冷勇
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
- 供职机构：西南大学动物科技学院动物医学系更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金重庆市自然科学基金乌鲁木齐市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 以杆状病毒为基础的表面展示与基因表达系统
- 2013年
- 杆状病毒表达载体系统已被广泛应用于真核和原核生物的各种蛋白生产。通过与杆状病毒囊膜蛋白gp64融合表达或与特异性的锚定部位结合,可以将外源蛋白质展示在杆状病毒表面。研究发现,携带哺乳动物启动子的重组杆状病毒能将外源基因传递入哺乳动物细胞,实现外源蛋白的有效表达,表达蛋白的结构更接近天然蛋白。杆状病毒作为一种新型的基因表面展示和基因传递系统,具有广阔的应用前景,本文对杆状病毒作为外源蛋白表面展示技术和作为基因传递载体在哺乳动物细胞中表达外源基因的研究进展进行了综述。
- 冷勇宋振辉张鹦俊齐小娟
- 关键词：杆状病毒基因传递
- 猪传染性胃肠炎病毒M、N基因重组杆状病毒的构建及其口服免疫小鼠诱导抗体水平测定被引量：3
- 2015年
- 利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)M和N结构蛋白基因,将其分别克隆入载体FastBacTM Dual,获得转移质粒pFastBacTM Dual-M和pFastBacTM Dual-N,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-M和Bacmid-N;在Cellfection作用下,将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rBac-M和rBac-N。间接免疫荧光试验(IFA)检测表明,杆状病毒表达的M蛋白和N蛋白能够被特异性阳性血清识别,重组蛋白具有较好的反应原性。将重组杆状病毒rBac-M和rBac-N口服免疫小鼠,收集小鼠粪便检测抗TGEV sIgA抗体水平,采集血液检测血清中抗TGEV IgG。结果显示,重组杆状病毒(rBac-M和rBac-N)可诱导小鼠产生粘膜免疫和体液免疫应答。试验结果初步预示了杆状病毒经口服途径作为抗原递呈载体的可行性,也为开展TGEV口服免疫研究奠定了基础。
- 宋振辉卿家超冷勇买买提.艾孜子齐晓娟叶翠芳
- 关键词：M基因N基因口服免疫
- 猪传染性胃肠炎病毒M、sM基因重组杆状病毒的构建及病毒样颗粒的组装被引量：8
- 2013年
- 利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）M和sM结构蛋白基因，将其分别克隆人载体pFastBac^TM Dual，获得转移质粒pFastBac^TM Dual-M和pFastBac^TM Dual-M-sM，将重组质粒转化至DHl0Bac感受态细胞，经抗性与蓝白斑筛选，获得杆状病毒重组质粒Bacmid-M和Bacmid-M-sM，在Cellfection作用下，将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9，获得重组杆状病毒rBac-M和rBac-M-sM。通过WesternBlot、间接免疫荧光试验（IFA）进行检测，结果显示：重组蛋白在杆状病毒感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达。将重组杆状病毒rBac-M和rBae-M-sM分别感染sf9昆虫细胞，进行TGEV病毒样颗粒（VLPs）的体外组装试验。结果表明，M蛋白在sf9细胞内单独表达，M蛋白和sM在sf9细胞内共同表达，都可形成TGEV病毒样颗粒，而且病毒粒子大小不等，直径在61～101nm。试验结果为进一步研究TGEV结构蛋白在病毒装配过程中的作用提供了理论依据。
- 冷勇宋振辉卿家超翟少华买买提.艾孜子
- 关键词：M基因SF9细胞病毒样颗粒
- 猪传染性胃肠炎病毒的分离鉴定及结构基因重组杆状病毒的构建
- 猪传染性胃肠炎（Transmissible gastroenteritis，TGE）是由冠状病毒科猪传染性胃肠炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus，TGEV）引起的以仔猪呕吐、严...
- 冷勇
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒杆状病毒结构蛋白
- 文献传递
