、胃肠反应的发生率均高于对照组[54.0%(34/63)比28.6%(18/63),49.2%(31/63)比17.5%(11/63),57.1%(36/63)比22.2%(14/63),66.7%(42/63)比19.0%(12/63),38.1%(24/63)比19.0%(12/63),39.7%(25/63)比15.9%(10/63)],差异有统计学意义(P<0.05)。对两组患者随访5年,放化疗组1.5、3、5年总生存率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论同步放化疗治疗中晚期宫颈鳞癌成效显著,患者3、5年生存率明显升高,值得临床推广。
- 刘怡黄明钜谭晓燕
- 关键词：宫颈鳞癌中晚期放化疗生存率
- 178例宫颈癌放疗疗效及预后相关因素分析被引量：18
- 2014年
- 目的探讨宫颈癌患者采用放射治疗疗效及影响放疗预后的相关因素。方法回顾性分析178例宫颈癌患者的临床资料,观察放疗效果及并发症发生情况,同时分析患者年龄,FIGO分期,病理类型、肿瘤大小、分化程度及血红蛋白水平与放疗预后的关系。结果 178例患者1年生存率为84.27%(150/178),3年生存率为70.22%(125/178)。宫颈癌患者放疗的预后与年龄、病理分级、肿瘤直径、FIGO分期及血红蛋白含量有关,(χ2=6.73,10.57,11.95,12.76,11.41,P均<0.05)。178例患者中,19例发生放射性直肠炎,12例发生放射性膀胱炎,2例患者因直肠穿孔及小肠梗阻死亡,晚期并发症的发生率占18.54%。结论宫颈癌患者外照射及适型强调放疗疗效确切,其预后与多肿瘤分期、分化程度及是否分血等多种因素有关,可采取相应的干预措施提高放疗效果。
- 毛世华张涛谈宗国黄明钜冉文华
- 关键词：宫颈癌放疗预后
- 男实习医生在妇产科实习存在的问题与解决对策被引量：1
- 2015年
- 医学生在学校经过理论课程的学习，掌握了基本理论知识，再通过对实物、实例的学习，将理论与临床相结合，成长为一名合格的医务工作者，临床实习是必须要经历的过程。带教老师手把手的示范，进行初步的临床技能培训，对将来成长为一名合格的医生来说，意义重大［1］。近年来，由于社会环境的影响，患者的自我保护意识增强，医务人员的法治意识相对滞后，妇产科学又是一门特殊的专业学科，完全涉及女患者的隐私，实践性非常强，男实习医生（以下简称男生）接触女患者受到一定的限制。因此，男生在妇产科的实习过程中注定会遇到诸多实际困难［2］。本研究旨在分析存在的具体问题，找到如何解决问题对策，跨越此障碍，能让每位男生很好的完成在妇产科的实习任务。
- 黄明钜毛世华谭晓燕
- 关键词：实习医生产科实习临床技能培训自我保护意识女患者
- 顺铂对FOLR1基因表达上调的卵巢上皮性癌细胞生物学功能的影响被引量：5
- 2013年
- 目的探讨顺铂作用于叶酸结合蛋白（FOLRl）基因表达上调的卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞系SKOV3细胞后对其生物学功能的影响。方法将FOLRl基因与pWPI质粒进行慢病毒包装，构建重组质粒pWPI—FOLRl并转染人SKOV3后得到pWPI—FOLR1-SKOV3细胞，作为重组质粒转染组；以同样方法将pWPI质粒转染入SKOV3后得到pWPI—SKOV3细胞，作为空载体转染组；并设立未转染的SKOV3细胞为空白对照组，采用逆转录（RT）一PCR技术和蛋白印迹法分别检测3组细胞中FOLRlmRNA和蛋白的表达。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，检测并绘制3组细胞的生长曲线，检测3组细胞对JJl^13的敏感性[以50％抑制浓度（IC50）表示，选择重组质粒转染组的IC50作为下一步实验中顺铂浓度的基准]，并检测不同浓度（分别为0．5×IC。1×IC。2×IC。即分别为1．8、3．6、7．2μg/ml；下同）顺铂作用不同时间（分别为24、48、72h，下同）后3组细胞生长的抑制率；采用流式细胞仪检测不同浓度顺铂作用不同时间后3组细胞的凋亡率，及不同浓度顺铂作用48h后3组细胞的细胞周期比例；高效液相色谱法检测同一浓度（3．6μg/ml）顺铂作用48h后3组细胞内N$t3的浓度。结果RT—PCR技术和蛋白印迹法分别检测显示，重组质粒转染组细胞中有FOLRlmRNA和蛋白的表达，而空载体转染组、空白对照组细胞中无FOLRlmRNA和蛋白的表达。MTT比色法检测显示，重组质粒转染组细胞生长速度最快、对顺铂最敏感（其IC50最低，为3．6μg／ml）、相同作用条件（包括顺铂的浓度和作用时间）下其细胞生长的抑制率最高，分别与空载体转染组、空白对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；而空载体转染组与空白对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。流式细胞仪检测显示，3组细胞的凋亡率随着顺铂浓度（分别为1．8、3．6、7．2肛
- 黄明钜张玮王琪蔡祖艾李力
- 关键词：卵巢肿瘤顺铂
- 改良保留盆腔自主神经宫颈癌微创根治手术的疗效和安全性被引量：4
- 2014年
- 目的探究腹腔镜下完成宫颈癌保留神经平面广泛子宫切除的安全性和疗效。方法将102例宫颈癌患者在知情前提下随机分为对照组50例和改良组52例。对照组患者行NSRH,改良组患者行NPSRH,比较2组的安全性和疗效。数据用χ2检验,组间采用t检验。结果改良组减少了手术时间(P<0.05),且与对照组比较同样安全(P>0.05);改良组患者的疗效优于对照组,但组间差异不显著(P>0.05)。结论腹腔镜下NPSRH不但简化了保留神经手术的繁琐步骤,而且安全有效。
- 黄明钜毛世华谈宗国谭晓燕刘怡陈爱中
- 关键词：腹腔镜宫颈癌
- 卵巢癌组织中二氢叶酸还原酶基因的表达及其临床意义被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨卵巢癌组织中二氢叶酸还原酶基因(dinhydrofolate reductase,DHFR)的表达及其临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR法检测80例卵巢癌组织、50例良性卵巢组织及30例正常卵巢组织中的DHFR mRNA表达情况,分析其与卵巢癌临床病理及多药耐药的相关性。结果:1)DHFR mRNA在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中表达量分别为0.584±0.234、0.895±0.783和0.197±0.412,经比较差异有统计学意义(P<0.001,P=0.027,p<0.001)。2)卵巢癌组织中DHFR mRNA表达量与患者临床分期及病理分级差异无统计学意义(P>0.05),但在上皮性癌中浆液性癌组织中DHFRmRNA表达量则明显高于黏液性和内膜样癌,经比较差异有统计学意义(P<0.001)。3)卵巢癌组织中DHFR mRNA表达量与患者的腹水量、淋巴结转移和远处器官转移无明显相关(P>0.05),但大网膜转移者肿瘤组织中DHFR mRNA表达量则低于无转移者(P=0.044)。4)在卵巢癌患者中治疗后缓解者组织中DHFR mRNA表达量低于肿瘤进展者(P<0.001);而铂类药物敏感型患者肿瘤组织中DHFR mRNA表达量0.130±0.103也低于铂类药物耐药者0.341±0.701(P=0.011)。5)DHFRmRNA表达量判断卵巢肿瘤性质的ROC曲线Youden指数最大值所对应的数值为0.331,DHFR mRNA表达量>0331的患者中位生存时间为16.4个月,而≤0.331的患者中位生存时间为44.5个月,差异有统计学意义(P<0.001),且Cox模型多因素分析亦显示DHFR mRNA表达量为影响预后的独立因素(P=0.018)。结论:DHFR mRNA在正常和良性卵巢组织中表达量高于卵巢癌组织,提示DHFR参与正常组织细胞生理代谢,而在卵巢癌中DHFRmRNA在铂类耐药组织中表达较高,在铂类敏感组织表达低,提示DHFR与卵巢癌多药耐药相关。
- 李状王琪张玮阳志军唐步坚黄明钜李力
- 关键词：卵巢癌实时荧光定量PCR预后分析
