仲琳
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属口腔医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 超声微泡造影剂介导pEGFP-N_1质粒转染HGFs的实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨超声破坏微泡介导pEGFP-N1质粒转染人牙龈成纤维细胞的可行性、优化转染的条件及转染效率。方法体外原代培养HGFs。以pEGFP-N1质粒为报告基因,微泡造影剂为载体,用超声辐照介导质粒pEGFP-N1转染HGFs。实验组分为质粒组、微泡+质粒组、超声+质粒组、超声+微泡+质粒组,超声+微泡+质粒组按不同的转染条件分成亚组。转染48h后倒置荧光显微镜下观察GFP的表达,MTT法检测HGFs活性。结果超声微泡介导pEGFP-N1质粒对HGFs的转染效率明显高于其他实验组(P<0.05)。优化转染条件后,频率300KHz,声强1.5W/cm2,连续波,辐照时间60s,微泡浓度10%,质粒浓度6.67μg/ml时,转染率较高。结论在一定条件下,超声微泡造影剂能够促进外源基因对HGFs的转染。
- 骆书美张云燕钟晓波仲琳
- 关键词：超声学造影剂人牙龈成纤维细胞基因转染
- 超声微泡介导人骨形成蛋白-2基因在人牙周膜成纤维细胞中的表达
- 近年来以生长因子局部应用为代表的牙周再生治疗受到广泛关注和研究。骨诱导形成蛋白.2（BMP2）是唯一能够单独诱导成骨的生长因子，在牙周组织中的分子调节作用也已经比较明确。它可诱导牙周组织中未分化间充质细胞分化为成骨细胞和...
- 仲琳
- 关键词：牙周再生超声微泡人牙周膜成纤维细胞增强型绿色荧光蛋白
- 文献传递
- pEGFP-N_1-BMP_2真核表达载体的构建及其经超声微泡介导转染HPDLFs后的表达被引量：3
- 2010年
- 目的构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,并检测其经超声微泡转基因技术转染人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)后的瞬时表达情况。方法从人胎盘滋养层细胞系中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得目的基因人骨形成蛋白-2(hBMP2)基因片段,连接pMD19-T载体并测序正确后与真核荧光表达载体pEGFP-N1连接,酶切鉴定后利用超声微泡转基因技术转染入HPDLFs中,通过荧光显微镜和RT-PCR检测目的基因在HPDLFs中的表达。结果成功克隆人BMP2基因,重组质粒pEGFP-N1-BMP2经PCR及双酶切鉴定均证实hBMP2基因已与pEGFP-N1正确重组。pEGFP-N1-BMP2经超声微泡转染HPDLFs后,通过绿色荧光观察和RT-PCR检测证实hBMP2能够在体外培养的HPDLFs内有效的转录和瞬时表达。结论成功构建pEG-FP-N1-BMP2真核表达载体,通过超声微泡转基因技术成功转染入HPDLFs并得到有效表达,为进一步研究该质粒与超声微泡转基因技术在牙周再生基因治疗中的应用提供实验基础。
- 仲琳钟晓波张云燕骆书美Nameeta Shrestha齐进李春光
- 关键词：牙周再生超声微泡人骨形成蛋白-2增强型绿色荧光蛋白人牙周膜成纤维细胞
