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刘金玲: 作品数：35 被引量：72H指数：4; 供职机构：沈阳农业大学畜牧兽医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科技计划项目国家科技攻关计划更多>>; 相关领域：农业科学文化科学医药卫生语言文字更多>>

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PRRSV感染对猪外周血来源的树突状细胞免疫表型及Th1/Th2偏转潜能的影响被引量：2: 2016年; 为了研究PRRSV感染对猪外周血来源的树突状细胞成熟及Thl及Th2型细胞因子分泌水平的影响,进一步探讨PRRSV调控树状细胞Th1和Th2型免疫应答的潜在机制,揭示PRRSV感染对机体免疫机能的影响。我们从猪外周血分离单核细胞,诱导培养为树突状细胞后接种PRRSV共培养,显微镜观察细胞的形态,流式细胞术分析细胞表面的共刺激分子,半定量RT-PCR法检测Thl型细胞因子IL-12和Th2型细胞因子IL-10的mRNA转录水平。结果显示:经鉴定证实获得形态及表型典型的树突状细胞;流式分析结果表明PRRSV接种组树突状细胞表面的SLA-II-DR类分子、CD40分子、CD80分子均明显低于未接种组,差异极显著(P<0.01);RT-PCR半定量结果表明PRRSV接种组的IL-12mRNA转录水平低于未接种组,差异显著(P<0.05),而IL-10mRNA转录水平高于未接种组,差异显著(P<0.05)。结果表明:PRRSV感染影响树突状细胞的成熟,并能通过高效表达Th2型细胞因子IL-10降低Th2型细胞因子Th1而影响Thl/Th2的平衡。; 刘金玲魏澍沈国顺赵玉军潘树德刘丽霞; 关键词：树突状细胞免疫表型 TH1/TH2

PRRSV辽宁分离株ORF3基因的克隆与序列分析被引量：1: 2007年; 以辽宁地区某猪场猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病料为材料,采用RT-PCR方法特异性扩增编码猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白的ORF3基因全长cDNA,结果该分离株ORF3基因cDNA编码区长765bp,可编码254个氨基酸残基,与美洲型代表株VR-2332和欧洲型代表株LV进行同源性比较,氨基酸同源性分别为87.8%和54.5%,因此推测辽宁分离株属于美洲型。; 刘丽霞庄天中潘树德刘金玲; 关键词：ORF3基因克隆

猪繁殖与呼吸综合征实验室诊断方法的分析与比较: 2008年; 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是世界范围内一种严重危害养猪业的传染病，也是目前我国规模化猪场的主要传染病。临床症状表现为生产母猪的繁殖障碍以及呼吸道症状。PRRSV感染后引起的病理及组织学变化往往不易与其它传染病区分，因此PRRS的确诊必须依赖于实验室手段。但各种方法有各自的适用范围，本文将对其进行简要的分析和比较。; 李雅志何剑斌刘金玲; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征 PRRSV感染规模化猪场呼吸道症状组织学变化

牛瘟PCR检测方法的建立: 2004年; 建立一个可以识别牛瘟病毒亚洲株的PCR方法。根据已发表的牛瘟病毒 7个毒株的F基因序列 ,设计合成了一对扩增跨幅为 43 6bp的引物 ,这对引物对日本之中村系兔化牛瘟病毒感染的 Vero细胞毒和日本之中村 IV系兔化牛瘟病毒感染的兔血毒、组织毒进行 RT-PCR扩增 ,结果该方法对该牛瘟病毒 RNA的扩增取得了与预期大小一致的 RT-PCR产物 ,而对照样品的扩增全为阴性 ,说明具有很好的特异性 ;该方法最低可检测到 0 .1 6ng的牛瘟病毒RNA。; 刘金玲支海兵; 关键词：牛瘟牛瘟病毒 PCR

小反刍兽疫诊断技术的研究进展被引量：5: 2008年; 小反刍兽疫（Peste des petits ruminants，PPR）是FAO／OIE规定的A类烈性传染病，我国规定为一类动物疫病，是一种严重的烈性、接触性传染病，主要感染小反刍兽，以发热、口腔溃疡、咳嗽、腹泻和死亡为主要特征。该病于1942年首次发现于西非，近年来该病呈蔓延的趋势，由西非、中非和东非向东扩散，目前已传播到西亚和南亚地区，且有上升趋势。尤其2007年，在我国周边国家和地区形成了大规模的爆发。虽然至今我国尚未发现该病，但它作为一种重大的跨国动物疫病严重的威胁着我国的动物卫生安全，因此对该病的研究具有重大的现实意义。; 魏澍刘金玲; 关键词：小反刍兽疫动物疫病接触性传染病烈性传染病口腔溃疡

兽医免疫学实验“任务驱动”教学模式初探被引量：2: 2014年; 为了建立一种集实验、技能训练与创新为一体的新型免疫学综合设计性实验教学模式,将"任务驱动式"教学法应用到免疫学实验课程中,采用改善实验条件、优化实验内容、合理按排实验时间;增加设计性、综合性、实践性实验内容;加强对实验课的组织、指导、重视实验成绩考核和记分等方法,多方面对兽医免疫学实验进行教学改革。结果表明该教学模式有效地提高了兽医免疫学实验教学的质量。; 刘金玲沈国顺潘树德高维凡于立辉刘丽霞; 关键词：实验课教学改革

高致病性猪蓝耳病病毒GST-N融合蛋白的原核表达及纯化: 2010年; 为了构建高致病性猪蓝耳病病毒(HPPRRSV)GST-N融合蛋白,试验采用RT-PCR技术扩增ORF7基因片段,对其胶回收产物进行测序分析,再将目的片段连接到质粒PGEX-6P-1上,得到重组质粒PGEX-6P-1-N,并转化到E.coliBL21(DE3)感受态细胞中,筛选阳性菌落,并用IPTG进行诱导表达,应用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行检测与鉴定。结果表明:该序列与GenBank公布的HN2007的同源性为97%;重组质粒在大肠杆菌中获得了表达,表达产物为42ku的GST-N融合蛋白。; 李晓辉何建斌刘金玲罗芳; 关键词：ORF7基因原核表达

高致病性猪蓝耳病病毒GST-Nsp2融合蛋白的原核表达被引量：1: 2012年; 通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HPPRRSV)Nsp2基因进行克隆表达以获得蛋白,为该病的诊断预防奠定基础。采用自行设计的引物对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒进行RT-PCR扩增,将产物基因回收纯化测序后构建PGEX-6P-1-Nsp2原核表达载体,用BL21(DE3)细胞进行转化,挑选阳性菌,用IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE电泳和Western-Blot对表达产物进行鉴定。获得了HPPRRSV Nsp2基因序列,成功构建了PGEX-6P-1-Nsp2原核表达载体,经37℃,4 h获得表达产物,将表达产物进行SDS-PAGE和Western-Blot分析,获得了一条约42 ku浓缩蛋白带。本实验的克隆表达产物为高致病性蓝耳病病毒Nsp2目的蛋白。; 刘金玲魏澍潘树德; 关键词：高致病性 NSP2基因原核表达

猪肺炎支原体黏附蛋白的研究进展被引量：4: 2012年; 猪肺炎支原体是导致猪慢性肺炎的致病因子,其致病过程主要由表面黏附蛋白介导完成。综述了肺炎支原体表面黏附蛋白(P36、P46、P65、P97、P102、P110、P159和P216)的研究进展,为猪慢性肺炎的治疗和诊断研究奠定了基础。; 潘树德席东李学俭刘宝山刘金玲林荣峰; 关键词：黏附蛋白猪肺炎支原体致病因子