侯盼盼
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华中科技大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- BK通道在细胞膜上的单分子定位及空间分布被引量：1
- 2014年
- 目的:研究大电导、钙离子和电压激活的钾离子通道(BK通道)在HEK293细胞膜上的单分子定位及其总体空间分布情况。方法:分别用mEos2、Dronpa等荧光蛋白标记BK通道的α亚基和辅助性β2亚基,将这些质粒在HEK293细胞内瞬时转染以表达通道蛋白,然后用激光共聚焦荧光显微成像、全内反射荧光显微成像、光敏定位荧光成像等技术观察BK通道的亚细胞定位及单分子分布,并用电生理实验技术检测荧光蛋白对BK通道有影响。结果:激光共聚焦荧光显微成像和全内反射荧光显微成像技术只能在亚细胞水平定位通道蛋白,BK通道在细胞膜上聚集并形成不规则的蛋白簇,它的α亚基和β2亚基在细胞膜上完全共定位;光敏定位荧光成像技术成功定位BK通道蛋白簇里面的单分子,虽然α和β2亚基紧紧靠在一起,它们之间依然存在空间距离;BK通道的质膜表达和功能特性不受荧光蛋白的影响。结论:BK通道蛋白簇里面包含大量的α和β2亚基的蛋白单分子,它们紧密地聚集在一起,但是并没有完全共定位,在分子水平上揭示了BK通道α和β亚基功能耦合的结构基础,为以后研究大分子蛋白质间的相互作用机制提供了很好的分子模型,光敏定位荧光成像技术作为一种全新的单分子荧光成像手段,在基因表达、信号通路、蛋白质相互作用等许多重要生命活动的研究中发挥重要作用。
- 刘永锋侯盼盼夏程龙王伟孔文娟丁久平
- 关键词：BK通道共定位
- BK通道的动态钙离子敏感性以及α/β亚基间相互作用机制的研究
- BK通道是一种钾离子通道，因具有最大的单通道电导（约300pS）而得名，可以同时响应跨膜电压及胞内钙离子浓度两种信号。BK通道由α功能亚基（Slo1）和β辅助亚基组成。α亚基形成了通道的主要功能结构，它含有7次跨膜域S0...
- 侯盼盼
- 关键词：生物医学钾离子通道
